Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2012, № 2

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 2'2012

Особенности продукции цитокинов Th1/Th2-профиля у пациентов с различными клиническими вариантами аутоиммунного сахарного диабета

Т.В. Саприна, Ф.Э. Лазаренко, Т.С. Прохоренко, Н.В. Рязанцева, И.Н. Ворожцова

Вследствие особенностей цитокинопосредованных клеточных взаимодействий при латентном аутоиммунном сахарном диабете потеря функциональной паренхимы и манифестация инсулиновой недостаточности развивается медленно, растягиваясь на годы. Вышеизложенное требует более активной и тщательной диагностической тактики с использованием иммунологических методов обследования у пациентов старшей возрастной группы, где представлены различные патогенетические варианты сахарного диабета. (Цитокины и воспаление. 2012. Т. 11. № 2. С. 51–57.)

Ключевые слова: латентный аутоиммунный сахарный диабет, сахарный диабет 1-го типа, цитокины, иммунопатогенез.

В настоящее время отмечается неуклонный рост заболеваемости сахарным диабетом (СД) во всех возрастных и этнических группах. Прогнозируемое увеличение распространенности СД среди лиц в возрасте от 20 до 44 лет к 2030 г. до 60 млн. человек приведет к катастрофическим последствиям [15]. Этот возрастной интервал интересен с эпидемиологической точки зрения, поскольку заболеваемость СД 1-го типа находится еще на довольно высоком уровне, а заболеваемость СД 2-го типа, резко нарастая к 30 годам, сравнивается с заболеваемостью СД 1-го типа [1].

Среди пациентов с СД в данном возрастном диапазоне обозначилась особая группа больных латентным аутоиммунным диабетом взрослых (LADA) [1, 2]. К моменту постановки диагноза СД у пациентов с LADA, как правило, сохраняется значительный уровень остаточной секреции инсулина. Исследование DCCT (1993) свидетельствует, что при аутоиммунном СД даже минимальная остаточная секреция С-пептида ассоциирована с лучшим метаболическим контролем [2, 12]. Следовательно, группа больных с LADA представляет особый интерес для исследователей как модель для оценки эффективности терапевтических вмешательств с целью предупреждения снижения уровня эндогенного инсулина.

Известно, что морфологическим субстратом СД 1-го типа является воспаление, локализующееся в островке Лангерганса и приводящее к дисфункции и гибели β-клеток. Это воспаление имеет аутоиммунный характер (аутоиммунный инсулит (АИ)) и приводит к гибели β-клеток путем некроза или апоптоза [4, 9]. Т-лимфоциты играют важную роль в инициации и дальнейшем развитии аутоиммунного процесса [7]. При этом основная роль принадлежит CD8-лимфоцитам (цитотоксическим) и CD4-лимфоцитам, преимущественно Th1-профиля [4].

Цитокины играют принципиальную роль в индукции и поддержании иммунологической толерантности. Имеющиеся в литературе данные позволяют считать, что медленное повреждение β-клеток при LADA не является случайным, а отражает патогенетические особенности функционирования Т-звена иммунитета, отличные от механизмов развития классического СД 1-го типа [3, 11]. Вклад каждого компонента цитокиновой сети в сохранение иммунологической толерантности к клеткам островкового аппарата поджелудочной железы и его повреждение остается до конца невыясненным. Исследование цитокинового дисбаланса при СД аутоиммунного генеза и его связи с клинико-метаболическими нарушениями представляет не только научный, но и практический интерес.

Цель работы — установить особенности продукции цитокинов Th1/Th2-профиля у пациентов с LADA и их взаимосвязь с параметрами клинического фенотипа заболевания.

Материалы и методы

В исследование были включены 135 пациентов (72 женщины и 63 мужчины) в возрасте от 21 до 61 года (средний возраст — 41,3±1,0 г.). Диагноз сахарного диабета устанавливали на основании критериев ВОЗ (1999 г.).

Группу больных с СД 1-го типа составили 37 человек (13 женщин и 24 мужчины); средний возраст — 34,6±7,2 года. Диагноз СД 1-го типа устанавливали на основании развития кетоацидоза в течение первых 6 месяцев от начала заболевания, персистирующей потребности в инсулинотерапии после ликвидации кетоза и достижения метаболической компенсации.

В группу пациентов СД 2-го типа были включены 98 человек (59 женщин и 39 мужчин), средний возраст — 43,6±7,6 года. Заболевание характеризовалась постепенным началом без развития кетоацидоза; отсутствовала потребность в инсулинотерапии после ликвидации кетоза и для достижения метаболической компенсации как минимум в течение 6 месяцев после манифестации диабета. Из числа этих пациентов, согласно критериям P. Zimmet, были отобраны пациенты с подозрением на LADA: 41 человек, средний возраст — 41,2 ±1,6 года. В качестве клинических критериев диагноза LADA использовались: манифестация в возрасте от 30 до 50 лет без развития кетоацидоза, индекс массы тела (ИМТ) менее 25 кг/м2, отсутствие признаков метаболического синдрома, наличие личного и семейного анамнеза аутоиммунных заболеваний. В качестве косвенного лабораторного маркера LADA считали отсутствие гиперинсулинемии натощак и/или отсутствие прироста секреторной реакции β-клеток на 120-й минуте стандартного теста толерантности к глюкозе (СТТГ).

Материалом исследования являлась венозная кровь обследованных лиц, взятая утром натощак.

Определение титра аутоантител (АТ) к декарбоксилазе глутаминовой кислоты (GAD65), к клеткам островков Лангерганса (ICA) и к инсулину (IAA) в сыворотке проводили твердофазным иммуноферментным методом (ИФМ) по инструкциям, предлагаемым производителями тест-систем («Biomerica» (Германия) для GAD и ICA; «Orgentec» (Германия) для IAA). Определение C-пептида в сыворотке больных; полученной утром натощак и на 120-й мин СТТГ, проводили ИФМ по инструкции производителя тест-системы («AccuBind», США). Учет результатов проводили с помощью фотометра для микропланшетов «Multiscan EX» («ThermoLabSystems», Финляндия) при длине волны 405 нм для GAD и ICA, 450 нм — для IAA и C-пептида. Концентрации GAD, IAA и C-пептида вычисляли автоматически по калибровочным кривым.

Мононуклеарные лейкоциты выделяли на градиенте плотности фиколла–верографина. Для получения супернатантов выделенные клетки ресуспендировали в полной питательной среде, стандартизируя их количество до 2,0´106/мл. Для стимуляции мононуклеарных лейкоцитов в пробы вносили фитогемагглютинин (ФГА, «Difco», Германия) (10 мкг/мл) с дальнейшей инкубацией клеточных суспензий в течение 24 часов.

Определение спонтанного и стимулированного ФГА уровней интерлейкинов -2, -4, и -10 (IL-2, IL-4, IL-10) в супернатантах клеточных культур проводили с использованием ИФМ по инструкциям производителя (ЗАО «ВекторБест», г. Новосибирск). Учет результатов ИФМ осуществляли при длине волны 450 нм.

Все лица, участвующие в исследовании, дали информированное согласие.

Результаты исследования обрабатывали с использованием пакета программ SPSS 11,5 и пакета программ Microsoft Excel (2007 г.). Нормальность распределения проверяли с помощью критерия Шапиро — Уилка. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимали менее 0,05, при межгрупповом сравнении использовали непараметрический U-критерий Манна — Уитни, качественные показатели сравнивали с помощью критерия χ2.

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление