Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2010, № 1

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Врачу общей практики

Номер 1'2010

Особенности продукции фактора некроза опухоли α при туберкулезе легких и внелегочных локализаций

Т.Ю. Салина, Т.И. Морозова

Изучали продукцию TNFa в спинномозговой (СМЖ) и плевральной (ПЖ) жидкостях, сыворотке крови, супернатантах культур мононуклеаров периферической крови у 94 больных туберкулезом и нетуберкулезными заболеваниями и 17 здоровых лиц. Цель - поиск новых критериев диагностики и оценки характера течения туберкулезного процесса, на основе изучения продукции TNFa. В СМЖ больных туберкулезным менингитом отмечается высокое содержание TNFa по сравнению с пациентами с менингитами другой этиологии. Однако в ПЖ больных с туберкулезным плевритом содержание TNFa было низким по сравнению с плевритами онкологической природы. В сыворотке крови больных туберкулезом TNFa имел большой размах индивидуальных колебаний. Выявлена его корреляционная связь с некоторыми клиническими проявлениями туберкулеза (лихорадка, проба Манту с 2 ТЕ, уровень антител к M. tuberculosis и др.). Установлена высокая спонтанная продукция TNFa мононуклеарами крови больных с тяжелым туберкулезом и угнетение индуцированной M. bovis (BCG) продукции TNFa у больных туберкулезом по сравнению со здоровыми. Изучение продукции TNFa в разных биологических субстратах может быть полезно для понимания патогенеза туберкулеза и дифференциальной диагностики туберкулеза с другой легочной патологией. (Цитокины и воспаление. 2010. Т. 9, № 1. С. 45-48.)

Ключевые слова: туберкулез, фактор некроза опухолей альфа, диагностика.

Фактор некроза опухоли-альфа (TNFa) - ключевой медиатор и цитокин иммунного ответа. Основными продуцентами TNFa являются активированные макрофаги. Активация макрофагов лимфоцитами может способствовать ограничению инфекции. Однако постоянная стимуляция, обусловленная персистенцией возбудителя, служит хроническим антигенным стимулом и может приводить к повреждению тканей в результате выделения макрофагами ряда продуктов: монокинов (TNFa, IL-1β, IL-6, IL-18 и других), активных метаболитов кислорода и ферментов гидролаз [1]. Бактерицидный механизм активированных макрофагов основан на образовании токсичных для бактерий высокоактивных метаболитов оксида азота (NO) [5]. Разрегулирование в системе цитокинов и их рецепторов может стать причиной анемии, лихорадки, тканевых повреждений, гиперкальциемии и лейкоцитоза у пациентов с туберкулезом и другими хроническими воспалительными заболеваниями [2]. Освобождающиеся из активированных макрофагов IL-1 и TNFa являются сильными пирогенами и индуцируют ответ острой фазы воспаления. В экспериментах на мышах было показано, что после подкожного введения 1 мкг растворимого микобактериального антигена, а затем 1 мкг рекомбинантного TNFa, у таких мышей развивался геморрагический некроз [3]. Однако экспериментальными исследованиями было доказано, что полная блокада продукции TNFa у трансгенных мышей приводила к 100%-ной гибели животных после аэрозольного заражения их M. tuberculosis [4]. Поэтому представляется актуальным изучение особенностей продукции TNFa в разных биологических субстратах, отражающих локальный и системный характер воспаления.

Цель работы - поиск новых критериев диагностики и оценки характера течения туберкулезного процесса на основе изучения продукции TNFa.

Материалы и методы

Комплексно обследовано 94 больных. Из них - 54 мужчины, 40 женщин в возрасте от 21 до 65 лет. Больных активным туберкулезом легких и плевры было 55, туберкулезным менингитом - 12, нетуберкулезными заболеваниями - 27. У всех больных было проведено обязательное клиническое обследование, включающее сбор анамнеза, оценку физикальных данных, исследование общего анализа крови и мочи, мокроты на микобактерии туберкулеза, рентгенотомографию органов грудной клетки, у пациентов с менингитом - исследование спинномозговой жидкости, у больных с плевритом - исследование плевральной жидкости. У некоторых пациентов по клиническим показаниям применяли фибробронхоскопию, эхоэнцефалографию, компьютерную томографию головного мозга, хирургические методы диагностики (медиастиноскопию, торакотомию, плевроскопию с биопсией и последующим гистологическим и цитологическим исследованием материала). У всех больных определяли продукцию TNFa твердофазным иммуноферментным методом с использованием двух моноклональных антител к TNFa (тест-система Белорусского НИИ гематологии и переливания крови). Учет реакции проводили количественно с помощью многоканального сканирующего иммуноферментного анализатора марки «Линкей» при длине волны 492 нм и выражали в единицах оптической плотности. Концентрацию TNFa в изучаемых образцах определяли путем построения калибровочной кривой по результатам титрования рекомбинантного TNFa в качестве стандарта и выражали в пг/мл. Чувствительность тест-системы - 60 пг/мл. Исследовали содержание TNFa в разных биологических субстратах (спинномозговая и плевральная жидкости, сыворотка крови, супернатанты культур периферических мононуклеарных клеток). Супернатанты культур мононуклеарных клеток получали путем краткосрочного (24 ч) культивирования мононуклеаров, выделенных из периферической венозной крови на градиенте плотности фиколла - урографина (ρ=1,077 г/см3, при 200 g). Культивирование клеток осуществляли в среде RPMI 1640 (Flow Laboratories), содержащей 10% инактивированной нагреванием эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ глютамина и по 100 ЕД/мл пенициллина и стрептомицина при 37 ºС в атмосфере повышенной влажности и 5% СО2. Изучали спонтанную и индуцированную продукцию TNFa. В качестве специфического стимулятора использовали М. bovis (BCG), предварительно культивированные на среде Левенштейна - Иенсена, в рабочей концентрации 50 мкг/мл; в качестве неспецифического стимулятора - конканавалин А (Кон А), в рабочей концентрации 25 мкг/мл. Рассчитывали разность между величиной оптической плотности образца в ответ на стимулятор и уровнем спонтанной продукции (Δ BCG, ∆ КОН А).

Для определения продукции TNFa в супернатантах культур мононуклеарных клеток пациенты были распределены на 3 группы в зависимости от особенностей течения туберкулезного процесса. Группу 1 составили 14 больных впервые выявленным инфильтративным туберкулезом легких, у которых патологический процесс протекал с преимущественно экссудативным характером воспаления. Экссудативный тип течения инфильтративного туберкулеза определяли по следующим параметрам: острое начало, выраженный интоксикационный и бронхолегочный синдромы, массивное бактериовыделение. В группу 2 были включены 13 пациентов с инфильтративным туберкулезом легких, у которых патологический процесс протекал с преимущественно продуктивным компонентом туберкулезного воспаления. Продуктивный тип течения туберкулеза определяли по следующим признакам: бессимптомное начало заболевания, торпидное течение с нерезко выраженными симптомами интоксикации, ограниченное поражение легочной ткани, скудное бактериовыделение, склонность к отграничению процесса с формированием фокусов. Группу 3 составили 16 больных с впервые выявленными остропрогрессирующими формами туберкулеза (диссеминированный туберкулез, казеозная пневмония, генерализованные формы туберкулеза). Основными критериями отбора больных в эту группу служили: резко выраженные симптомы интоксикации и клинико-рентгенологические признаки прогрессирования специфического процесса с наличием осложнений (туберкулез гортани и бронха, кахексия, легочно-сердечная и дыхательная недостаточность, легочное кровотечение, спонтанный пневмоторакс). Группу контроля составили 17 здоровых лиц.

Статистическую обработку результатов исследования осуществляли с помощью компьютерных программ Microsoft Excel и Statistica. Использовали методики описательной статистики (среднее арифметическое (М), среднеквадратичное отклонение (δ), интервал колебаний, медиана) и специальные статистические методики (метод корреляции Спирмена). Сравнение двух независимых групп, подчиняющихся нормальному распределению, проводили с помощью t-критерия Стьюдента, а не подчиняющихся нормальному распределению - теста Вилкоксона. В качестве критического уровня достоверности был принят критерий 0,05.

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление