Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2011, № 4

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Врачу общей практики

Номер 4'2011

Роль молекулярных медиаторов в патогенезе патологии почек у детей

Л.Р. Кальметьева

Работа посвящена изучению особенностей мочевой экскреции МСР-1 у детей с различными заболеваниями почек, определению характера взаимодействия и степени взаимосвязей клинико-лабораторных показателей при прогрессировании заболеваний почек. Обследованы 25 здоровых детей, 22 пациента с нефротическим синдромом, 19 — с хроническим гломерулонефритом с гематурией; 6 — с нефритическим синдромом острого гломерулонефрита, 9 — с острой почечной недостаточностью и 2 — с хронической почечной недостаточностью. Иммунологическое обследование включало определение концентрации сывороточных IgА, IgМ, IgG, уровня циркулирующих иммунных комплексов, комплемента, иммунофенотипирование лимфоцитов. По данным ДНК-цитометрии периферической крови оценивали плоидность и кинетику клеточного цикла. Уровень MСР-1 в моче определяли иммуноферментным методом. Установлено, что в остром периоде при всех нозологических формах патологии почек уровень МСР-1 в моче повышен. Корреляционный анализ выявил зависимости, раскрывающие патогенетические механизмы прогрессирования заболевания. Выделены критерии, позволяющие мониторировать активность процесса, определять прогноз, тактику лечения и оценивать эффективность проводимой терапии. (Цитокины и воспаление. 2011. Т. 10. № 4. С. 130–135.)

Ключевые слова: патология почек, почечная недостаточность, моноцитарный хемоаттрактивный протеин-1, маркеры активности, дети.

Согласно современным представлениям о законах общей патологии, в основе развития любого заболевания лежит нарушение межклеточных взаимодействий и дисбаланс в системе цитокинов. Клетки в ответ на повреждение вырабатывают комплекс вазоактивных, про- и противовоспалительных, просклеротических, проапоптозных медиаторов – цитокинов. Сеть цитокинов является важнейшим инструментом иммунной системы, осуществляющим взаимодействие клеток разного типа в иммунном ответе. Многочисленные факты указывают на наличие тесной взаимосвязи между уровнем продукции этих молекул и клиническими характеристиками патологического процесса. На основании этих данных постоянно расширяются области медицины, в которых определение уровня цитокинов в крови или биологических средах твердофазным иммуноферментным методом может дать ценную информацию для диагностики или прогноза течения заболевания, а также мониторинга эффекта терапии.

Одним из перспективных направлений в этом смысле является изучение иммуновоспалительных механизмов поражения почек, в частности, определение роли провоспалительных и профиброгенных молекулярных медиаторов тканевого повреждения в процессах клеточной пролиферации и патогенезе фиброзно-склеротических изменений почечной ткани. В последнее время доказано первостепенное значение тубулоинтерстициального компонента в прогрессировании хронических заболеваний почек с последующим развитием почечной недостаточности [2, 4].

Формирование изменений тубулоинтерстициальной ткани включает в себя инфильтрацию интерстиция воспалительными клетками, склероз интерстиция и атрофию канальцевого эпителия. Патогенез развития тубулоинтестициальных изменений в почках складывается из целого ряда механизмов, таких как протеинурия, тубулярная ишемия, гипоксия, влияние белковых и ферментных факторов, цитокинов, ростовых факторов и др. Во многих работах показано, что первостепенное повреждающее воздействие на тубулярные эпителиальные клетки оказывает, прежде всего, высокая протеинурия, часто сопровождающая гломерулярные заболевания [1, 2]. Установлено, что любое повреждение клеток паренхимы почек, в том числе компонентами протеинурии, приводит к продукции ими медиаторов воспаления. Под воздействием провоспалительных цитокинов, таких как IL-1β и TNFα, стимулируется продукция моноцитарного хемоаттрактантного протеина 1 (monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1), который обеспечивает приток лейкоцитов и моноцитов в область повреждения и формирование воспалительного инфильтрата. Основными источниками MCP-1 в моче считаются клетки тубулярного эпителия. Этот хемокин экспрессируется также мезангиальными, эндотелиальными, мононуклеарными клетками инфильтрата и подоцитами [1].

MCP-1 является не только хемоаттрактантом, обеспечивающим миграцию мононуклеарных клеток в очаг воспаления, но и медиатором воспаления, активирующим резидентные клетки. В культуре клеток MCP-1 изменяет фенотип париетальных эпителиальных клеток, мезангиальных клеток клубочка (активирует их), интерстициальных фибробластов (стимулирует синтез коллагена), а также тубулярных клеток (индуцирует трансдифференциацию в миофибробласты) [3]. Под воздействием MCP-1 происходит пролиферация гладкомышечных клеток сосудов, секреция ими провоспалительных цитокинов, способствующих прогрессированию почечного заболевания за счет сосудистого повреждения [6]. Установлено вовлечение MCP-1 в процессы интерстициального фиброза и гломерулосклероза. Этот протеин вызывает повышение выработки тубулярными эпителиальными клетками основного профиброгенного цитокина — трансформирующего фактора роста бета 1 (TGF-β1) [2].

В настоящее время имеются единичные клинические работы по изучению мочевой экскреции MCP-1 у больных с заболеваниями почек. В частности, при исследовании мочи больных гломерулонефритами группой японских авторов [7] было выявлено повышение уровня MCP-1, коррелирующее со степенью активности тубулоинтерстициального повреждения и фиброза [2, 8]. В исследовании, проведенном у пациентов с ANCA-ассоциированным васкулитом, уровень МСР-1 в моче больных с поражением почек был значительно выше, чем у пациентов с экстраренальными проявлениями васкулита, больных с ремиссией васкулита и здоровых лиц.

В имеющихся исследованиях недостаточно освещенными остаются вопросы, касающиеся определения взаимосвязей MCP-1 с другими маркерами активности процесса.

Целью данного исследования явилось изучение диагностических и прогностических возможностей определения концентраций МСР-1 в моче у детей с различными заболеваниями почек.

Материалы и методы

Обследовано 83 ребенка в возрасте от 6 до 17 лет. Из них — 25 здоровых детей, составивших контрольную группу, и 58 детей с различными заболеваниями почек, нозологическая структура которых представлена на рис. 1. Для решения поставленных задач в исследование были включены пациенты с хронической почечной патологией: 22 ребенка с нефротическим синдромом (НС), 19 — с хроническим гломерулонефритом (ХГН) с гематурией и 2 — с хронической почечной недостаточностью (ХПН), а также больные с острыми заболеваниями: 6 детей с острым гломерулонефритом (ОГН) с нефритическим синдромом и 9 — с острой почечной недостаточностью (ОПН), развившейся на фоне геморрагической лихорадки с почечным синдромом (ГЛПС). При этом в группе с НС (22 ребенка) были выделены пациенты со стероидзависимым (СЗНС) и стероидрезистентным (СРНС) вариантами.

Рис. 1. Нозологическая структура детей с заболеваниями почек (n = 58)

Всем обследованным с НС и ХГН с гематурией проводили адекватную иммуносупрессивную терапию гормональными и/или цитостатическими препаратами (циклоспорин А, азатиоприн, циклофосфан).

Обследование детей с почечными заболеваниями включало тщательный сбор соматического анамнеза, проведение общеклинических лабораторных и инструментальных исследований.

Иммунный статус пациентов исследовали с помощью комплекса стандартизированных тестов, включающих оценку:

- клеточного звена системы иммунитета методом проточной лазерной цитометрии (прибор Fascalibur) с использованием моноклональных антител фирмы Becton Dickinson и определением относительного содержания основных субпопуляций иммунокомпетентных клеток (СD3, СD4, СD8, СD16, СD19) и маркеров активации (СD25, СD95, HLA-DR);

- концентрации сывороточных IgМ, IgG, IgА в периферической крови по Манчини;

- уровня циркулирующих иммунных комплексов методом осаждения полиэтиленгликолем;

- титра комплемента по 50% гемолизу негепаринизированной крови.

Кроме того, впервые у больных с ХГН была определена пролиферативная активность клеток методом проточной ДНК-цитометрии периферической крови. При этом учитывали процент клеток, находящихся в S-фазе — фазе пролиферации.

Определение уровня мочевой экскреции MСР-1 проводили у практически здоровых детей и у пациентов с заболеваниями почек твердофазным «сэндвич»-методом иммуноферментного анализа с использованием моно- и поликлональных антител к МСР-1 человека (МСР-1-ИФА-БЕСТ) производства ЗАО «Вектор-Бест» (г. Новосибирск). Концентрацию МСР-1 измеряли в утренней, средней порции мочи, взятой с 9 до 11 ч. Диапозон измеряемых концентраций составил 0–2000 пг/мл, чувствительность анализа — 15 пг/мл.

Так как целью исследования было определение роли МСР-1, все полученные параметры были использованы для анализа корреляционных взаимосвязей с концентрацией МСР-1 в моче.

Статистический анализ проводили с использованием компьютерных программ Statistica 7.0, Excel 8.0. Исследования проводили выборочным методом. Для установления взаимосвязей между изучаемыми параметрами полученные данные подвергались корреляционно-регрессионному анализу с вычислением статистических таблиц распределения, коэффициентов корреляции (парные линейные — r). При значительных отклонениях закона распределения от нормального использовали непараметрические методы анализа взаимосвязи показателей и достоверности различий (ранговый коэффициент корреляции Спирмена и тест Манна — Уитни). При р<0,05 оценка коэффициентов корреляции была общепринятой: 0,01–0,29 — слабая степень связи; 0,30–0,69 — умеренная; 0,70–0,99 — высокая степень связи.

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление