Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2010, № 4

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 4'2010

Антибактериальные свойства синтетических пептидов активного центра GM-CSF

А.В. Зурочка, Ю.Г. Суховей, В.А. Зурочка, М.А. Добрынина, С.А. Петров, И.Г. Унгер, Е.Г. Костоломова, Е.Г. Аргунова, А.М. Субботин, А.А. Колобов, А.С. Симбирцев

Исследованы различные эндогенные и синтетические пептиды с целью выявления их антибактериальной активности. Контролем служили синтетические дефенсины LL37 и HNP. Исследования показали, что синтетические пептиды из активного центра гранулоцитарно-макрофагального колоние-стимулирующего фактора (GM-CSF) обладают такими же активностью и спектром действия, как и известные дефенсины, но при этом, в отличие от дефенсинов, они одновременно являются и иммуностимулирующими факторами. Максимальной активностью обладал пептид Thr-Nle-Nle-Ala-Ser-His-Tyr-Lys-Gln-His-Cys-Pro. Таким образом, полученный пептид может быть использован не только как иммуностимулирующее, но и как антибактериальное средство. (Цитокины и воспаление. 2010. Т. 9, № 4. С. ).

Антибиотикорезистентность является неизбежным биологическим явлением и предотвратить ее практически невозможно. При этом антибиотикорезистентность микроорганизмов представляет опасность не только для пациента, у которого последние были выявлены, но и для многих других людей, даже разделенных временем и пространством [1, 13]. На большинство выпускаемых новых антибиотиков, являющихся лишь незначительными модификациями традиционных препаратов, у бактерий невосприимчивость развивается особенно быстро. Поэтому борьба с антибиотикорезистентностью в настоящее время приобрела глобальный масштаб. Однако проблему возрастающей устойчивости бактерий к антибиотикам невозможно решить только с помощью разработки препаратов, являющихся по сути лишь модификациями традиционных [10].

В связи с увеличением числа штаммов бактерий, устойчивых к антибиотикам, постоянно появляющимися новыми патогенами, а также из-за существующей угрозы биотерроризма, назрела необходимость создания принципиально новых антибактериальных препаратов, имеющих кардинально иные механизмы действия, отличные от уже существующих. На сегодняшний день одним из наиболее перспективных направлений является разработка антибактериальных средств на основе эндогенных пептидов [2, 9, 16].

Эндогенные антимикробные пептиды являются важной составляющей системы врожденного иммунитета эукариотического организма, которая обеспечивает защиту против патогенов. Антимикробные пептиды - эффекторные молекулы, которые вызывают лизис микроорганизмов путем нарушения структуры и функций цитоплазматической мембраны [3, 7, 14]. Благодаря ярко выраженным антимикробным свойствам и небольшому размеру молекул, эти пептиды рассматриваются как потенциальные агенты для лечения инфекционных заболеваний человека [5, 6, 17, 18].

Несомненными преимуществами антимикробных пептидов перед традиционными антибиотиками, в частности, в терапии латентных инфекций, являются более широкий спектр антибактериального действия, функциональная активность при малых концентрациях, практически полное отсутствие возможности формирования резистентности возбудителей к антимикробным пептидам, возможность синтеза аналогов природных пептидов с измененными биологическими свойствами [4, 11, 15].

Материалы и методы

Нами исследована антибактериальная активность эндогенных пептидов тромбодефенсина, интерцида (пептиды предоставлены НИИ клеточного и внутриклеточного симбиоза УРО РАН) и синтетических пептидов, соответствующих по первичной последовательности активному центру гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF) и имеющих структуру Lys-Gly-Pro-Leu-Thr-Nle-Nle-Ala-Ser-His-Tyr-Lys-Gln-His-Cys-Pro (пептид 1) и Thr-Nle-Nle-Ala-Ser-His-Tyr-Lys-Gln-His-Cys-Pro (пептид 2). Синтез пептидов проводился твердофазным способом на синтезаторе «Applied Biosystems 430A» по методу in situ c использованием Nα-Boc-защищенных производных аминокислот. Для блокирования боковых цепей трифункциональных аминокислотных остатков использованы защитные группы бензильного и уретанового типов. Присоединение аминокислотных остатков проводили методом 1-гидроксибензотриазоловых эфиров, используя 5 кратные избытки реагентов. По завершении сборки полипептидной цепи пептидил полимер обрабатывали жидким фтористым водородом по Sn1/Sn2 механизмам в присутствии скавенджеров. Продукт высаживали диэтиловым эфиром и очищали методом препаративной обращенно-фазовой хроматографии до гомогенного состояния. Конечные продукты охарактеризованы данными аминокислотного и масс-спектрального анализов и аналитической ОФ ВЭЖХ. Аминокислотный состав полученных соединений и их молекулярный вес соответствовали теоретическим, чистота по данным аналитической ОФ ВЭЖХ была не менее 95%.

Антибактериальную активность исследуемых веществ изучали в отношении St. aureus 155, E. сoli 2290 диффузионно-дисковым методом [12]. В качестве контролей использовали рекомбинантные пептиды HNP 1-3 (представитель семейства альфа-дефенсинов человека) и LL37 (представитель семейства кателицидинов) производства компании HyCult biotechnology (Нидерланды).

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление