Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2018 год
1-4 номера

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2007, № 3

Подписаться на 2019 год

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 3'2007

ЦИТОКИНОВЫЙ БАЛАНС ПРИ БОЛЕЗНЯХ ПАРКИНСОНА И ВИЛЬСОНА - КОНОВАЛОВА

О.Н. Учакина, П.Н. Учакин, М.В. Мезенцева, А.В. Карабанов, В.В. Полещук, И.А. Иванова-Смоленская, Ф.И. Ершов

Проблема экстрапирамидных (ЭП) заболеваний стала в последние годы особенно острой в связи с увеличением продолжительности жизни и ростом числа больных. Вторичные иммунодефициты играют важную роль в патогенезе ЭП заболеваний. Целью настоящего исследования являлось изучение цитокинового каскада у больных болезнью Паркинсона (БП) и болезнью Вильсона - Коновалова (БВК) на фоне симптоматического лечения.

Ключевые слова: нейродегенерация, экстрапирамидные заболевания, интерлейкины, интерферон.

В сыворотке крови больных выявлено сниженное содержание IFNγ, IL-1β, IL-2, IL-6, и IL-10 и повышенное содержание IL-4, IL-12, и TNFα. Методом ОТ-ПЦР выявлены статистически достоверные изменения в экспрессии генов цитокинов Th1 (IFNγ и IL-12) и Th2 (IL-4 и IL-6). Обнаружена очень низкая способность иммуноцитов к продукции IFNα in vitro, при нормальных уровнях экспрессии генов и концентрации IFNα в сыворотке крови больных ЭП заболеваниями. Это позволяет предполагать подавление противовирусного звена иммунитета на посттрансляционном уровне. Именно поэтому применение индукторов интерферона для коррекции состояния иммунной системы у этих больных может быть более эффективно, чем использование рекомбинантных форм интерферона. (Цитокины и воспаление. 2007. Т. 6, № 3. С. 63-68.)

Проблема экстрапирамидных (ЭП) заболеваний стала в последние годы особенно острой в связи с увеличением продолжительности жизни и ростом числа больных. ЭП заболевания обусловлены дегенерацией нервных клеток центральной нервной системы (ЦНС), в результате чего происходит дисбаланс в синтезе нейромедиаторов и, как след-ствие, нарушение регуляции ЦНС нормального функционирования организма. Взаимодействие физиологических систем в организме осуществляется посредством растворимых медиаторов (нейропептидов, гормонов). В иммунной системе такими медиаторами служат цитокины, которые также несут и эффекторные функции. Действие медиаторов нервной и эндокринной систем на иммунную систему хорошо известны. С другой стороны, увеличивается количество данных, подтверждающих, что цитокины являются основными передатчиками между иммунной системой и мозгом [5]. Развитие адекватного иммунного ответа напрямую зависит от баланса клеточно-опосредованных (Th1) и гуморальных (Th2) иммунных реакций, регулируемых двумя группами цитокинов. Эти группы находятся в антагонистических взаимоотношениях, угнетая развитие цитокинового каскада противоположного типа. Дисбаланс в продукции Th1 и Th2 цитокинов может привести к развитию вторичных иммунодефицитов. Кроме иммунорегулирующих свойств, все цитокины обладают выраженными психо- и нейротропными свойствами. Обнаружена положительная корреляция между уровнем IL-6 и тяжестью компульсивной симптоматики [16]. Использование IFNα, IL-1β, IL-6 и TNFα в высоких дозах может приводить к развитию симптомов тревоги, психоза [4] и депрессии [14].

Вторичные иммунодефициты играют важную роль в патогенезе ЭП заболеваний [1]. Люди, страдающие экстрапирамидными расстройствами, подвержены частым инфекционным заболеваниям, которые протекают, как правило, в тяжелой форме. Этот факт лишний раз подтверждает тесное и, что более важно, двунаправленное взаимодействие между иммунной и нервной системами. Патофизио-логические, биохимические и молекулярные основы экстрапирамидных заболеваний различны. При болезни Паркинсона (БП) происходит дегенерация нейронов дофаминергической системы, в первую очередь - нигростриальной. Кроме того, имеется множество данных о наличии иммунологических нарушений у больных БП [6, 10, 13]. Болезнь Вильсона - Коновалова (БВК) является хроническим наследственно-дегенеративным заболеванием, которое характеризуется поражением печени и подкорковых узлов ЦНС. Патогенез этого заболевания связан с генетически обусловленным нарушением обмена меди в организме, вследствие чего наблюдается избыточное накопление меди в различных органах и тканях. Выявлены различные изменения иммунных показателей при БВК [11], которые коррелируют с клиническим течением заболевания и эффективностью лечебных мероприятий.

Основной целью настоящего исследования являлось изучение цитокинового каскада у больных ЭП заболеваниями на фоне симптоматического лечения. Поиск специфических для отдельных нозологических форм изменений в иммунной системе является одним из ключевых вопросов нейроиммунологии.

Материалы и методы

Были обследованы 7 больных БП с дрожательной или дрожательно-ригидной формами, 26-38 баллов по шкале UPDRS (средний возраст - 60,1+-7,7 лет, длительность заболевания - от 2 до 7 лет), и 9 больных БВК с дрожательной или дрожательно-ригидной формами по классификации Н.В. Коновалова (средний возраст - 27,5+-12,7 лет, длительность заболевания - от 2 до 25 лет). На момент обследования все пациенты проходили курс поддерживающей терапии на базе ГУ НИИ неврологии РАМН и никто не болел острыми распираторно-вирусными заболеваниями. Забор крови проводили пять раз с интервалом в три месяца (I-V точки соответственно). Образцы венозной крови забирали в гепаринизированные стерильные пробирки в утреннее время (9:00-11:00). Для получения сыворотки венозную кровь собирали в чистые сухие пробирки без гепарина.

Определение интерферонового статуса проводили биологическим методом по методике, разработанной в отделе интерферонов НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи [2]. Определяли продукцию IFNα, индуцируемую вирусом болезни Ньюкасла (NDV); продукцию IFNγ индуцируемую фитогемагглютинином (ФГА); уровень циркулирующего IFN в плазме крови; уровень спонтанно продуцируемого IFN.

Тотальную клеточную РНК из мононуклеаров периферической крови людей выделяли гуанидин-тиоцианатным методом с фенол-хлороформной экстракцией [9]. Комплементарную ДНК (кДНК) синтезировали из 2мкг мРНК при 42 °С в течение 1 часа, используя олиго(dT) праймеры и обратную транскриптазу MuLV. Амплификацию кДНК проводили с термостабильной ДНК-полимеразой Thermus aquaticus (5 U/мкл). Использовали олигонуклеотидные праймеры, приводящие к наработке фрагментов кДНК IFNα, IFNγ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, TNFα. В качестве количественного маркера использовали актиновый ген, одинаково экспрессирующийся во всех тканях. Продукты ПЦР анализировали электрофоретически в 1,5 %-ном агарозном геле с 0,5 мкг/мл бромистого этидия.

Концентрацию цитокинов IFNα, IFNγ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, TNFα в сыворотке крови измеряли иммуноферментным методом с использованием коммерческих реагентов ("R&D Systems", USA).

Математическую обработку полученных результатов проводили параметрическими и непараметрическими методами статистики с применением статистической программы SigmaStat (SPSS Inc.). Статистическую достоверность (p < 0,05) числовых данных определяли методом ANOVA, категориальных - критерием хи-квадрат (χ2). При выявлении негауссовского распределения полученных данных, а также при математической обработке ряда параметров (соотношение цитокинов, титры интерферонов при биологическом тестировании) производили логарифмическое преобразование результатов.

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!


Начата подписка на 2019 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2019 Цитокины и Воспаление