Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2010, № 2

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Врачу общей практики

Номер 2'2010

Значимость коррекции интерферонового статуса в комплексной иммунотерапии хронического упорно-рецидивирующего орофациального герпеса

И.В. Нестерова, Л.В. Ломтатидзе, Л.Н. Кокова

Система интерферона (IFN) является важнейшей частью противовирусного иммунитета и обеспечивает быстрый противовирусный протективный эффекты. У 108 пациентов с упорно-рецидивирующим течением хронического орофациального герпеса (HSV1) изучали состояние системы IFN и основных механизмов противовирусного иммунитета с целью дальнейшей разработки методов интерфероно- и иммунотерапии. У всех больных имели место комбинированные нарушения IFN-статуса, выраженные в первую очередь в дефектах индуцированного синтеза IFNα и IFNγ и иммунной системы. Разработана программа комбинированной интерфероно- и иммунотерапии, включающая: а) проведение базисной системной дифференцированной интерферонотерапии с применением рекомбинантного IFNα2 в комплексе с антиоксидантами - виферона, б) реставрацию Т звена иммунной системы с использованием 10-дневных курсов изопринозина, в) восстановление естественных киллерных клеток, нейтрофильных гранулоцитов и их фагоцитарной активности, гуморального звена иммунитета - базисный и поддерживающий курсы ликопида, обладающего мультипотентными свойствами. Описаны особенности лечения HSV1 в периоде обострения. Показана значимость заместительной терапии адекватными дозами виферона на первом этапе лечения и необходимость в дальнейшем снижении доз для осуществления интерферонкорригирующих и модулирующих воздействий у лиц с приобретенными вторичными дефектами в системе IFN. Первичные, генетически обусловленные нарушения в системе интерферона требуют проведения базисной пролонгированной виферонотерапии с последующим назначением постоянной заместительной терапии. Продемонстрирована выраженная клинико-иммунологическая эффективность разработанных подходов интерфероно- и иммунотерапии при хроническом упорно-рецидивирующем орофациальном герпесе (HSV1). (Цитокины и воспаление. 2010. Т. 9, № 2. С. 57-62.)

Ключевые слова: интерферонкорригирующая терапия, герпес, заместительная терапия, противовирусный иммунитет, виферон.

Интерфероны (IFN) были открыты в 1957 г. А. Айзексом и Дж. Линденманом [8] как факторы, определяющие феномен интерференции, т. е. распространение невосприимчивости, возникшей при первом контакте с вирусом, к повторному заражению другими вирусами. IFN относятся к классу индуцибельных белков позвоночных. Они представляют собой гликопротеиды с молекулярной массой 20–30 кД. Ранее по происхождению различали 3 вида IFN (α, β и γ) и 2 типа - I и II. IFNα - вирусный, или лейкоцитарный IFN, в основном, продуцируется лейкоцитами, в том числе Т-и В-лимфоцитами, макрофагами, нейтрофильными гранулоцитами (НГ), эпителиальными клетками, плазмацитоидными дендритными клетками (пДК) и т. д. IFNβ - вирусный, или фибробластный IFN, продуцируется фибробластами; IFNγ - иммунный, регуляторный IFN, в основном, продуцируется Т-лимфоцитами и естественными киллерными клетками (ЕКК). IFNα и IFNβ объединены в I тип, а IFNγ отнесен ко II типу IFN. В настоящее время известно, что I тип семейства человеческих IFN включает еще и дополнительные виды, например l, k, w, n. IFN I и II типа реализуют свои эффекты через когнитивные рецепторные комплексы: соответственно, интерфероновый a-рецептор (IFNAR) и интерфероновый g-рецептор (IFNGR), присутствующие на поверхностных мембранах различных клеток [18]. При первом контакте с вирусами происходит немедленная активация врожденного иммунитета, в частности, продукция интерферонов I типа и провоспалительных цитокинов, которые инициируют последующее более позднее включение в активную работу механизмов противовирусного адаптивного иммунитета. Сенсорами врожденной иммунной системы являются три класса рецепторов, распознающих одно- и двухцепочечную РНК и ДНК вирусов: локализованные на плазматической мембране Toll-подобные рецепторы (TLRs), цитоплазматические рецепторы RLR, подобные продукту гена-I (RIG-I), индуцируемому ретиноевой кислотой (retinoic acid-inducible gene (RIG)-I-like receptors (RLRs), и NOD-подобные рецепторы цитозоля (NLRs; от nucleotide-binding oligomerisation domain - нуклеотид-связывающий олигомеризующийся домен). NLRs играют важную роль в продукции интерлейкина 1β (IL-1β) в ответ на стимуляцию РНК вирусов. Роль RLRs и TLRs важна для запуска продукции IFN I типа и провоспалительных цитокинов в различных типах клеток. RLRs необходимы для распознавания РНК-вирусов в разных клетках, в то время как пДК используют TLRs для детекции вирусной инвазии [19]. За распознавание вирусных антигенов на поверхностной мембране клеток отвечают TLR4, в то время как TLR3, TLR7, TLR8, TLR9 распознают вирусные нуклеиновые кислоты на эндосомальной мембране пДК. После активации TLRs взаимодействуют с цитозольными адапторными молекулами и активируют внутриклеточный сигнальный каскад, транскрипционные факторы - NF-kВ и семейство IFN-регулируемых факторов, что ведет к повышению экспрессии нескольких сотен генов провоспалительных цитокинов, в первую очередь, IFNα/β-отвечающих генов, многие из которых обладают прямым или непрямым противовирусным действием. В тоже время показано, что существует и TLR-независимые пути активации синтеза и продукции IFN. Выделившиеся из инфицированных вирусами клеток, IFN I типа воздействуют на соседние незараженные клетки, активируя в них противовирусные защитные механизмы, создавая в них, таким образом, состояние, которое называют «противовирусным статусом». Вирусы, высвобождаемые из первично инфицированных клеток, неэффективно реплицируют в клетках, которые стали находиться в состоянии «противовирусного статуса» [6, 17].

Секретированные IFN I типа связываются и активируют рецепторы IFN I типа - гетеродимеры IFNAR1 и IFNAR2 - аутокринным, паракринным и эндокринным путем. Это связывание ведет к активации IFN-стимулируемого транскрипционного фактора ISGF3 [4]. Сигнал, индуцированный через IFN-рецептор, запускает активацию латентных сигнальных цитоплазматических факторов – белков семейства STAT. В активацию белков STAT-семейства (STAT1, STAT2) вовлечены члены семейства тирозинкиназы Янус (JAK). STAT действуют совместно с семейством IFN-зависимых транскрипционных факторов IFR3, IFR7, IFR9, которые транслоцируются в ядро и индуцируют транскрипцию сотен эффекторных молекул, кодируемых IFN-индуцибельными генами.

Именно эти изменения в транскрипционном профиле клеток, т. е. изменения в генной экспрессии, отвечают за биологические активности IFN, включая и индуцирование противовирусного статуса. По мнению L. Malmgaard [11], IFN являются краеугольным камнем врожденного противовирусного иммунитета и играют центральную роль в исходе вирусных инфекций. Система IFN обладает универсальным по своей сути механизмом уничтожения чужеродной ДНК и РНК. Действие ее направлено на распознавание, уничтожение и элиминацию любой генетически чужеродной информации (вирусов, бактерий, хламидий, микоплазм, патогенных грибов, опухолевых клеток и т. д.). Кроме выраженного противовирусного действия, система IFN обладает также иммуномодулирующим, противоопухолевым, антипролиферативным эффектами.

Levin S. и Hahn T. [10] продемонстрировали, что при острой вирусной инфекции значительно повышаются уровни IFN и более 70% клеток находятся в состоянии антивирусного статуса, т.е. защищены ИФН от заражения вирусами, в то время как при тяжелых вирусных инфекциях система IFN дефектна, т. е. находится в состоянии функционального дефицита. Описано, что острая вирусная инфекция может приводить к истощению системы IFN-транзиторной иммуносупресии, что может, в свою очередь, приводить к присоединению вторичной инфекции [5]. Не так давно описаны врожденные дефекты IFNAR-2 и IFNGR, которые сопровождались клиническими проявлениями снижения противовирусной резистентности [11, 21].

В то же время показано, что вирусы могут не только ускользать от воздействия IFN, но и ингибировать их действие, нарушать их продукцию посредством разнообразных механизмов [20]. Продемонстрировано, что большое количество вирусов продуцирует белки, способные ингибировать синтез и продукцию IFNα и IFNγ [7]. Герпесвирусы используют контрмеры для борьбы с системой IFN, блокируя активацию TLR3, ингибируя систему 2¢-5¢-олигоаденилатсинтетазы/РНКазы L, препятствуя активации JAK/STAT-сигнального пути, что приводит к нарушению продукции IFNα и IFNβ [12, 13, 15]. Описаны вторичные (приобретенные) дефекты в системе IFN у лиц, страдающих повторными ОРВИ и различными герпесвирусными инфекциями; при этом в ряде случаев частота рецидивов хронической герпетической (HSV1) инфекции может достигать 16-24 эпизодов в год [3, 14]. В то же время мало изученным, но чрезвычайно актуальным остается вопрос об особенностях состояния IFN статуса и других базисных механизмов противовирусного иммунитета у лиц, страдающих хронической герпетической (HSV1) инфекцией c частыми рецидивами. Не менее актуальным, с нашей точки зрения, является определение значимости роли терапевтического использования IFNα и поиск адекватных методов интерфероно- и иммунотерапии при указанной патологии.

Целью исследования явилось изучение состояния системы интерферонов и основных механизмов противовирусного иммунитета при хроническом орофациальном герпесе, характеризующемся упорно-рецидивирующим течением, с дальнейшей разработкой методов интерфероно- и иммунотерапии.

Материалы и методы

Под нашим наблюдением находилось 108 пациентов обоего пола (35 мужчин и 73 женщины), в возрасте от 20 до 55 лет, страдающих хроническим орофациальным герпесом, упорно-рецидивирующего течения. Частота рецидивов составила от 16 до 24 и более эпизодов в год. Давность заболевания колебалась от 1,5 до 10 и более лет. Ранее все пациенты получали лечение синтетическими противовирусными препаратами (зовиракс/ацикловир, валтрекс). Однако, проводимое лечение не предупреждало рецидива заболевания. Разработаны клинические критерии, характеризующие клинические особенности проявлений болезни, оценивающие тяжесть болезни, наличие и длительность продромального периода, лихорадку, длительность острого периода, болевой синдром, лимфоаденопатию, количество очагов и общую площадь кожно-слизистых поражений, быстроту выхода в ремиссию и длительность ремиссии. Наличие HSV1 в 100 % случаев подтверждено методами ПЦР и серодиагностики в периоде обострения заболевания. Оценка состояния пациентов с использованием клинических критериев проводилась трижды: до лечения, сразу же после лечения и через год после окончания курса интерфероно- и иммунотерапии.

Для оценки интерферонового статуса использовали метод С.С. Григорян и Ф.И Ершова [1] с определением, в том числе, индуцированной продукции IFNα (индуктор - вирус болезни Нью-Кастла) и IFNγ (индуктор - стафилококковый энтеротоксин) в культуре мононуклеаров. Тестирование состояния основных клеточных механизмов врожденного и адаптивного противовирусного иммунитета проводили методом проточной цитометрии, используя проточный цитометр FACScan (Becton Dickinson, USA), после пробоподготовки цельной крови. Использовали панели специфических моноклональных антител к поверхностным антигенам лимфоцитов (Immunotech, Beckman Coulter). Определяли количество CD3+, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3+CD56+, CD4+CD25+CD4+HLA-DR+, CD8+HLA-DR+, CD8+CD25+, CD3-CD16+CD56+, CD3-CD16-CD56+, CD56+HLA-DR+, CD19+. Определение концентрации сывороточных IgG, IgM, IgA проводили методом радиальной иммунодиффузии по Манчини, активность оксидазных микробицидных систем нейтрофильных гранулоцитов (НГ) методом хемилюминесценции. Исследования IFN-статуса и состояния иммунной системы проводили дважды: до и после лечения. Весь материал был подвергнут статистической обработке с использованием методов вариационной статистики с расчетом средних величин (М), ошибок средних величин (±m), средних квадратичных отклонений (±s). Достоверность различия между отдельными средними величинами определяли с помощью t-критерия Стьюдента. Наблюдаемые различия считали не случайными, когда вероятность «p» ошибочного принятия нулевой гипотезы не превышала 0,05. Вычисления проводились с использованием компьютерной программы Biostat 4.0 для Windows и DOS IBM-PC.

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление