Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2012, № 2

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 2'2012

Диагностическая значимость исследования сывороточной концентрации и мочевой экскреции некоторых цитокинов при манифестном гипотиреозе

М.М. Орлова, Т.И. Родионова

Целью исследования явилось изучение сывороточной концентрации провоспалительных цитокинов IL-1β, IL-6, IL-8, противовоспалительного цитокина IL-10 и VEGF в сыворотке крови у 80 пациентов с манифестным гипотиреозом. Оценка функции почек включала исследование мочевой экскреции хемокинов MCP-1 и RANTES. Показано, что при аутоиммунном тиреоидите наблюдается нарушение баланса цитокинов Тh1- и Th2-типа, что играет значительную роль в развитии аутоиммунного состояния и прогрессировании заболевания. Выявлено повышение уровня мочевой экскреции провоспалительного цитокина MCP-1 в группе пациентов с аутоиммунным тиреоидитом. (Цитокины и воспаление. 2012. Т. 11. № 2. С. 58–62.)

Ключевые слова: тиреоидные гормоны, аутоиммунный тиреоидит, цитокины.

Гипотиреоз относится к наиболее распространенным нарушениям функции щитовидной железы (ЩЖ). Наиболее высока распространенность гипотиреоза в возрастной группе старше 75 лет, где она достигает 16-21 %, однако использование в современной клинической практике высокоточных методов исследования гормонов ЩЖ привело к достаточно частому выявлению гипотиреоза у лиц молодого и среднего возраста [10]. Дефицит тироксина приводит к тяжелой и разнообразной патологии всего организма, вызывает изменения в иммунной системе [11, 13]. Многими авторами отмечено, что при хроническом аутоиммунном тиреоидите (ХАИТ) значительно изменяется содержание провоспалительных цитокинов в сыворотке крови и моче, но результаты этих исследований противоречивы [1, 2, 4]. Если рассматривать ХАИТ с точки зрения теории расстройства иммунологической регуляции, то, учитывая повышение функции Т-хелперов и инициацию ответа со стороны аутореактивных В-лимфоцитов на собственные антигены даже при нормальной функции Т-супрессоров, можно предполагать повышение продукции некоторых цитокинов Т-хелперами при АИТ [5, 7, 9]. В этой связи представляет интерес изучение и сравнение содержания цитокинов в сыворотке крови и моче у пациентов с ХАИТ и послеоперационным гипотиреозом (ПГ). В настоящее время отсутствуют системные представления о роли дисбаланса цитокинов в течении и прогрессировании манифестного гипотиреоза (МГ), что и определило цель настоящего исследования.

Материалы и методы

В соответствии с поставленными в исследовании задачами было проведено комплексное клинико-функциональное обследование 80 пациентов, страдающих первичным МГ различного генеза (аутоиммунного и послеоперационного), включая оценку функции почек и исследование уровня про- и противовоспалительных цитокинов (интерлейкина 1β (IL-1β), интерлейкина 6 (IL-6), интерлейкина 8 (IL-8), интерлейкина 10 (IL-10), моноцитарного хемотаксического протеина 1 (MCP-1), хемокина, экспрессируемого и секретируемого Т-клетками при активации (RANTES)), а также сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF). Диагноз гипотиреоза устанавливали на основании жалоб, данных анамнеза, характерной клинической картины. Все больные были обследованы в фазе субкомпенсации и декомпенсации при максимально выраженной клинической картине заболевания. Диагноз гипотиреоза подтверждался во всех случаях результатами гормонального исследования (ТТГ — выше 4 мМЕд/л и свободного Т4 — ниже 10,3 пмоль/л). Группа сравнения включала 50 человек без нарушения функции ЩЖ, сопоставимых по полу и возрасту.

Статистический анализ данных проводили с помощью программ Statistica 7.0 (StatSoft, Inc., 2004). Проводили интерквартильный анализ с вычислением медианы (Me) и квартилей (25–75 %). При сравнении по количественному признаку двух независимых групп использовали непараметрический метод проверки статистических гипотез — критерий Манна — Уитни (U-test). Анализ связи двух признаков выполняли с применением непараметрического метода ранговой корреляции по Спирмену (r). Критический уровень значимости принимали равным 0,05.

Результаты и обсуждение

Для оценки влияния аутоиммунного процесса в ЩЖ на степень выраженности почечной дисфункции и особенности продукции иммунорегуляторных цитокинов пациенты были разделены на две подгруппы:

1) пациентов с ХАИТ (48 человек);

2) с ПГ(32 человека).

IL-1β – лимфоцитактивирующий фактор, эндогенный медиатор лейкоцитов, имеет 2 формы: IL-1α и IL-1β, входит в группу провоспалительных цитокинов и проявляет свои биологические свойства активацией Т- и В-лимфоцитов, макрофагов, усилением клеточной адгезии и пролиферативной активности, реакциями острой фазы и лихорадочными состояниями [7].

IL-6 продуцируется активированными моноцитами или макрофагами, эндотелиальными клетками, фибробластами, активированными Т-клетками, а также рядом клеток, не являющихся иммуноцитами [5]. Основное действие IL-6 связано с его участием в качестве кофактора при дифференцировке В-лимфоцитов, их созревании и преобразовании в плазматические клетки, секретирующие иммуноглобулины [9].

IL-8 — нейтрофилактивирующий белок 1, фактор активации нейтрофилов, ингибитор адгезии лейкоцитов, хемотактический белок гранулоцитов, влияет на хемотаксис всех мигрирующих иммунных клеток, активирует нейтрофилы, регулирует синтез IgE В-клетками [4].

IL-10 является противовоспалительным цитокином, продуцируется преимущественно Т-лимфоцитами-хелперами 2-го типа [1]. Подавляет функцию Т-хелперов 1-го типа и моноцитов, снижая продукцию иммуноцитокинов (гамма-интерферона, IL-1, IL-8). Усиливает пролиферацию В-лимфоцитов и тканевых базофилов. IL-10 является одним из важнейших регуляторных цитокинов, во многом определяющих направленность иммунного ответа: под влиянием IL-10 подавляется клеточный ответ и стимулируется гуморальный ответ [5].

Хемокин MCP-1 продуцируется разными типами клеток, включая моноциты-макрофаги, фибробласты и клетки некоторых опухолей. Усиливает хемотаксис Т-лимфоцитов, индуцирует хемотаксис и активацию моноцитов [6].

RANTES (хемокин, экспрессируемый и секретируемый Т-клетками при активации) продуцируется разными типами клеток, включая Т-лимфоциты, моноциты, фибробласты. RANTES усиливает хемотаксис Т-клеток (в частности, Т-хелперов), моноцитов, В-лимфоцитов, эозинофилов, а также способствует освобождению гистамина из базофилов обоих типов [5].

Представляет интерес изучение роли VEGF у пациентов с ХАИТ и ПГ. Этот фактор принимает участие в индукции и регуляции как нормального, так и патологически измененного ангиогенеза, стимулирует пролиферацию эндотелиоцитов [12]. В физиологических концентрациях он действует как фактор, обеспечивающий выживание эндотелия [9]. Способность инициировать рост сосудов позволяет рассматривать этот фактор как перспективное средство, улучшающее васкуляризацию ткани ЩЖ, в том числе в очагах активации апоптоза клеток тиреоидного эпителия. С помощью иммуногистохимических методов установлено, что в неизмененных клетках VEGF локализуется в цитоплазме, находясь в связанной форме, что способствует быстрому его высвобождению в случае повреждения клетки [3, 5]. Кроме того, гиперпродукцию ростового фактора может усиливать характерная для гипотиреоза анемия [5, 12]. Поэтому представляет интерес изучение роли VEGF и активности ангиогенеза в условиях ХАИТ и ПГ. Согласно данным литературы, повышение концентрации VEGF сопровождается стимуляцией пролиферации эндотелиоцитов, которые являются активными продуцентами IL-1β [2, 5, 8]. Мы посчитали необходимым исследовать сывороточный уровень данного цитокина для уточнения взаимосвязи изменения концентраций VEGF и IL-1β при МГ. В наше исследование, в соответствии с критериями, были включены пациенты без патологии почек, что подтверждалось данными лабораторных и инструментальных исследований. Поэтому исследование мочевой экскреции VEGF не являлось целесообразным, так как, согласно данным литературы, оно отражает выраженность морфологических изменений в почках [3, 12].

Наиболее значимые различия в группе пациентов с МГ по сравнению с контролем выявлены по уровню IL-6, IL-10 и MCP-1 (табл. 1). В частности, концентрация IL-6 в сыворотке крови у пациентов с МГ практически в 6 раз превышала данный показатель в группе контроля, а уровень IL-10 и MCP-1 — в 2 раза. Повышение содержания иммунорегуляторных цитокинов IL-6 и MCP-1 свидетельствует о наличии активного воспалительного процесса у пациентов с МГ и формировании воспалительного ответа (повышение уровня IL-10). Однако повышение концентрации сывороточного IL-6 было более значимым, чем IL-10, что свидетельствует о нарушении баланса продукции про- и противовоспалительных цитокинов с преобладанием провоспалительного компонента и сохранением активности воспалительного процесса в ЩЖ с последующим образованием очагов склероза.

Полученные результаты исследования уровня IL-1β в группе пациентов с ХАИТ и ПГ соответствовали диапазону нормальных значений. Однако значимые различия по содержанию IL-1β в объединенной группе пациентов с МГ и в подгруппе пациентов с ХАИТ по сравнению с контрольной группой свидетельствуют о его повышении и возможном накоплении на предшествующих этапах развития аутоиммунного процесса у пациентов этой подгруппы (табл. 2).

Анализ полученных данных выявил значимое повышение уровня IL-6, IL-8, IL-10, MCP-1 и фактора роста VEGF у всех больных с ХАИТ и ПГ по сравнению с таковыми в контрольной группе. Таким образом, на развитие воспалительного процесса указывает увеличение уровня каждого отдельного показателя (см. табл. 2). У пациентов с ХАИТ выявлено значимое повышение сывороточного уровня IL-6 сыворотки крови в сравнении с группой контроля: IL-6 — 19,2 (9,8; 24,6) vs 2,49 (1,22; 3,0) пг/мл (pU=0,001), так же, как и в группе пациентов с ПГ — 6,3 (3,1; 9,4) vs 2,49 (1,22; 3,0) пг/мл (pU=0,01), хотя медиана данного показателя соответствовала значениям референтного интервала (10 пг/мл).

Исследование уровня противовоспалительного цитокина IL-10 продемонстрировало статистически значимое его повышение и в группе пациентов с ХАИТ по сравнению с результатами группы контроля: 12,1 (6,8; 15,5) vs 6,7 (3,0; 9,4) пг/мл (pU=0,001), превышающее верхнюю границу диапазона нормальных значений по данному показателю (10 пг/мл). Похожая тенденция была отмечена и в группе пациентов с ПГ: 7,3 (4,6; 11,9) vs 6,7 (3,0; 9,4) пг/мл (pU=0,015).

У пациентов группы ХАИТ и ПГ при исследовании уровня VEGF в сыворотке крови выявлено значимое повышение: 57,2 (26,1; 84,4) и 48,1 (29,9; 74,9), соответственно, что статистически значимо в обоих случаях отличалось от контроля 31,6 (17,0; 40,0) пг/мл (pU=0,03 и pU=0,002, соответственно). Повышение концентрации ростового фактора объясняется, вероятно, выявленным у пациентов этих групп повышением уровня IL-10, который оказывает подавляющее действие на активность макрофагов и избыточный рост эндотелия.

Содержание сывороточного IL-8 у пациентов с ХАИТ значимо превышало соответствующий показатель в контрольной группе: 13,3 (8,8; 14,6) vs 5,48 (5,2; 6,9) пг/мл (pU=0,03). Подобное соотношение наблюдалось и в группе ПГ по сравнению с контролем: 9,7 (8,0; 12,2) vs 5,48 (5,2; 6,9) пг/мл (pU=0,004). Полученные результаты дают основания считать, что данный хемокин принимает активное участие в механизме начального этапа аутоиммунного процесса в ЩЖ, направляя антигензависимые лимфоциты, которые секретируют спектр провоспалительных цитокинов, из крови в ткани ЩЖ, приводя к гибели тироцитов. Хемокин IL-8, вероятно, может быть использован как ранний биомаркер для диагностики ХАИТ на стадии эутиреоза.

На основании изложенного можно предположить следующую хронологию развития событий в иммунной системе при ХАИТ: на начальных этапах болезни происходит повышение титра антител (АТ) к тиреопероксидазе (ТПО), при этом уровень тиреоидных гормонов еще находится в пределах референтных значений; в это время в иммунной системе больного начинается гиперпродукция IL-1β. В дальнейшем, по мере возникновения дефицита тиреоидных гормонов, продукция IL-1 нормализуется, после чего постепенно повышается продукция других про- и противовоспалительных цитокинов IL-6, IL-8, IL-10, обусловленная, вероятно, накоплением в организме IL-1β на предшествующих этапах болезни.

В литературе описаны значительные изменения уровня RANTES в сыворотке крови и моче при аутоиммунных заболеваниях у человека, когда в условиях оксидативного стресса и других факторов происходит нарушение фильтрационной способности почек. Одновременно с этим происходит повышение экспрессии рецепторов хемокинов, а затем и продукция самих хемокинов, в том числе и RANTES, в почечных канальцах и мезенхимальных элементах почек [8]. В результате этого в воспаленные участки почек мигрирует большое количество лейкоцитов, преимущественно моноцитов/макрофагов, которые секретируют спектр провоспалительных цитокинов, вызывающих деструкцию клеток канальцев и окружающих их соединительнотканных элементов, приводя к склерозу гломерул и фиброзу интерстициальной ткани. В связи с этим представляет интерес исследование мочевой экскреции RANTES как маркера подобных почечных изменений при манифестном гипотиреозе.

Содержание RANTES в моче пациентов с ХАИТ и здоровых людей статистически значимо не различались: 5,9 (2,7; 6,5) vs 4,15 (2,47; 5,1) пг/мл (pU=0,61). Подобные результаты были получены и при сравнении пациентов с ПГ и группы контроля: 5,3 (3,8; 6,5) vs 4,15 (2,47; 5,1) пг/мл (pU=0,16). Полученные результаты косвенно подтверждают отсутствие у обследованных пациентов выраженных почечных изменений.

Наиболее значимые различия были получены по уровню мочевой экскреции MCP-1: в группе пациентов с ХАИТ в сравнении с контролем: 167 (92,3; 224,6) vs 79,0 (63,4; 100,0) пг/мл (рU=0,004), в группе пациентов с ПГ — 117,7 (91,2; 144,1) vs 79,0 (63,4; 100,0) пг/мл (рU=0,001). Повышение содержания MCP-1 в моче, наиболее выраженное у пациентов с ХАИТ, может быть обусловлено гиперпродукцией IL-6 (у пациентов с ХАИТ выявлено значимое повышение провоспалительного цитокина IL-6: 19,2 (8,8; 24,6), pU=0,003). Повышение IL-6 коррелировало с высоким титром АТ к ТПО при ХАИТ, что связано с влиянием IL-6 на дифференцировку В-клеток, участие в процессе созревания В-лимфоцитов в антителопродуцирующие клетки.

Традиционная терапия хронического аутоиммунного тиреоидита не несет патогенетической направленности, не предполагает профилактику развития гипотиреоза, оказывает симптоматическое воздействие, снижая интенсивность проявлений соматической патологии. Это предопределяет разработку дополнительных методов лечения, воздействующих на основные звенья патогенеза хронического аутоиммунного тиреоидита, то есть активно и избирательно влияющих на иммунную и эндокринную системы, восстанавливающих нормальное течение метаболических процессов, функцию и структуру щитовидной железы.

Выводы

1)У пациентов с хроническим аутоиммунным тиреоидитом выявлена несбалансированная гиперцитокинемия с увеличением уровня как провоспалительных (IL-6, IL-8), так и противовоспалительных (IL-10) цитокинов. Выявлена прямая зависимость степени нарушений в гуморальном звене иммунитета и дисбаланса в цитокиновом статусе. При хроническом аутоиммунном тиреоидите дополнительно к оценке гормонального статуса диагностическое значение имеет определение IL-6, IL-8, IL-10 для оценки эффективности заместительной терапии.

      1. Установлена прямая корреляционная зависимость между повышением сывороточного уровня VEGF с уровнем тиреотропного гормона, что подтверждается данными литературы.

      1. В группе пациентов с аутоиммунным гипотиреозом по сравнению с группой здоровых лиц выявлено статистически значимое повышение уровня мочевой экскреции MCP-1.

      2. Установлена взаимосвязь между гиперпродукцией провоспалительных цитокинов IL-6, IL-8, MCP-1 и нарушением показателей почечной функции с наибольшей степенью выраженности у пациентов с аутоиммунным тиреоидитом.

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление