Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2013, № 4

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 4'2013

Особенности внутриклеточных защитных механизмов при действии на организм различных ксенобиотиков

Н.Н. Михайлова, Т.Г. Сазонтова, Д.А. Алёхина, А.С. Казицкая, Н.Н. Жданова, Ю.А. Прокопьев, А.Г. Жукова

В эксперименте на крысах была изучена взаимосвязь между уровнями защитных белков HIF-1α, HSP72, НОх-1, НОх-2; про- и противовоспалительных цитокинов; активностью свободнорадикальных процессов в динамике действия на организм производственных ксенобиотиков (неорганических соединений фтора и угольно-породной пыли). Показано, что активация синтеза защитных белков на ранних сроках флюороза и антракосиликоза играет сигнальную роль в запуске иммунного ответа, который имеет специфический характер в зависимости от типа ксенобиотика. (Цитокины и воспаление. 2013. Т. 12. № 4. С. 71–75.)

Ключевые слова: ксенобиотики, HIF-1α , белки семейства HSP, цитокины, свободнорадикальное окисление.

Промышленные ксенобиотики являются ведущими факторами риска развития профессиональных заболеваний трудоспособного населения, потому изучение их влияния на организм является актуальной медико-социальной задачей. Так например, у работников алюминиевого производства при длительном контакте с неорганическими соединениями фтора развивается профессиональное заболевание флюороз (ФР), а у шахтеров вдыхание угольно-породной пыли (УПП) приводит к развитию антракосиликоза (АС). В литературе достаточно широко представлен патогенез этих заболеваний [6, 7, 10, 11]. Данные о ранних метаболических изменениях немногочисленны и, порой, противоречивы, но именно они важны для своевременной профилактики и послесменной реабилитации. Результаты исследований внутриклеточных защитных механизмов от негативного воздействия указанных ксенобиотиков в отечественной литературе практически отсутствуют.

Воспалительные процессы, развивающиеся в организме при ФР или АС, указывают на образование и участие токсичных активных форм кислорода (АФК), вызывающих дисбаланс обменных процессов и приводящих к патологическим изменениям в органах и тканях [2–5]. Известно, что в физиологических условиях АФК играют важную роль в таких клеточных процессах, как передача сигнала, экспрессия генов, воспаление, апоптоз и др. Так, АФК участвуют в регуляции иммунных реакций через индукцию синтеза про- и противовоспалительных цитокинов. При этом регуляторное взаимодействие АФК и цитокинов может осуществляться, как предполагают в последние годы, через клеточные сигнальные пути, в частности, экспрессию генов, опосредованную ядерными факторами транскрипции [9]. К настоящему времени выявлено более 20 факторов транскрипции, отвечающих на изменение баланса АФК и защитных белков в клетках. Так, например, активация фактора транскрипции HIF-1α (hypoxia inducible factor) в клетках животных и человека приводит к изменению экспрессии более 90 генов и синтезу многочисленных белков с защитной функцией, активность которых способствует адаптации и выживаемости организма в неблагоприятных условиях [8]. Среди белков, регулируемых АФК и HIF-1α, особое внимание исследователей привлекают белки семейства HSP (heat shock proteins), поскольку они сами могут выступать в качестве сигнальных молекул и обладают иммуномодуляторными свойствами [1, 12].

Взаимосвязь между свободнорадикальными процессами, защитными белками и цитокинами при длительном воздействии на организм различных ксенобиотиков практически не изучена. Поэтому целью данной работы явилось экспериментальное изучение особенностей такого взаимодействия, на основе изменения уровня HIF-1α, белков семейства HSP, про- и противовоспалительных цитокинов в динамике развития ФР и АС, т. е. в зависимости от типа ксенобиотика на организм.

Материалы и методы

Эксперименты были проведены на взрослых белых лабораторных крысах-самцах массой 200–250 г, выращенных в стандартных условиях вивария при свободном доступе к пище и воде, а также естественном чередовании суточной освещенности. Содержание животных и эксперименты проводили в соответствии с международными правилами «Guide for the Care and Use of Laboratory Animals».

Особенности взаимодействия свободнорадикальных процессов, защитных белков и цитокинов изучали на двух экспериментальных моделях: 1) фтористая интоксикация (раствор фтористого натрия концентрацией 10 мг/л в свободном доступе в течение трех недель); 2) затравка крыс УПП в ингаляционно-затравочной камере (уголь марки газово-жирный, средняя концентрация УПП — 50 мг/м3, по 4 часа ежедневно в течение трех недель). Забор биологического материала (кровь из хвостовой вены и ткань печени) осуществляли на третьи сутки, через 1 и 3 недели затравки ксенобиотиками.

Уровень цитокинов TNFα, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-4, IL-10 в крови определяли иммуноферментным методом на анализаторе «Multiskan EX» с помощью наборов ЗАО «Вектор-Бест» (п. Кольцово Новосибирской обл.).

Уровни HIF-1α, белков семейства HSP (HSP72, HSC73) и гем-оксигеназы-1 и -2 (НОх-1, НОх-2) в ткани печени определяли методом Western-блот с использованием 8–10 % полиакриламидного геля и переносом на PVDF-мембрану, с первыми специфическими моноклональными антителами («Stressgen», Canada), вторыми антителами с пероксидазной меткой («Jackson Immuno Research») и хемилюминесцентной детекцией. Кроме того, в ткани печени оценивали устойчивость мембранных структур к свободнорадикальному окислению, индуцированному in vitro системой с 0,2 мМ аскорбатом. Уровень свободнорадикальных продуктов определяли по реакции с 2-тиобарбитуровой кислотой по классическому методу Ohkawa H. и др. в модификации Kikugawa K. и др [13, 15].

Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью пакета программ Statistica 6.0. Для сравнения независимых выборок использовали непараметрический U-тест Манна — Уитни. Различия между выборками считались достоверными при р≤0,05. Результаты эксперимента в таблицах и на рисунке представлены в виде медианы.

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление