Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2009, № 2

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 2'2009

Уровни цитокинов у больных Q-позитивным инфарктом миокарда в сыворотке крови и культурах мононуклеаров крови

П.П. Оранский, Р.А. Ханферян

В последнее время все большее внимание исследователей привлекает проблема гистаминовой и цитокиновой активации при Q-позитивном инфаркте миокарда (Q-ИМ) и возможности ее коррекции. Целью исследования явилось изучение сывороточного уровня IL-6, IL-10, IL-18, IFN , а также спонтанной и стимулированной продукции IL-10 в культурах мононуклеаров крови (КМК) в присутствии H3/H4-антагониста имопроксифана (ИПФ) и без него у 16 больных Q-ИМ. Показано более, чем двухкратное повышение концентрации IL-6, начиная с 1 суток Q-ИМ в сравнении с контрольной группой. Концентрация IL-10 в подостром периоде Q-ИМ была ниже, чем в контрольной группе. Уровень IL-18 был увеличен как в остром, так и в подостром периоде Q-ИМ по сравнению с контрольной группой. При добавлении ИПФ в культуры клеток зарегистрировано увеличение продукции IL-10 в супернатантах КМК. Таким образом, при Q-ИМ отмечается выраженная провоспалительная активация, оцененная по уровню IL-6, менее выраженный ответ IL-18, IFN , и, напротив, угнетение выработки IL-10. Применение ИПФ способствует уменьшению цитокинового дисбаланса с увеличением концентрации IL-10 в КМК. Полученные данные могут быть использованы при поиске новых путей воздействия на цитокиновое звено патогенеза ИМ. (Цитокины и воспаление. 2009. Т. 8, № 2. С. .)

Ключевые слова: интерлейкин-10, инфаркт миокарда, имопроксифан, Н3, Н4-рецепторы.

Все больший интерес исследователей привлекает роль иммунных факторов, в частности, гистаминовой и цитокиновой активации в развитии атеросклеротического процесса и наиболее грозного его проявления - инфаркта миокарда (ИМ) [1]. Установлено, что непосредственно в зоне инфаркта значительно увеличивается гистаминовая продукция тучными клетками, а также лимфоцитами и моноцитами [5], однако, практически отсутствуют работы о возможности и необходимости модуляции гистамина при ИМ с помощью лекарственных препаратов как in vitro, так и in vivo. Эффектам цитокинов в патогенезе ИМ также придается все возрастающее значение. В большинстве работ имеются указания на изменение продукции преимущественно провоспалительных цитокинов у больных с различными формами ишемической болезни сердца (ИБС) [3, 4], в то время как противовоспалительная цитокиновая сеть in vivo и in vitro при этой патологии изучена явно недостаточно.

Особая роль при атеросклерозе и ИМ принадлежит IL-10, поскольку установлена его способность тормозить повреждение и тромбоз атеросклеротической бляшки за счет подавления активации макрофагов, а также ингибирования продукции провоспалительных цитокинов, экспрессии тканевого фактора [8]. В связи с этим, весьма актуален экспериментальный поиск средств, способных стимулировать эндогенную продукцию этого цитокина. Необходимо отметить, что именно экспериментальные работы по модуляции цитокиновой активности при ИМ in vitro, в т.ч. опосредованной через гистаминергические структуры, могут в перспективе способствовать разработке новых методов лечения такой социально значимой патологии, какой является ИБС.

Появление новой группы препаратов Н3/Н4-гистаминовых блокаторов может стать довольно перспективным направлением в лечении больных с ИМ. Установлено, что экспериментальная активация Н3-рецепторов в артериальных сосудах индуцирует отрицательный ино- и хронотропный эффекты [6], в то же время, спонтанная и стимулированная цитокиновая продукция в клеточных культурах мононуклеаров крови у больных ИМ на фоне применения Н3/Н4-антагонистов изучена явно недостаточно.

Цель исследования - изучение сывороточного уровня IL-6, IL-10, IL-18, IFN , а также спонтанной и стимулированной продукции IL-10 в клеточных культурах мононуклеаров крови в исходном состоянии и после экспериментального применения H3/H4-антагониста имопроксифана (ИПФ).

Материалы и методы

Исследование проведено у 16 пациентов с Q-позитивным ИМ (13 мужчин, 3 женщины) в возрасте от 46 до 72 лет (средний возраст 57,43+6,5 года). Контрольную группу составили 10 относительно здоровых лиц, рандомизированных по полу и возрасту. Диагноз острого Q-позитивного ИМ устанавливали по общепринятым критериям (клиническая картина, данные ЭКГ, положительный тест на тропонин I, уровень кардиоспецифических ферментов). В качестве контроля для значений культуральной продукции IL-10 принимали показатели в отсутствие Н3/Н4-гистаминового блокатора.

Кровь для исследования получали из кубитальной вены в первые сутки после ИМ (в остром периоде) и на 20-е сутки (подострый период). Концентрации цитокинов в сыворотке крови и в культурах определяли иммуноферментным методом (иммуноферментный анализатор Anthos 2010) согласно протоколам компаний-производителей: ЗАО "Вектор-Бест" (г. Новосибирск, Россия) - для IL-6, IL-10, IFN , Bender MedSystems (Австрия) - для IL-18.

Мононуклеарные клетки выделяли из периферической гепаринизированной крови путем центрифугирования в одноступенчатом градиенте плотности Ficoll-Paque фирмы Pharmacia (Швеция) (плотность 1,077 г/см3). Жизнеспособность лимфоцитов определяли по включению погибшими клетками 0,1% раствора трипанового синего ("Serva", Germany). При выделении лимфоцитов количество погибших клеток составляло 3-5%. Дважды отмытые в среде 199 лейкоциты ресуспендировали в среде RPMI 1640, содержащей 2 мМ L-глютамина, 10 мМ буфера HEPES, ("Serva", Germany) с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки и гентамицина в концентрации 40 мкг/мл. Культивирование клеток проводили в 96-луночных круглодонных планшетах при концентрации клеточной взвеси 1 106 мононуклеаров в 1 мл среды. В каждую лунку помещали 200 тысяч клеток в объеме 150 мкл. Инкубацию проводили в СО2-инкубаторе, в атмосфере, содержащей 5% СО2 при 96% влажности при температуре 37,4?С в течение 9 суток.

После периода инкубации иммуноферментным методом изучали спонтанную и стимулированную конканавалином А, трансформирующим фактором роста ?1 (TGF ), эндотелином 1 секрецию IL-10 в супернатантах культур, инкубированных без ИПФ (контроль) и с добавлением различных его концентраций, от 10-5 до 10-8 М.

Результаты обработаны с использованием пакета статистических программ Statistica 6.0. Данные представлены в виде медианы (и 25; 75 процентилей). Различия между группами оценены с помощью критериев Манна - Уитни и Вилкоксона, значимыми различия считали при значении р<0,05.

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление