Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2014, № 3

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Краткие сообщения

Номер 3'2014

Исследование фиксации аутоантител в коже больных вульгарной пузырчаткой при изолированном поражении слизистой оболочки полости рта

А.А. Кубанов, О.Р. Катунина, Т.В. Абрамова

Вульгарная пузырчаткааутоиммунное буллезное заболевание, проявляющееся образованием эрозий и пузырей на коже и/или слизистых оболочках. Установлено, что основными структурами, к которым вырабатываются аутоантитела при вульгарной пузырчатке, являются белки десмосомального аппарата (десмоглеины 1 и 3, десмоколлины, молекулы адгезии кадгеринового типа и др.). Аутоантитела обладают высокой тканевой специфичностью и относятся к классу иммуноглобулинов IgG [3]. Первые клинические проявления при вульгарной пузырчатке, в большинстве случаев, возникают на слизистой оболочке полости рта, и в ряде случаев остаются единственным симптомом заболевания [2].

Ввиду того, что эрозивно-язвенные и пузырные высыпания на слизистой оболочке полости рта могут наблюдаться при целом ряде заболеваний, ранняя диагностика вульгарной пузырчатки при изолированном поражении слизистой оболочки полости рта представляет серьезную проблему для дерматологов, стоматологов и других специалистов.

Одним из основных критериев диагностики вульгарной пузырчатки является обнаружение аутоантител (IgG), фиксированных в межклеточных промежутках эпидермиса в биоптатах кожи, методом реакции иммунофлуоресценции (РИФ) [1, 4].

Цель исследования состояла визучении фиксации аутоантител в коже больных вульгарной пузырчаткой при изолированном поражении слизистой оболочки полости рта.

Материалы и методы

Обследованы 56 больных с предварительным диагнозом вульгарная пузырчатка в возрасте от 18 до 76 лет (средний возраст — 54,22±17,6 года). У 34 (60,7 %) наблюдалось поражение кожи и слизистой оболочки полости рта, у 17 (30,4 %) больных — изолированное поражение слизистой оболочки полости рта, у 5 (8,9 %) — поражение только кожных покровов. У всех больных биопсийный материал был взят с участков видимо непораженной кожи. Контрольную группу составили 10 здоровых добровольцев. Группы больных и здоровых были сопоставимы по полу и возрасту.

Биоптаты заливали в среду для замораживания «Tissue-Tek» («Sakura», Нидерланды) и помещали в морозильную камеру при температуре -30 °С. После замораживания на криостатном микротоме изготавливали срезы толщиной 5–6 мкм, растягивали их на предметных стеклах с полилизиновым покрытием, высушивали при комнатной температуре 25 °С в течение 30 минут. Постановку непрямой РИФ осуществляли по следующей методике: после высыхания срезы фиксировали в ацетоне в течение 2-х минут, промывали в растворе фосфатного буфера (PBS-tween, рН 7,4±1) трижды по 7 минут. Для предотвращения эндогенной пероксидазной активности на срезы наносили 5 % раствор бычьего сывороточного альбумина (БСА-tween), инкубировали при комнатной температуре 25 °С в течение 60 минут. Затем, не смывая БСА, на срезы наносили антитела к IgG в рабочем разведении 1:300, инкубировали при комнатной температуре 25 °С в течение 60 минут, по истечении которых срезы промывали в растворе фосфатного буфера (PBS-tween, рН 7,4±1) трижды по 7 минут. После промывания на срезы наносили вторичные антитела, меченные флуорохромом, инкубировали при комнатной температуре 25 °С в течение 60 минут. Вторичные антитела отмывали также раствором фосфатного буфера (PBS-tween, рН 7,4±1) трижды по 7 минут. По окончании промывания срезы слегка подсушивали, заключали под покровное стекло в среду, содержащую DAPI, помещали в планшет-папку во избежание выцветания флуорохрома.

Полученные препараты анализировали на конфокальном лазерном сканирующем микроскопе «Olympus IX81S1F-S» (Германия) с использованием объективов ×60 и ×100.

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление