Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2015, № 3

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 3'2015

Растворимые молекулы адгезии у детей с воспалительными заболеваниями кишечника

В.И. Ашкинази, М.Ю. Лебедев, Е.И. Руднева, Н.Ю. Широкова, Э.Н. Федулова, О.А. Тутина, Т.А. Кузнецова

Цель исследования: изучение в сыворотке крови детей с воспалительными заболеваниями кишечника (ВЗК) содержания растворимых форм молекул клеточной адгезии (sP-селектина, sPECAM-1) и их взаимосвязи с некоторыми маркерами воспаления. Материалы и методы: обследованы 194 пациента в возрасте от 6 до 17 лет, страдавших болезнью Крона (БК) и язвенным колитом (ЯК). Содержание sP-селектина и sPECAM-1, уровень цитокинов, неоптерина, маннан-связывающего лектина (МBL) и эластазы лейкоцитов оценивали при помощи иммуноферментного анализа. Кислородзависимый метаболизм изучали с использованием хемилюминесцентных реакций. Результаты: установлено, что содержание sP-селектина и sPECAM-1 у детей с ВЗК значимо выше, чем в контрольной группе, что может оказывать влияние на реализацию лейкоцитами своего эффекторного потенциала. Это согласовалось с морфометрическими исследованиями биоптатов слизистой оболочки кишечника, где наблюдались выраженные воспалительные изменения. Одновременно было отмечено усиление респираторного метаболизма нейтрофилов, повышение уровня неоптерина, МBL, эластазы лейкоцитов, фактора некроза опухоли альфа. Заключение: увеличение содержания sP-селектина и sPECAM-1 может быть одним из звеньев течения ЯК и БК, что подтверждается выявленными взаимосвязями с изученными индикаторами воспаления. (Цитокины и воспаление. 2015. Т. 14. № 3. С. 24–29.)

Ключевые слова: воспалительные заболевания кишечника, растворимые формы молекул адгезии, индикаторы воспаления.

Воспалительные заболевания кишечника (ВЗК), включающие в себя болезнь Крона (БК) и язвенный колит (ЯК), являются актуальной и во многом нерешенной проблемой детской гастроэнтерологии [5]. Патогенез ВЗК до настоящего времени до конца не ясен, однако известно, что воспаление протекает на фоне нарушений врожденного и адаптивного иммунитета и основывается на взаимодействии генетической предрасположенности и различных триггерных факторов (инфекционных, аллергических, пищевых, иммунологических), результатом чего является активация воспалительных процессов, протекающих в стенке кишечника, с вовлечением в них про- и противовоспалительных цитокинов, факторов роста, адгезии и т. д. [3, 13].

В очагах поражения слизистой оболочки пищеварительного тракта отмечается накопление активированных Т-лимфоцитов и макрофагов, что приводит к увеличению синтеза медиаторов, усиливающих воспаление. У пациентов с ЯК оно в большей мере развивается по Th2-пути, со стимуляцией продукции интерлейкинов (IL)-4, -5, -13, молекул межклеточной адгезии — intercellular adhesion molecule (ICAM)-1, ICAM-2 и т. д. Доминирующим типом иммунного ответа при болезни Крона считается Th1-опосредованный ответ, сопряженный с преимущественной продукцией интерферона гамма (IFNγ), IL-2, IL-12, IL-23 и фактора некроза опухолей альфа (TNFα) как основных провоспалительных цитокинов [10, 11, 13]. Одновременно, в результате активации моноцитов и макрофагов нарушается баланс цитокинов, склоняясь в сторону преобладания провоспалительных медиаторов преимущественно макрофагального происхождения (TNFα, IL-1, IL-6, IL-8 и др.).

Важную роль в реализации иммуноопосредованных этапов воспаления играют антигены адгезии, основная функция которых состоит в поддержании межклеточных взаимодействий (в том числе с компонентами межклеточного матрикса), миграции клеток в очаг воспаления, инициации иммунного ответа. Антигены адгезии обнаруживаются как в мембрано-связанной форме на поверхности клеток, так и в растворимой (s — soluble), в различных биологических жидкостях. Ведущий механизм иммуномодулирующего действия растворимых антигенов — это связывание лиганда и предотвращение его контактов с мембранной формой антигена, что может привести к блокаде взаимодействия двух клеток, препятствуя тем самым передаче сигнала от клетки к клетке и супрессии иммунного ответа [6].

И мембраносвязанные, и растворимые формы адгезивных молекул регулируют миграцию лейкоцитов из кровотока через эндотелий в зону тканевого повреждения, что имеет важное значение для развития воспаления. Этот процесс является многоэтапным и включает в себя роллинг (прокатывание) лейкоцитов по поверхности эндотелия с участием L-, Е- и Р-селектинов (первый этап), более тесный контакт клеток при участии интегринов (второй этап), прочную адгезию на эндотелии с вовлечением интегринов и молекул семейства иммуноглобулинов (третий этап) и перемещение (трансмиграцию) лейкоцитов с помощью иммуноглобулиноподобной молекулы РЕСАМ-1 (platelet-endothelial cell adhesion molecule) и других адгезионных молекул через межклеточные соединения эндотелиальных клеток сосудов в ткани, в очаги воспаления (четвертый этап).

Важнейшими индукторами экспрессии молекул клеточной адгезии являются свободные радикалы, компоненты комплемента, оксид азота, липополисахариды, провоспалительные цитокины (IL-1, IL-6, IL-8, TNFα, IFNγ и др.), лейкотриены, гистамин, тромбин и многие другие факторы [2, 7]. Количество адгезивных молекул определяет выраженность воспалительных реакций: повышенная экспрессия ассоциируется с экстравазацией лейкоцитов и активацией воспаления.

В настоящее время выполнено значительное количество исследований, касающихся содержания растворимых форм мембранных антигенов у пациентов с сердечно-сосудистыми, эндокринными, аутоиммунными, инфекционными, онкологическими и рядом других заболеваний. В то же время в детской гастроэнтерологии такие исследования представлены единичными публикациями. Сообщается об изучении уровня растворимых (soluble) молекул — sE-селектина, sL-селектина, sVCAM-1 и sICAM-1 у пациентов, страдавших ЯК и БК [8, 9]. Авторы считают, что для оценки воспалительного процесса у таких больных целесообразно использовать определение содержания только sE-селектина, поскольку концентрация других адгезивных молекул значимо не отличалась от показателей здоровых детей. Такие сведения, несомненно, представляют интерес, поскольку раскрывают новые аспекты течения ВЗК, количество которых неуклонно растет в последнее время и все чаще регистрируется уже в первые годы жизни ребенка [1].

Цель исследования — изучение в сыворотке крови детей с ВЗК содержания растворимых форм молекул клеточной адгезии, регулирующих начальный и заключительный этапы движения лейкоцитов вдоль сосудистого русла в очаг воспаления —sP-селектина и sPECAM-1, и их взаимосвязи с некоторыми маркерами воспаления.

Материалы и методы

Обследованы 194 пациента в возрасте 6–17 лет, страдавших ВЗК, в том числе: 87 детей с БК и 107 с ЯК. Диагноз ставили на основании комплексного обследования, включавшего в себя клинико-лабораторные данные, а также эндоскопическое исследование слизистой оболочки кишечника с морфологическим анализом биоптатов. У 42 пациентов с БК, согласно педиатрическому индексу активности БК — PСDAI (Pediatric Crohn’s Disease Activity Index), было зарегистрировано обострение заболевания, у 27 — клиническое улучшение, у 18 — клиническая ремиссия. У детей с ЯК на основании педиатрического индекса активности ЯК PUCAI (Pediatric Ulcerative Colitis Activity Index) в 55 случаях было отмечено обострение заболевания, в 41 — клиническое улучшение, в 11 — клиническая ремиссия. Полученные результаты исследований сравнивали с аналогичными показателями 20 условно здоровых детей того же возраста, которые составили контрольную группу.

Определение содержания молекул адгезии sP-селектина и sPECAM-1 в сыворотке крови проводили методом ELISA с использованием тест-систем «Bender Medsystems» (Австрия). Одновременно был изучен уровень цитокинов TNFα, IL-1β, IL-6, IL-8, IFNγ (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирская область). Содержание неоптерина определяли при помощи тест-системы «Neopterin ELISA» («IBL», Германия), концентрацию маннан-связывающего лектина (МBL) — с помощью «Human MBL ELISA» («Hycult biotech», Нидерланды), уровень эластазы полиморфнонуклеарных лейкоцитов — с помощью набора «PMN-Elastase» («Bender Medsystems», Австрия). Кислородзависимый метаболизм нейтрофилов исследовали на хемилюминометре «Luminoscan Ascent» («Thermo Scientific», Швеция). Для оценки морфологических изменений и направленности регенеративного процесса проводили морфометрическое исследование биоптатов слизистой оболочки кишечника, с выделением клеток стромы и инфильтрата.

Обработку полученных данных выполняли с помощью пакета прикладных программ «Statistica 6.0». Описательная статистика признака включала среднюю арифметическую (М), минимальное и максимальное значения, медиану (Ме) и интерквартильный размах [Q25–Q75]. При сравнении полученных результатов использовали тест Манна — Уитни. Взаимосвязи между признаками изучали методом корреляционного анализа Спирмена (R). Статистическими значимыми считали различия между показателями при р<0,05.

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление