Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2011, № 2

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Врачу общей практики

Номер 2'2011

Клинико-диагностическое значение апоптоза в патогенезе нейтропении и бактериальных осложнений у новорожденных с респираторным дистресс-синдромом


М.Г. Пухтинская, В.В. Эстрин, Е.С. Гулова

Актуальность исследования определена необходимостью совершенствования превентивной диагностики бактериальных осложнений в связи с высокой частотой их развития у новорожденных с респираторным дистресс-синдромом (РДС). С целью выявления иммунологических маркеров развития нейтропении изучали субпопуляционный состав и апоптоз лимфоцитов крови методом проточной цитометрии с использованием антител к аннексину и прокрашивания пропидием йодида и плазменный уровень некоторых цитокинов иммуноферментным методом у 64 новорожденных с РДС на искусственной вентиляции легких, ретроспективно разделенных на две группы: с развитием нейтропении (n=30) и без нее (n=34). Снижение уровня G-CSF и FGF ниже 1556 пкг/мл и 25,7 пкг/мл (соответственно), увеличение уровня sFas-L и процента лимфоцитов в раннем и позднем апоптозе свыше 5870 пкг/мл, 9,5 и 0,56% (соответственно) позволяет с высокой точностью, чувствительностью и специфичностью прогнозировать развитие нейтропении при поступлении пациента в отделение реанимации. (Цитокины и воспаление. 2011. Т. 10. № 2. С. 66–69.)

Ключевые слова: апоптоз, нейтропения, сепсис, новорожденный, цитокины.

Основной причиной летального исхода у новорожденных с респираторным дистресс-синдромом (РДС), находящихся на искусственной вентиляции легких (ИВЛ), остается присоединение тяжелых бактериальных осложнений, в частности, неонатального сепсиса [2, 5, 6]. Наиболее ранним и достоверным симптомом развития этой патологии признана нейтропения, нарастающая к 3–4 суткам госпитализации пациентов в отделении реанимации [6, 9, 10, 12, 14]. В литературе высказывается предположение, что патогенез нейтропении связан с высоким уровнем спонтанного и индуцированного апоптоза иммунокомпетентных клеток [3, 8, 11]. Однако закономерности возникновения нейтрофильной недостаточности у новорожденных с РДС на ИВЛ не выяснены, что определяет необходимость дальнейших исследований.

Возможность прогнозирования развития нейтропении позволит выделить пациентов с высоким риском развития неонатального сепсиса на самых ранних этапах. Выявление новорожденных, нуждающихся в усиленной интенсивной терапии, позволит снизить заболеваемость сепсисом, летальность и сократит финансовые затраты. Кроме того, четкое представление о патогенетических механизмах развития нейтропении обеспечит клиницистам возможность дифференцированной тактики назначения иммунокорригирующей терапии.

Целью исследования было определение иммунологических маркеров, прогнозирующих развитие нейтропении у новорожденных с РДС, находящихся на ИВЛ, путем изучения механизмов апоптоза иммунокомпетентных клеток.

Материалы и методы

В исследование вошли 64 новорожденных с РДС, поступивших в реанимационное отделение в тяжелом состоянии на ИВЛ, родившихся в сроке гестации 39±2,1 недель, с массой тела 3700±565 г, от матерей в возрасте 26±7,4 года с отягощенным акушерским анамнезом, с оценкой по Апгар 3,2±1,6 баллов, без клинических признаков инфицирования. Тяжесть состояния новорожденных была обусловлена дыхательной недостаточностью (гипоксемия pО2<50, гиперкапния pCО2>45, выраженный ацидоз — pH капиллярной крови < 7,25). Все дети были переведены на ИВЛ в родильном зале и транспортированы в отделение реанимации в первые часы жизни (3±0,9 ч).

При поступлении, помимо стандартного обследования, пациентам определяли:

– субпопуляционный состав лимфоцитов крови методом однопараметрического иммунофенотипирования, используя реагенты фирмы Immunotech Beckman Coulter (США): ФИТЦ-меченные моноклональные антитела к CD3, CD4, CD8, CD14, CD19, CD34, CD56, CD69, CD71, CD95, HLA-DR;

– процентное количество лимфоцитов, находящихся в раннем и позднем апоптозе, используя антитела к аннексину и прокрашивание пропидием йодида, с учетом результатов на проточном цитометре Beckman Coulter Epics XL (США), используя стандартные протоколы. Выделение пула лейкоцитов крови производили с использованием лизирующего раствора OptiLyse C Beckman Coulter (США) по прилагаемому протоколу;

– плазменный уровень фактора некроза опухоли (TNF), эндогенного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (G-CSF), фактора роста фибробластов (FGF), апоптогенного (sFas-L) иммуноферментным методом на многофункциональном счетчике для иммунологических исследований Victor (Финляндия), используя тест-системы фирмы Cytimmune Sciences Inc. (США) и Bender MedSystems GmbH (Австрия).

Исследование проведено с разрешения локального этического комитета. Получено информированное согласие родителей всех новорожденных, вошедших в исследование.

Ретроспективно пациенты были разделены на 2 группы. У 30 детей (1-я группа) на 3–4 сутки пребывания в отделении в гемограмме наблюдалось снижение абсолютного числа нейтрофилов (М<2000 кл/мм3). У 34 пациентов (2-я группа) развития нейтропении не произошло.

Результаты исследования оценивали методом вариационной статистики с использованием медианы и ошибки медианы. Распределение полученных данных было отлично от нормального, поэтому при статистическом анализе использовали непараметрические методы. Достоверность различия отдельных выборок определяли непараметрическим критерием Вилкоксона для связанных групп. Абсолютный и относительный риск развития неонатального сепсиса и летального исхода заболевания оценивали методом четырехпольных таблиц. Достоверность результатов оценена критерием Гехана — Вилкоксона. Для оценки тестов разделения групп проводили построение характеристических кривых (ROC-кривых), что позволило провести оценку зависимости точности, чувствительности и специфичности разделения групп по исследуемому признаку от значения CutOff. Кривые сравнивались визуально. Чувствительность теста рассчитывали, как долю новорожденных (%) с положительным результатом теста среди новорожденных с изучаемым заболеванием по формуле: диагностическая чувствительность (%) = число новорожденных с положительным результатом теста/число новорожденных в изучаемой группе. Специфичность теста (%) = число новорожденных с отрицательным результатом теста/ число всех новорожденных без изучаемого заболевания. Предсказательную ценность положительного результата (ПЦП) и предсказательную ценность отрицательного результата (ПЦО) оценивали, используя построение таблицы результатов исследования диагностического метода: ПЦП (вероятность наличия заболевания при положительном результате теста, %) = а/(а+b); ПЦО (вероятность отсутствия заболевания при отрицательном результате теста, %) = d/(c+d) [7]. Достоверность предположений подтверждена тестом Фишера — Ирвина при 5% уровне значимости в отношении двухсторонней альтернативы. Статистическая мощность исследования составила 80% (α≤0,05). В исследовании использовали Excel-2000, «Мегастат», Statistica 6.

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление