Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер
3 номер 4 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2015, № 1

Подписаться на 2018 год

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Врачу общей практики

Номер 1'2015

Провоспалительные цитокины эозинофилов при туберкулезе легких

Ю.В. Колобовникова, О.И. Уразова, В.В. Новицкий, О.В.Филинюк

Исследование цитокинсекреторной активности эозинофильных гранулоцитов крови (ЭГ) in vitro выполнено у 43 пациентов с туберкулезом легких (ТЛ), сопровождающимся эозинофилией и без нее. С применением иммуноферментного анализа в культуральных суспензиях ЭГ проведена оценка продукции провоспалительных цитокинов. Установлено, что при ТЛ в сочетании с эозинофилией ЭГ характеризуются высокой спонтанной секрецией IL-2 и TNFα. При добавлении в культуральную суспензию клеток in vitro вакцинного штамма BCG у больных ТЛ зарегистрировано достоверное увеличение секреции данных цитокинов. Полученные результаты свидетельствуют о высокой реактивности ЭГ, способных секретировать провоспалительные цитокины и вносить вклад в общий цитокиновый дисбаланс, формирующийся при ТЛ. (Цитокины и воспаление. 2015. Т. 14. № 1. С. 96–100.)

Ключевые слова: эозинофилы, цитокины, туберкулез легких.

В патогенезе воспалительных реакций макроорганизма при туберкулезе легких (ТЛ) эозинофильные гранулоциты реализуют эффекторные функции и проявляют регуляторную активность [8]. В экспериментах продемонстрирована антигенраспознающая функция эозинофилов: на мембране клеток идентифицированы паттерн-распознающие структуры типа TLR2 и комплекс γδTCR-CD3, связывающие небелковые антигенные детерминанты Mycobacterium tuberculosis [8, 13]. По данным Shi H., эозинофилы способны осуществлять процессинг и презентацию антигенов клеткам иммунной системы [15].

Наряду с этим, эозинофильные гранулоциты способны продуцировать широкий спектр цитокинов с про- и противовоспалительной активностью, а также ингибиторные факторы [9]. Особенностью цитокинсекреторной активности эозинофилов является способность клеток депонировать в гранулах некоторые факторы в виде преформированных медиаторов, что обусловливает возможность немедленного их высвобождения при получении активационного сигнала. Цитокинсекреторный потенциал эозинофилов определяет формирование взаимонаправленных эффектов, опосредованных иммуномодулирующим действием иммунокомпетентных клеток и способностью эозинофилов активировать (или дезактивировать) лимфоциты, направляя иммунный ответ по пути доминирования отдельных субпопуляций Th-лимфоцитов (Th1, Th2, Th9, Th17 или Treg).

Целью исследования явилась оценка секреции иммунорегуляторных цитокинов эозинофильными гранулоцитами in vitro у больных туберкулезом легких (ТЛ).

Материалы и методы

Под наблюдением находились 43 больных (27 мужчин и 16 женщин) с впервые выявленным распространенным деструктивным ТЛ (инфильтративным — ИТЛ, диссеминированным — ДТЛ) в возрасте от 18 до 55 лет. Диагноз устанавливали на основании клинической картины заболевания, рентгенологического исследования органов грудной клетки, данных микроскопического и бактериологического анализа мокроты.

В зависимости от абсолютного и относительного количества эозинофилов в периферической крови были сформированы две основные группы исследования: 1-ю группу составили 24 пациента с ТЛ, сопровождавшимся эозинофилией (абсолютное количество эозинофилов соответствовало (0,966±0,110)×109/л, относительное — (8,790±0,250) %); 2-ю группу — 19 больных ТЛ без эозинофилии (абсолютное число эозинофилов — (0,249±0,010)×109/л, относительное — (2,572±1,190) %).

Группу сравнения (контроль) составили 22 здоровых донора (абсолютное число эозинофилов — (0,196±0,010)×109/л, относительное — (3,530±1,300) %), сопоставимых по полу и возрасту.

Все исследования у больных ТЛ проводили до начала специфической противотуберкулезной терапии.

Материалом исследования служила венозная кровь. Исследования проводили на эозинофильных гранулоцитах, выделенных на прерывистом градиенте плотности перколла (ρ=1,133 г/мл) («Sigma Life Science», США) с последующей сепарацией клеток («MACS MultiStand», Германия) при добавлении CD16-MicroBeads («Miltenyi Biotec GmbH», Германия). При использовании данного протокола выделения клеток 97 % выделенных лейкоцитов составляли эозинофильные гранулоциты.

Для получения супернатантов выделенные эозинофилы ресуспендировали в полной питательной среде, состоящей из 90 % RPMI-1640, 10 % инактивированной эмбриональной телячьей сыворотки («Sigma», США), 0,3 мг/мл L-глутамина, 100 мкг/мл гентамицина. Стандартизировали количество клеток в суспензии до 2×106/мл. Для индукции цитокин-секреторной активности эозинофилов в пробы вносили вакцинный штамм BCG (живой аттенуированный штамм M. bovis) в дозе 50 мкг/мл (ФГУП «НПО Микроген»). Супернатанты культуральных суспензий использовали для количественного определения цитокинов с применением твердофазного иммуноферментного сэндвич-метода. Иммуноферментный анализ проводили по инструкциям производителей тест-систем («Biosource», США; «Протеиновый контур», Санкт-Петербург).

Результаты исследования обрабатывали с использованием стандартного пакета программ «Statistica 6.0». Проверку нормальности распределения количественных показателей проводили с помощью W-критерия Шапиро —Уилка. Поскольку все количественные признаки в группах сравнения не имели нормального распределения, для оценки достоверности различий выборок использовали U-критерий Манна — Уитни для независимых групп. С целью выявления функциональных взаимосвязей между группами изучаемых параметров применяли корреляционный анализ путем вычисления коэффициента ранговой корреляции Спирмена (r). Различие двух сравниваемых величин считали достоверным при уровне значимости р<0,05.

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!


Начата подписка на 2018 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление