Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2009, № 4

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 4'2009

Особенности строения и биологические свойства липополисахаридов азоспирилл в отношении активации факторов неспецифической резистентности макроорганизма

А.А. Фомина, А.В. Петров, С.А. Коннова, А.С. Бойко, Ю.П. Федоненко, Е.И. Тихомирова, А.С. Симбирцев

Цель работы - выявление различий в структуре и оценка действия ЛПС азоспирилл на активность факторов неспецифической резистентности макроорганизма. Использованы стандартные методики для определения острой токсичности препаратов, продукции NO мышиными спленоцитами, активности процесса фагоцитоза, индукции провоспалительных цитокинов и активных форм кислорода клетками цельной крови, уровня ЛПС-индуцированной пролиферации. Высокую способность активировать факторы естественной резистентности в большинстве тестов показали ЛПСKBC1, ЛПСSp245, ЛПСSр59b, однако ЛПСKBC1 обладал повышенной токсичностью по сравнению с другими препаратами. Заключение: ЛПСSp245 и ЛПСSр59b наиболее перспективны для дальнейшего изучения их биологического воздействия на организм человека и животных. (Цитокины и воспаление. 2009. Т. 8, № 4. С.     .)

Ключевые слова: липополисахариды азоспирилл, неспецифическая резистентность.

В настоящее время большое внимание уделяется поиску новых природных иммуномодулирующих веществ, среди которых перспективны липополисахариды (ЛПС) грамотрицательных бактерий в силу большого разнообразия их строения и свойств. В медицинской практике уже применяются такие препараты как пирогенал, продигиозан, сальмозан, значительно повышающие устойчивость макроорганизма к бактериальным и вирусным инфекциям и обладающие противоопухолевым действием [8].

Азоспириллы - диазотрофные ризобактерии из группы микроорганизмов, стимулирующих развитие растений, широко распространены в природе и в последние годы активно используются как компоненты бактериальных удобрений [14]. ЛПС азоспирилл попадают в окружающую среду, человек и животные постоянно контактируют с ними. В последние годы нами получены данные о структуре О-специфических полисахаридов из ЛПС ряда штаммов азоспирилл и их роли во взаимодействии с растениями [9, 10, 11]. В то же время характер и последствия воздействия данных биополимеров на организм человека и животных изучен крайне слабо. В связи с этим цель данной работы - исследование особенностей строения и оценка действия ЛПС азоспирилл in vitro на активность факторов неспецифической резистентности макроорганизма.

Материалы и методы

В работе были исследованы ЛПС Azospirillum irakense KBC1, A. lipoferum Sp59b, A. brasilense Sp245, Sp245.5, в качестве препаратов сравнения - коммерческие ЛПС Escherichia сoli О55:B5, продигиозан (ЛПС Bас. рrodigiosum) и пирогенал (ЛПС Pseudomonas aeruginosa). ЛПС азоспирилл извлекали из высушенных ацетоном бактериальных клеток горячим 45 %-ным раствором фенола. Определение биополимерного и жирнокислотного состава ЛПС выполняли, как описано в работе [13].

В экспериментах использовали 94 беспородных белых мыши массой 18-21 г. Их содержание и эвтаназия соответствовали требованиям Европейской конвенции по защите экспериментальных животных 86/609 ЕЕС.

Токсичность ЛПС исследовали постановкой биопробы на Colpoda steinii [5]. Оценку проводили качественно, учитывая наличие погибших инфузорий, а также характер, скорость движения и степень повреждения оболочек клеток. Острую токсичность препаратов определяли при однократном внутрибрюшинном введении ЛПС на белых мышах, предварительно сенсибилизированных 3,2 % D-галактозамингидрохлоридом. Наблюдение за животными проводили на протяжении 48 часов [7].

Спленоциты выделяли из селезенок мышей стандартной методикой [4] и использовали для определения уровня ЛПС-индуцированной пролиферации и продукции NO. Пролиферацию спленоцитов оценивали по включению 3Н-тимидина в ДНК клеток, которое анализировали на β-счетчике и выражали в импульсах за минуту (имп/мин) [4]. Интенсивность продукции NO спленоцитами определяли методом Грисса по накоплению в инкубационной среде ионов NO2¯ [12].

Перитонеальные макрофаги (ПМФ) получали из организма мышей-самцов по общепринятой методике и моделировали процесс фагоцитоза in vitro опсонизированных дрожжевых клеток [5]. Об активности процесса фагоцитоза в ПМФ судили через 1 и 24 ч. Учет результатов осуществляли микроскопически и рассчитывали фагоцитарные индексы (ФИ) и индексы завершенности фагоцитоза (ИЗФ).

Образование активных форм кислорода (АФК) в клетках цельной крови доноров добровольцев исследовали методом люминол-зависимой хемилюминесценции (ХЛ) на люминометре Wallac 1420 (Финляндия) и выражали в мВ [6]. В качестве препарата сравнения в данном тесте использовали классический стимулятор «респираторного взрыва» зимозан А (полисахарид Saccharomyces cerevisiае) в концентрации 1 мкг/мл.

Содержание цитокинов (IL-1β, IL-8 и TNFa) определяли в цельной и разведенной в 10 раз гепаринизированной крови иммуноферментным методом с тест-системами на основе моноклональных антител производства ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург).

Полученные данные подвергали статистической обработке общепринятыми методами.

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление