Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2010, № 1

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 1'2010

Исследование протективного действия препарата ферровир при остром экспериментальном аллергическом энцефаломиелите

Н.Б. Серебряная, М.Н. Карпенко, Ю.Л. Житнухин, Г.Н. Бисага, И.А. Абдурасулова

Цель исследования - определить способность противовирусного препарата ферровир (нуклеинат натрия и Fe3+) предотвращать развитие и/или снижать тяжесть экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита, в патогенез которого не вовлечена активная вирусная инфекция. ЭАЭ индуцировали у самок крыс Вистар однократной подкожной инокуляцией энцефалитогенной смеси в полном адъюванте Фрейнда. Животным контрольной группы через день проводили инъекции физиологического раствора. Ферровир использовался в двух схемах введения: схема 1 - профилактическая (со 2 дня после индукции ЭАЭ), и схема 2 – лечебная (после развития клинических признаков заболевания). В группе сравнения животные после индукции ЭАЭ получали копаксон в дозе 4 мг/кг. Препараты ферровир и копаксон показали сходную эффективность. При применении ферровира по схеме 1 показатели длительности и тяжести заболевания были сопоставимы с соответствующими показателями в группе животных, получавших копаксон. При использовании ферровира по 2 схеме отмечена максимальная частота легких форм заболевания и такая же (минимальная) летальность, как в группе, получавшей копаксон. В статье обсуждается возможный механизм противовоспалительного действия дезоксинуклеотидов и ионов трехвалентного железа при ЭАЭ. (Цитокины и воспаление. 2010. Т. 9, № 1. С. 33-38.)

Ключевые слова: экспериментальный аллергический энцефаломиелит, ферровир, нуклеинат натрия, ионы трехвалентного железа.

Рассеянный склероз (РС) – аутоиммунное демиелинизирующее заболевание, для которого характерно непрерывно прогрессирующее или волнообразное течение c чередованием периодов обострений и ремиссий. Общепризнанной моделью РС является экспериментальный аллергический энцефаломиелит (ЭАЭ) у лабораторных животных, несмотря на то, что у большинства линий крыс и мышей ЭАЭ – острый монофазный процесс, завершающийся выздоровлением, а не рецидивирующее заболевание. Среди этиологических факторов РС немаловажную роль играют генетическая предрасположенность, а также вирусные (герпесвирусы и эндогенные ретровирусы человека) [10, 15] и бактериальные инфекции, которые провоцируют или модулируют аутоиммунный процесс при РС [8].

Аутоиммунный характер РС обусловил активное изучение роли клеточного и гуморального звеньев иммунитета, а также цитокинов – медиаторов воспаления – в разрушении миелиновой оболочки. Цитокиновые препараты, в частности рекомбинантые интерфероны I типа, уже более 10 лет используются в клинической практике [6]. Другим подходом к лечению заболевания является индукция иммунологической толерантности к антигенам миелина с помощью глатирамера ацетата (препарат копаксон), представляющего собой смесь синтетических полипептидов (состоящих из аминокислот L-глутамина, L-аланина, L-тирозина, L-лизина), входящих в состав основного белка миелина. Действие глатирамера ацетата направлено на подавление миелинспецифических аутоиммунных реакций, что обусловлено его способностью блокировать MHC-рестриктированное связывание T-клеточного рецептора и индуцировать образование регуляторных T-клеток CD4+CD25+ [17].

Рекомбинантные -интерфероны и глатирамера ацетат используются как препараты первой линии патогенетической терапии, однако их широкое применение ограничено необходимостью длительных курсов лечения (годы), высокой стоимостью (до 12000 долларов в год) и не всегда удовлетворительным клиническим результатом [2]. Поэтому стратегией повышения эффективности лечения больных РС считают комбинированную терапию, учитывающую этиологические факторы и направленную на различные патогенетические звенья заболевания. Поскольку у ряда больных РС имеются признаки активной вирусной инфекции в ЦНС, целесообразно использовать препараты, обладающие противовирусной активностью, например, ферровир – 1,5 %-ный раствор дезоксирибонуклеата Nа с железом (Fe3+) [3]. В пилотных клинических исследованиях показана способность ферровира снижать количество активированных Т-лимфоцитов (CD3+DR+), активированных тромбоцитов (CD61+CD62+) и NKT-клеток (CD3+CD56+CD16+) у больных РС на фоне существенного уменьшения выраженности таких симптомов, как головная боль, головокружение, мышечная слабость, нарушение моторики и памяти [5].

Точный механизм действия ферровира (как и многих других природных соединений) не определен. Показано, что молекулы ДНК в составе ферровира способны проникать в клетки путем пиноцитоза и метаболизироваться до нуклеотидов, среди которых наиболее важными являются АТФ и АДФ [4]. Выходя активно из клеток во внеклеточную среду, нуклеотиды связываются с пуриновыми рецепторами (P2X1-7 и P2Y1-14), которые представлены на клетках иммунной и нервной систем [11]. Следовательно, помимо противовирусной активности данный препарат может модулировать иммунный ответ, регулировать энергетический обмен, стимулировать процесс ремиелинизации.

Целью настоящего исследования являлось выявление способности ферровира предотвращать развитие и/или снижать тяжесть заболевания, в патогенез которого не вовлечена активная вирусная инфекция. Для этого проведен сравнительный анализ протективного действия препаратов копаксон и ферровир на модели острого экспериментального аллергического энцефаломиелита у крыс.

Методика исследования

ЭАЭ индуцировали у самок крыс Вистар в возрасте 3-х месяцев (вес – 170-190 г) однократной подкожной инокуляцией энцефалитогенной смеси (ЭГС) в полном адъюванте Фрейнда из расчёта 100 мг гомогената гомологичного спинного мозга; 0,2 мл ПАФ (содержание убитых микобактерий – 5 мг/мл) и 0,2 мл физиологического раствора на одно животное. ЭГС вводили в основание хвоста под легким эфирным наркозом в объеме 0,4 мл [1]. Иммунизированные животные были разделены на 4 группы по 15 крыс в каждой.

Животным 1-й группы (контрольные) через день проводили инъекции физиологического раствора. Ферровир использовали в дозе 100 мг/кг в двух схемах введения, которые позволяли исследовать возможность профилактического действия препарата и его эффективность в лечении развившегося заболевания. Для определения возможного профилактического действия ферровир вводили со 2 по 32 день после индукции (д.п.и.) ЭАЭ через день (группа 2); а для определения лечебной эффективности – после развития клинических признаков заболевания по следующей схеме: с 8 по 14 д.п.и. ежедневно, с 16 по 32 д.п.и. через день (группа 3), т.е. в каждой группе животные получили по 16 инъекций ферровира. В группе сравнения (группа 4) животные со 2 по 28 д.п.и. ежедневно получали копаксон в дозе 4 мг/кг (схема, используемая в клинике для лечения РС). Все препараты вводили внутримышечно в объеме 0,2 мл, попеременно в правую и левую заднюю лапу.

Ежедневно в течение 32 дней (средняя продолжительность ЭАЭ) животных взвешивали и оценивали их неврологический статус. Регистрировали время начала заболевания, его продолжительность и тяжесть неврологических нарушений, которую оценивали в баллах по клиническому индексу. Клинический индекс (КИ) определяли по выраженности и распространенности неврологических проявлений: мышечная слабость одной конечности – 0,5 балла, парез – 1 балл, паралич – 1,5 балла. При поражении нескольких конечностей баллы суммировали. Отсутствие видимых нарушений принимали за 0 баллов, летальный исход – 6 баллов. Животных с КИ=0,5–3,5 балла считали легко болеющими; с КИ=4–6 – тяжело болеющими.

Для оценки эффективности протективного действия исследуемых веществ на модели ЭАЭ для каждой группы животных рассчитывали следующие показатели: 1) продолжительность латентного периода; 2) общее число заболевших и тяжело больных крыс в % от числа крыс в группе; 3) средний клинический индекс на пике заболевания; 4) средний кумулятивный индекс болезни; 5) среднюю длительность заболевания. Все показатели сравнивали с соответствующими показателями животных контрольной группы и группы сравнения.

При оценке полученных результатов использовали параметрический t-критерий Стьюдента для независимых выборок; для анализа различий в трех группах использовали однофакторный дисперсионный анализ с последующим применением t-критерия Стьюдента с поправкой Бонферрони для множественных сравнений; для оценки достоверности различия долей больных и тяжело больных крыс по сравнению с контролем использовали точный критерий Фишера.

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление