Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2011, № 4

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 4'2011

Исследование интерлейкина 1β, интерферона γ, интерлейкина 2 в ротовой жидкости пациентов с хроническим генерализованным периодонтитом, хроническим гингивитом и периодонтальноздоровых

М.Н. Волкова, В.В. Янченко

Целью исследования было определить уровни цитокинов IL-1β, IFNγ, IL-2 в ротовой жидкости пациентов со здоровым периодонтом и в группах пациентов с гингивитом и хроническим генерализованным периодонтитом (ХГП), влияние периодонтальной терапии на уровни этих цитокинов в слюне пациентов с ХГП. Обследовали 61 пациента с ХГП и 13 пациентов со здоровым периодонтом. Всем пациентам были измерены: индекс налета (IPL, Silness-Loe), индекс кровоточивости десневой борозды (SBI, Muhleman), периодонтальный индекс (PI, Russel). Пациенты с ХГП были разделены на 3 группы: легкой, средней и тяжелой степенью тяжести на основании измерения глубины периодонтального кармана (ПК), потери клинического прикрепления и рентгенологического обследования.Концентрации цитокинов определяли иммуноферментным методом. Концентрации IL-1β в образцах слюны пациентов с ХГП были значительно выше, чем у здоровых (p<0,05). Найдена корреляция между уровнем IL-1β в слюне пациентов с ХГП и глубиной периодонтального кармана, потерей прикрепления, индексом SBI. Было определено статистически значимое снижение уровня IL-1β в ротовой жидкости пациентов ХГП после периодонтальной терапии. Данные результаты указывают на то, что уровень IL-1β в слюне может быть использован в качестве биомаркера воспалительно-деструктивного процесса в тканях периодонта. (Цитокины и воспаление. 2011. Т. 10. № 4. С. 46–51. )

Ключевые слова: цитокины, периодонтит, слюна, ротовая жидкость.

Периодонтит — хроническое воспалительное заболевание, которое является результатом взаимодействия между периодонтопатогенными бактериями и системой иммунитета человека и ведет к прогрессирующей деструкции соединительной ткани зубодесневого прикрепления и альвеолярной кости. Диагностика и классификация заболеваний периодонта базируется в основном на клинических параметрах и рентгенологическом обследовании костной ткани альвеолярного отростка. Однако для лучшего понимания путей и механизмов развития иммунного ответа у больных с хроническими периодонтитами целесообразно исследовать биологические среды (слюну, десневую жидкость), а также поддесневую микрофлору. Цельная слюна или ротовая жидкость широко используется для диагностики как оральных, так и системных заболеваний вследствие легкой, неинвазивной методики ее сбора. Уровни биомаркеров слюны, например, цитокинов, могут быть использованы для диагностики заболеваний периодонта, принадлежности пациента к группе риска. Слюна позволяет анализировать различные биологические маркеры: протеины, энзимы, бактериальные продукты, гормоны, ионы.

Клетки системы иммунитета и цитокины играют важную роль в инициации и прогрессировании воспаления в периодонте. IL-1 — провоспалительный цитокин, в основном, cекретируемый макрофагами, но также Т-лимфоцитами и клетками эпителия; стимулирует и активирует стволовые клетки, Т- и В-лимфоциты, нейтрофилы; представляет собой эндогенный пироген. Существует в двух формах — IL-1α и IL-1β. Липополисахариды (ЛПС) клеточной стенки периодонтопатогенных бактерий стимулируют макрофаги к выработке IL-1, который усиливает темпы своей продукции по аутокринному механизму. Взаимодействие ЛПС клеточной стенки бактерий с макрофагами осуществляется через рецептор CD14. Кроме того, лейкотоксин A. actinomycetemcomitans может запускать обильную секрецию биоактивного IL-1β макрофагами [4]. При постоянном массивном поступлении микробных агентов выработка цитокина становится чрезмерной. IL-1β стимулирует продукцию матричных металлопротеиназ, снижает выработку тканевого ингибитора металлопротеиназ, индуцирует синтез RANKL и, таким образом, потенцирует резорбцию альвеолярной кости, а также напрямую активирует остеокласты [5].

IFNγ — иммунорегуляторный цитокин, продуцируемый Th1, который влияет не только на иммунокомпетентные клетки, но и на фибробласты [7]. Активирует макрофаги, усиливая фагоцитоз. В то же время IFNγ может блокировать аутостимуляцию IL-1β макрофагами, однако при периодонтите, как показывают некоторые исследования, уровень IFNγ снижен. Повышенные уровни IFNγ-продуцирующих клеток, а также значительное увеличение количества IFNγ в тканях десны при периодонтитах были найдены в результате многих иммуногистохимических и RT-PCR исследований [9]. Однако результаты исследований десневой жидкости и слюны по содержанию в них IFNγ противоречивы [8].

IL-2 cекретируется T-хелперами и стимулирует пролиферацию и дифференцировку всех субпопуляций T- и В-лимфоцитов, естественных киллеров, моноцитов, является неспецифическим фактором роста T-клеток.

Цель данного исследования состояла в определении уровней цитокинов IL-1β, IFNγ, IL-2 в ротовой жидкости у пациентов со здоровым периодонтом и в группах пациентов с гингивитом и хроническим генерализованным периодонтитом (ХГП) и исследовании влияния периодонтальной терапии на уровни этих цитокинов в слюне пациентов с хроническим периодонтитом.

Материалы и методы

В исследование были включены 61 пациент в возрасте от 18 до 61 года (21 мужчина и 40 женщин), обратившихся в Витебскую областную стоматологическую поликлинику, а также на кафедру терапевтической стоматологии ВГМУ в период с июля 2009 по декабрь 2009 года. Из них больных с ХГП — 39, с хроническим гингивитом — 9 пациентов в возрасте от 18 до 39 лет., здоровых — 13 человек в возрасте от 22 до 44 лет без потери клинического прикрепления, кровоточивости при зондировании. 20 (32,8 %) пациентов являлись курильщиками (со стажем не менее 10 лет), 8 (13,1 %) ранее курили (стаж не менее 5 лет), 33 (54,1%) никогда ранее не курили. Добровольное информированное согласие на участие в исследование было получено от всех обследованных.

Всем включенным в исследование были определены индекс налета (IPL, Silness and Loe, 1964), индекс кровоточивости десневой борозды (SBI, Muhleman, 1971) в модификации I. Cowell (1975), периодонтальный индекс (PI, Russel, 1956).

Критерии включения в исследование для пациентов с ХГП:минимум 18 сохранившихся зубов, за исключением 3-их моляров; отсутствие системных заболеваний; отсутствие периодонтального лечения, cистемной антибактериальной и противовоспалительной терапии в течение 6 месяцев перед данным исследованием.

После измерения глубины периодонтальных карманов (ПК), клинической потери прикрепления; получения рентгенологических данных о деструкции альвеолярной кости (использован метод панорамной рентгенографии на ортопантомографе Othophos 3 (Sirona, Germany), рентгенологическая нагрузка 0,07 мЗв), пациенты были разделены по степени тяжести на три группы: с периодонтитом тяжелой степени тяжести (6 пациентов в возрасте от 34 до 57 лет с глубиной ПК 5,94±0,39 мм); с периодонтитом средней степени тяжести (17 пациентов в возрасте от 30 до 49 лет с глубиной ПК 4,34±0,43 мм); с периодонтитом легкой степени тяжести (16 пациентов в возрасте от 21 до 61 года с глубиной ПК 3,3±0,23 мм).

Глубина ПК была измерена с мезиобуккальной, мезиолингвальной, дистальнобуккальной, дистальнолингвальной, буккальной и лингвальной поверхностей. Клиническая потеря прикрепления была определена измерением расстояния от эмалевоцементной границы до дна периодонтального кармана с интерпроксимальных поверхностей. Индекс SBI определяли в области зубов Рамфьорда с щечной и язычной поверхностей.

Критерии включения для пациентов с гингивитом: генерализованное воспаление десны с кровоточивостью при зондировании, SBI>1,0; отсутствие профессиональной гигиены перед обследованием и системных заболеваний.

Всем пациентам из групп ХГП был проведен начальный этап периодонтальной терапии — скейлинг и рутпленинг ручным методом с помощью кюрет Gracey и ультразвуковым (ультразвуковая система Varios 350, NSK, Япония).

Забор нестимулированной слюны у каждого пациента в группах с ХГП, гингивитом до и через 7–10 дней после проведения профессиональной гигиены, а также в группе здоровых доноров был сделан согласно модифицированной версии, описанной M. Navazesh [6]. Образцы слюны собирали в первой половине дня, пациентам перед забором слюны рекомендовали воздерживаться от приема пищи, курения, от гигиены полости рта, а непосредственно перед процедурой — прополоскать рот. Образцы слюны были собраны в 1,5-миллилитровые микропробирки «Эппендорф» и немедленно заморожены при температуре –20 ºС до исследования. Измерения уровня цитокинов проводили через 7–120 дней после забора слюны.

Измерение цитокинов слюны. В данном исследовании уровни IL-1β, IL-2, IFNγ в слюне были измерены с применением иммуноферментных тест-систем ОАО «Цитокин» (Санкт-Петербург) на планшетном ридере ОАО «Витязь» (г. Витебск, Республика Беларусь) и универсальном фотометре (ФЗОО). Измерение проводили твердофазным иммуноферментным методом с помощью моноклональных антител и с применением пероксидазы хрена в соответствии с прилагаемыми инструкциями. В качестве стандарта в каждой реакции служили рекомбинанатные IL-1β, IL-2, IFNγ, входящие в состав набора. По результатам оптической плотности титрованных стандартных образцов строили калибровочные графики для каждого из цитокинов, по которым определяли концентрацию IL-2, IL-1β, IFNγ в опытных образцах ротовой жидкости.

Статистический анализ. Статистическую обработку результатов проводили с помощью программы Statistica 6.0. После первоначального определения характера распределения для признаков, подчиняющихся нормальному распределению при сравнении групп был использован t-критерий Стьюдента, а для не подчиняющихся законам нормального распределения — непараметрический U-критерий Манна — Уитни. Поскольку для определения степени корреляции были использованы признаки, не подчиняющиеся нормальному закону распределения, для ее оценки был использован тест Спирмена. За критический уровень статистической значимости принимали вероятность безошибочного прогноза равную 95% (р<0,05).

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление