Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2010, № 1

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 1'2010

Морфометрическое исследование Th1- и Th2-клеток в сосудистой стенке при атерогенезе у человека

П.В. Пигаревский, С.В. Мальцева, А.Н. Восканьянц, В.Г. Селиверстова, В.А. Снегова

Целью работы было иммуноморфологическое и морфометрическое исследования клеток иммунного воспаления в стенке аорты в динамике атеросклероза у человека. Установлено, что в атеросклеротических поражениях, начиная с самых ранних стадий, накапливаются Th1-лимфоциты и звездчатые клетки, экспрессирующие INFg, и развивается проатерогенный Th1-иммунный ответ при одновременном падении численности Th2-клеток, синтезирующих противовоспалительный IL-4. По мере прогрессирования атеросклероза, особенно в начальных стадиях, в интиме аорты резко увеличивается содержание макрофагов, большая часть которых превращается в пенистые клетки, а меньшая, так же, как и дендритные клетки, участвует в презентации антигенов. Обнаруженные изменения, по всей видимости, являются ответом на откладывающиеся в сосудистой стенке человека различные модификации липопротеинов низкой плотности. Баланс между про- и анти-воспалительными клетками в очагах иммунного воспаления оказывает важное влияние на развитие атеросклероза, его активацию и прогрессирование. (Цитокины и воспаление. 2010. Т. 9, № 1. С. 13-16.)

Ключевые слова: атеросклероз, аорта, интерферон гамма, интерлейкин 4.

В настоящее время известно, что модифицированные липопротеины низкой плотности (мЛПНП) играют ключевую роль в атерогенезе, способствуя образованию пенистых клеток и вызывая развитие иммунного воспаления в стенке артерий. Эпитопы, распознаваемые антителами к ацетилированным, малеилированным и модифицированным малоновым диальдегидом (МДА) липопротеинам низкой плотности, выявлены на всех стадиях атерогенеза в сосудистой стенке человека [5]. Установлено, что в ответ на образующиеся мЛПНП в интиме артерий накапливаются макрофаги и Т-лимфоциты. Это делает возможной презентацию антигена непосредственно в очагах поражений и способствует развитию иммуновоспалительных реакций [2, 12].

Т-лимфоциты, инфильтрирующие атеросклеротические поражения, представлены, в основном, CD4+-клетками, которые, как считается, способны ухудшать течение атеросклероза [4, 13]. Однако, согласно самым последним данным, Т-хелперные лимфоциты не являются однородной популяцией и разделяются на две субпопуляции: Th1- и Th2-клетки. Предполагается, что они выполняют противоположные функции в стенке артерий и, прежде всего, в отношении мЛПНП [3]. Суммируя основные свойства этих клеток, следует отметить, что Th1 Т-лимфоциты секретируют IFNg, TNFa, IL-2 и включаются в активацию макрофагов с последующим провоспалительным эффектом. Th2 Т-лимфоциты синтезируют IL-4, IL-5, IL-10 и стимулируют продукцию В-лимфоцитами антител. Показано, что у мышей с толерантностью к атеросклерозу преобладают Th2-клетки и развивается Th2-иммунный ответ с продукцией IgG1 [16]. Нарушение баланса Th1/Th2 в пользу Th1-клеток приводит к развитию клеточных аутоиммунных процессов [6]. Можно предположить, что при развитии атеросклероза избыточное поступление в интиму артерий ЛПНП и их модификаций не позволяет формироваться Th2-ответу, блокируя экспрессию противовоспалительных цитокинов. В любом случае, Th1- и Th2-лимфоциты в сосудистой стенке - ключ к возможному в дальнейшем управлению иммунным ответом при атерогенезе.

Целью настоящей работы явилось количественное исследование Т-лимфоцитов и их главных иммунорегуляторных субпопуляций: Th1- и Th2-клеток, а также В-лимфоцитов и макрофагов в стенке аорты в динамике атеросклероза у человека. Подобные результаты в отечественной и зарубежной литературе отсутствуют.

Материалы и методы

Объектом исследования был материал 8 аутопсий, полученных от мужчин (средний возраст 60±8 лет), умерших от острой сердечно-сосудистой недостаточности атеросклеротической этиологии. На основании результатов патологоанатомического вскрытия из исследования был исключен материал, взятый от людей, у которых были заболевания, способные оказать воздействие на иммунологическую реактивность.

Исследованию были подвергнуты: неизмененные участки аорты без атеросклеротических поражений - 8 образцов ткани из района дуги и грудного отдела аорты; участки с начальными поражениями в виде липидных пятен - 20 образцов ткани; участки с выраженными поражениями в виде липидно-фиброзных и фиброзных бляшек - 23 и 15 образцов ткани, соответственно.

Иссеченные кусочки фиксировали в 4%-ном забуференном параформальдегиде. Иммуноморфологическое и микроскопическое исследование проводили на парафиновых и криостатных срезах толщиной 4-6 мкм. Для верификации типов атеросклеротических поражений криостатные срезы окрашивали красителем oil red O. Выявление очагов клеточной инфильтрации в сосудистой стенке осуществляли с помощью окраски гематоксилином - эозином.

В иммуноморфологическом исследовании INFg(Th1)- и IL-4(Th2)-позитивные клетки, а также CD3-, CD20-лимфоциты и CD68-клетки (макрофаги) определяли с помощью соответствующих моноклональных антител (Dako) в сочетании с высокочувствительным двухступенчатым стрептавидин - биотиновым методом (LSAB 2/HRP-набор, Dako).

Морфометрическое исследование (подсчет иммуногистохимически положительных клеток в интиме аорты) проводили с помощью морфометрической сетки, вмонтированной в окуляр ×10 при объективе ×100. Морфометрическая сетка имеет 225 пересечений, или узловых точек. В поле зрения микроскопа учитывали только те клетки, которые попадали на узловые точки сетки. В каждом сосуде в пределах интимы исследовали 10 полей зрения, в которых определяли абсолютное количество клеток.

Значимость различий между изучаемыми выборками выявляли с помощью t-критерия Стьюдента.

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление