Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2013, № 1

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 1'2013

Изменения популяции тучных клеток тимуса после акцидентальной трансформации

В.В. Гусельникова, А.В. Полевщиков

Целью исследования было гистохимическое изучение различных аспектов генеза тучных клеток (ТК) в постнатальном тимусе мыши в условиях восстановления органа после акцидентальной трансформации. Использованная методика двойного окрашивания альциановым синим–сафранином позволила одновременно выявить в тимусе подопытных животных четыре стадии созревания ТК, различающихся по степени сульфатированности гепарина в составе их гранул. ТК стадии I характеризуются наличием гранул, окрашенных в синий цвет вследствие родства их компонентов исключительно к альциановому синему (Alc+ гранулы). Среди гранул ТК стадии II более половины составляют Alc+ гранулы, но присутствуют и окрашенные сафранином в красный цвет Saf+ гранулы. Все ТК стадии III характеризуются преобладанием в цитоплазме Saf+ гранул и содержат единичные Alc+ гранулы. ТК стадии IV характеризуются наличием исключительно Saf+ гранул. Особенности локализации тимических ТК разной степени зрелости дают основание предполагать существование определенной пространственной направленности процесса дифференцировки тучных клеток в тимусе, их появления и начала созревания в мозговом веществе, на кортикально-медуллярной границе и в глубоком корковом веществе с последующим перемещением (по мере созревания ТК) в сторону капсулы. Показанная принципиальная возможность дифференцировки ТК в постнатальном тимусе может быть значимой в рамках гипотезы тимического происхождения ТК, согласно которой именно тимус является главным органом мастоцитопоэза у взрослых животных. (Цитокины и воспаление. 2013. Т. 12. № 1–2. С. 125–130.)

Ключевые слова: тучные клетки, тимус, дифференцировка, гистохимия, альциановый синий, сафранин.

Многолетние исследования проблемы происхождения тучных клеток (ТК), играющих ключевую роль в формировании очага воспаления как при инфекционном, так и при аллергическом процессе, не привели к однозначному решению вопроса о природе ТК и закономерностях их гистогенеза [1]. Тем не менее, большинство исследователей склоняется к мнению, что источником развития ТК является костно-мозговая плюрипотентная гемопоэтическая стволовая клетка [13]. Считается, что коммитированные предшественники ТК, формирующие самостоятельную ветвь дифференцировки непосредственно от стволовой клетки крови, выходят из костного мозга в кровоток и заселяют различные ткани, где под влиянием локальных факторов микроокружения приобретают конечный фенотип [5, 10]. Однако результаты многочисленных экспериментов по идентификации предшественников ТК остаются неоднозначными и не дают окончательного ответа на вопрос об исходной клеточной форме данной линии дифференцировки [1]. Это обстоятельство привело к тому, что на сегодняшний день изучение вопросов гистогенеза ТК сводится к попыткам идентификации предшественника ТК с помощью широкой панели моноклональных антител против их поверхностных маркеров [4, 11]. При этом работы по изучению именно генеза и созревания ТК в тканях единичны и, как правило, связаны с исследованием эмбриональных органов, в то время как процесс дифференцировки данных клеток в постэмбриональном онтогенезе детально не описан [6, 8]. В связи с этим целью данного исследования стало гистохимическое изучение различных аспектов гистогенеза ТК в постнатальном тимусе мыши в условиях восстановления органа после акцидентальной трансформации.

Материалы и методы

В работе использованы нелинейные мыши (самцы и самки), содержавшиеся в условиях вивария НИИИЭМ СЗО РАМН при комнатной температуре и нормальной освещенности на стандартном рационе и питьевом режиме в соответствии с установленными санитарными нормами. Эксперименты проводили на половозрелых животных возрастом 1-2 мес. Контролем служили интактные мыши той же возрастной группы.Для индукции акцидентальной трансформации тимусамышам опытной группы однократно внутрибрюшинно вводили 2,5 мг гидрокортизона (Gedeon Richter, Венгрия). Через 48 часов после инъекции от подопытных и интактных животных после цервикальной дислокации получали тимус, фиксировали его в течение 1 часа смесью Карнуа (6 частей 100 º этанола : 3 части хлороформа : 1 часть ледяной уксусной кислоты), дважды промывали в 96 º этаноле, выдерживали в двух сменах 100 º этанола и переносили в смесь 2 %-го целлоидина с касторовым маслом (1:1) на 24 часа, после чего обезвоживали и заливали в парафин по стандартной методике. Срезы толщиной 5 мкм окрашивали 0,1 % раствором толуидинового синего на 30 ° этаноле (5 минут) и раствором альцианового синего–сафранина, приготовленного на Уолполовском буфере рН 1,42 (30 минут) с последующей докраской ядер гематоксилином Майера (30 с). Срезы обезвоживали в спиртах возрастающей концентрации, просветляли в двух сменах ксилола и заключали в даммарлак (Ferak, German). Полученные препараты анализировали с помощью светового микроскопа Leica DM 6000B в режиме BattleField и фотографировали с помощью фотокамеры Leica DFC при объективе ×100 с использованием иммерсионного масла.

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление