Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер
3 номер 4 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2009, № 2

Подписаться на 2018 год

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 2'2009

Влияние цитокинов на иммуногенные свойства вакцины против клещевого энцефалита

Ж.И. Авдеева, С.Е. Акользина, Н.А. Алпатова, Т.Н. Никитина, М.Н. Ращепкина, Н.В. Медуницын

В экспериментах на мышах установлено стимулирующее действие ряда цитокинов на иммуногенную активность вакцины против клещевого энцефалита (ВКЭ). Наиболее выраженное действие оказывали используемые в виде монопрепаратов рчIL-1β, рчTNFα, имунофан и гибридный белок неотим (Тα-TNF-Тα), которые усиливали иммуногенность вакцины в 1,3-1,5 раза. Повышение иммуногенности вакцины отмечено также при использовании комплекса цитокинов (рчIL-1β, рчIL-2, рчTNFα). Исследуемые препараты цитокинов повышали протективный эффект ВКЭ, оцениваемый по уровню резистентности мышей линии Balb/c к заражению вирулентным штаммом "Абсеттаров" вируса клещевого энцефалита по сравнению с животными, иммунизированными одной вакциной. (Цитокины и воспаление. 2009. Т. 8, № 2. С. .)

Ключевые слова: цитокины, клещевой энцефалит, вакцинация, иммунологические адъюванты.

В настоящее время существует большое количество иммуномодуляторов микробного, растительного, синтетического и минерального происхождения, различающихся по происхождению и механизму адъювантного действия. При этом известно, что действие многих адъювантов опосредовано через индукцию синтеза различных цитокинов, способных оказывать влияние на формирование специфического и неспецифического иммунного ответа. Так, адъюванты микробного происхождения (мурамилдипептид, липид А) индуцируют выработку интерлейкина-1 (IL-1), иммуномодулятор синтетического происхождения (Авридин) - синтез IL-1 и интерферона-гамма (IFNγ). Все это указывает на возможность естественной замены ряда адъювантов препаратами цитокинов [4, 5, 16]. Имеются сообщения по использованию цитокинов, таких как IL-1, IL-2, IFNγ, гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), фактор некроза опухоли альфа (рчTNF ) при вакцинации против гепатита В, бешенства, малярии, герпеса [1-3, 6-14, 17, 18]. Предприняты также попытки стимуляции специфического иммунного ответа при клещевом энцефалите (КЭ) с помощью индуктора синтеза интерферона RFf2, что сопровождалось значительным увеличением общей резистентности животных при последующем их заражении.

Цель настоящей работы заключалась в изучении возможности использования ряда рекомбинантных цитокинов человека: рчIL-1β, рчIL-2, рчTNFα, рчIFNγ, рчIFNα, а также таких препаратов, как рекомбинантный тимозин 1, гибридный белок неотим и имунофан в качестве адъювантов при иммунизации экспериментальных животных вакциной против КЭ.

Материалы и методы

В экспериментах по изучению адъювантных свойств цитокинов использовано 1320 мышей линии Balb/c массой 14-16 г, полученных из Центрального питомника лабораторных животных РАМН "Биомодель".

В работе использованы следующие препараты рекомбинантных цитокинов человека (рч): беталейкин (рчIL-1β; ФГУП ГосНИИ ОЧБ, Санкт-Петербург); ронколейкин (рчIL-2; ООО "Биотех", Санкт-Петербург); альнорин (рчTNFα), гаммаферон (рчIFNγ) и реаферон (рчIFNα) (НИКТИ БАВ ГНЦ вирусологии и биотехнологии "Вектор", Бердск).

Использовали также препараты: тимозин α1 человека рекомбинантный (рчТα) и гибридный белок неотим, состоящий из рчTNFα и рчТα (Тα-TNF-Тα; НИИ прикладной микробиологии, Оболенск); имунофан, представляющий собой гексапептид, полученный путем модификации химической структуры активного центра гормона тимопоэтина-II (НПП "БИОНОКС", Москва). Все указанные препараты условно объединены термином цитокины.

В работе использована инактивированная культуральная вакцина клещевого энцефалита (ВКЭ) производства ИПВЭ РАМН им. М.П. Чумакова (Москва).

Исследования проведены с использованием стандартной модели на мышах линии Balb/c. Схема введения вакцины соответствовала схеме, применяемой для контроля качества вакцины по показателю иммуногенной активности.

Влияние цитокинов на иммуногенность ВКЭ оценивали в тесте определения минимальной иммунизирующей дозы вакцины (МИД50), защищающей 50% животных при заражении вирусом КЭ в дозе 2,0-3,0 lg LD50.

Опытным группам животных ВКЭ вводили в разведениях 1:10, 1:32, 1:100, 1:320 одновременно с цитокинами (трехкратно с интервалом в одни сутки). Каждая группа, соответствующая одному из разведений вакцины, включала 10-15 мышей. Цитокины применяли либо в виде монопрепаратов либо в виде комплекса отдельных цитокинов в следующих дозах из расчета на 1 мышь: рчIL-1β - 10 нг, рчIL-2 - 100 МЕ, рчTNFα - 1-10 Ед, рчIFNγ - 2000 Ед, рчIFNα - 10000 Ед, Тα - 1 мкг, неотим - 1 мкг, имунофан - 0,05 мкг. Цитокины вводили мышам подкожно в объеме 0,5 мл.

Контрольным группам животных вводили ВКЭ в указанных разведениях трехкратно без цитокинов.

На девятый день после окончания иммунизации животным вводили внутрибрюшинно заражающую дозу вируса КЭ (тест-штамм "Абсеттаров") в объеме 0,25 мл. Титр вируса был в пределах 8,5-9,2 lg LD50.

Эффективность вакцинации при иммунизации экспериментальных животных ВКЭ, используемой как в сочетании с препаратами цитокинов, так и без цитокинов, оценивали по следующим показателям:

  • процент выживших животных в группах, соответствующих разведениям вакцины;
  • величина предельного разведения вакцины, обеспечивающая 50%-ную выживаемость животных при заражении вирусом КЭ (ПР50), рассчитанная по методу Reed - Muench [15];
  • величина минимальной иммунизирующей дозы ВКЭ, защищающая 50% животных (МИД50) при заражении вирусом КЭ.

Статистическую обработку данных проводили на ПК с использованием стандартного пакета статистических программ. Достоверность уровня различия сравниваемых величин оценивали с помощью t-критерия Стьюдента.

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!


Начата подписка на 2018 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление