Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер
3 номер 4 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2015, № 1

Подписаться на 2018 год

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 1'2015

Влияние половых стероидных гормонов (тестостерона и β-эстрадиола) на продукцию про- и антивоспалительных цитокинов активированными Т-лимфоцитами разной степени дифференцировки

В.В. Шуплецова, О.Г. Хазиахматова, А.А. Гуцол, А.Г. Гончаров, Н.А. Сохоневич, К.А. Юрова, Л.С. Литвинова

В экспериментальных условиях in vitro установлено, что дозозависимое влияние половых стероидных гормонов (тестостерона и β-эстрадиола) на баланс продукции Th1/Th2 цитокинов Т-клетками носит разнонаправленный характер, имеет разную степень выраженности и определяется стадией их дифференцировки. На фоне CD2/CD3/CD28-активации тестостерон угнетал продукцию IL-2 и не влиял на секрецию противовоспалительных факторов (IL-4, IL-10) наивными (CD45RA+) Т-клетками. Действие β-эстрадиола на секрецию IL-2 и IL-10 наивными (CD45RA+) Т-клетками было дозозависимым и носило угнетающий характер. β-эстрадиол оказывал стимулирующее влияние на продукцию IFNγ наивными (CD45RA+) Т-клетками. На фоне CD2/CD3/CD28-активации примированных (CD45RО+) Т-клеток памяти β-эстрадиол, в большей степени, угнетал продукцию молекул Th1-ответа (IL-2, IFNγ). Выявлен стимулирующий эффект тестостерона на продукцию активированными (CD45RО+) Т-клетками основного противоспалительного фактора — IL-10. (Цитокины и воспаление. 2015. Т. 14. № 1. С. 57–62.)

Ключевые слова: тестостерон, эстрадиол, цитокины, стероидные гормоны, Т-клетки.

Регуляция иммунного ответа в ответ на агенты инфекционной и неинфекционной природы является сложным взаимодействием многих факторов. Исследования последнего десятилетия свидетельствуют о том, что наряду с глюкокортикоидами, половые гормоны являются одними из ключевых регуляторов иммунных реакций, участвуя в процессах созревания, дифференциации, активации и пролиферации лимфоидных клеток [1, 15, 19]. На сегодняшний день выявлены четкие гендерные различия в реализации иммунного ответа. Системная иммунная толерантность у представителей мужского пола эволюционно направлена на поддержание статуса «иммунной привилегии» органов репродуктивной системы [5, 13, 21]. Женщины, по сравнению с мужчинами, имеют сильный клеточно-опосредованный иммунный ответ и более высокую продукцию антител при антигенной стимуляции [5]. Появление многочисленных сведений о балансе между субпопуляциями Т-клеток Th1/Th2/Treg/Th17 привело к изучению эффектов половых стероидов на продукцию важнейших медиаторов, определяющих поляризацию иммунного ответа, — цитокинов. Вероятно, что действие половых стероидов на Т-клетки носит дозозависимый характер, определяется типом клеток-мишеней и их функциональным статусом (степенью дифференцировки, функциональной активностью, состоянием рецепторного аппарата клетки). Учитывая это обстоятельство, одни и те же гормоны могут проявлять разнонаправленные эффекты на «наивные» предшественники и «примированные» Т-клетки.

В связи с вышесказанным, целью нашего исследования явилась оценка влияния половых стероидных гормонов (тестостерона, β-эстрадиола) на продукцию цитокинов, определяющих Т-хелперную направленность иммунного ответа (IL-2, IFNγ, IL-4, IL-10) наивными (CD45RA+) и примированными (CD45RO+) Т-лимфоцитами на фоне антигеннезависимой активации.

Материалы и методы

Материалом исследования служила венозная кровь 48 условно здоровых доноров: 24 мужчин и 24 женщин в возрасте от 19 до 39 лет. Выделение мононуклеарной фракции крови осуществляли методом центрифугирования в градиенте плотности Ficoll-Urografin («Schering», Испания; «Pharmacia», Швеция) (ρ=1,077 г/см3). Популяции CD45RA+ и CD45RO+ Т-клеток получали методом иммуномагнитной сепарации с использованием технологии MACS («Miltenyi Biotec», Германия), согласно протоколу фирмы-производителя. Чистоту выделенных клеток определяли с помощью моноклональных антител, конъюгированных с флуоресцеинизотиоцианатом (FITC) или фикоэритрином (PE) («Abcam», Великобритания). Содержание целевых фракций CD45RA+- и CD45RO+-клеток в исследуемых образцах составляло не менее 95 %. Популяции CD45RA+ и CD45RO+ (1×106/мл) культивировали в 48-луночном планшете в среде Искова («Sigma», США), содержащей 5×10-5 M меркаптоэтанола («Acros Organics», США) и 30 мкг/мл гентамицина, в присутствии разных концентраций стероидных гормонов: тестостерона (Test) и β-эстрадиола (Est) («Sigma», США), в течение 48 ч при 37°С, во влажной атмосфере, содержащей 5 % СO2. Для активации Т-лимфоцитов использовали реагент T-Cell Activation/Expansion Kit, human (активатор CD2/CD3/CD28-, Ac/Exp) («Miltenyi Biotec», Германия), который представляет собой антибиотиновые частицы MACSiBeadтм, нагруженные биотинилированными антителами против CD2, CD3 и CD28. Реагент CD2/CD3/CD28-активатор добавляли в пробы в количестве 5 мкл, которые содержали 0,5×106 антибиотиновых частиц MACSiBeadтм. Соотношение клеток и активирующих частиц составляло 1:2.

Были использованы следующие варианты культивирования: 1) интактная проба; 2) проба с добавлением Ac/Exp; 3) пробы с добавлением Ac/Exp и Test (10-7 М; 10-6 М; 10-5 М); 5) пробы с добавлением Ac/Exp и Est (10-9 М; 10-8 М 10-7 М; 10-6 М; 10-5 М). Содержание цитокинов (IL-2, IL-4, IL-10, IFNγ) в культуральных супернатантах определяли иммуноферментным методом с использованием тест-систем, согласно протоколу фирмы-производителя («Вектор-Бест», Россия) на автоматическом иммуноферментном анализаторе «Lasurit» («Dynex Technologies», США). Статистическую обработку результатов проводили с помощью программы «IBM SPSS Statistics.20» (Statistical Package for the Social Sciences). Рассчитывали среднее арифметическое (М) и стандартное отклонение (σ). Достоверность различий оценивали с использованием критерия Вилкоксона для зависимых выборок. Различия считали достоверными при уровне значимости р<0,05.

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!


Начата подписка на 2018 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление