Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2015, № 3

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 3'2015

Цитокинпродуцирующий потенциал клеток крови при инвазивном протоковом раке и фиброаденоматозе молочной железы

Т.А. Кунц, К.В. Карпухина, Е.С. Михайлова, Н.А. Вараксин,

Изучена цитокинпродуцирующая функция иммунокомпетентных клеток крови у пациентов с инвазивным протоковым раком (ИПР) и фиброаденомой молочной железы (ФАМ). Диагноз подтвержден патогистологическим и иммуногистохимическим исследованием биоптатов опухолей молочной железы. C помощью иммуноферментного анализа определяли уровни цитокинов и факторов роста в периферической крови. В группе пациентов с ИПР выявлены корреляционные связи между индексом влияния поликлональных активаторов (ИВПА) на продукцию IL-2 и числом митозов в поле зрения (r=0,338, p<0,050), между ИВПА на продукцию VEGF и количеством лимфоузлов с метастазами (r= -0,381, p<0,026) и между ИВПА на продукцию IL-18 и величиной маркера Her2-neu (r=0,338, p<0,050). Наблюдались достоверные различия по ИВПА на продукцию IL-18 у пациентов с ИПР и ФАМ. У пациентов с ИПР при наличии метастазов обнаружена выраженная супрессия продукции IL-18, вследствие чего снижалась выработка связанных с ним IL-6, G-CSF и VEGF. (Цитокины и воспаление. 2015. Т. 14. № 3. С. 47–52.)

Ключевые слова: цитокины, факторы роста, рак, фиброаденома молочной железы.

Согласно классификации ВОЗ опухоли молочной железы подразделяются на злокачественные, к которым относится инвазивный протоковый рак (ИПР), и доброкачественные, к которым относится фиброаденома [4]. Кроме того, существует такое понятие, как суспициозные опухоли (лат. suspicio — подозрительный), что является следствием наличия субъективных факторов диагностики опухолей молочной железы [2, 5]. Параканкрозное воспаление при ИПР отличается от воспаления при фиброаденоме молочной железы (ФАМ) клеточным составом. Основными клетками, инфильтрирующими злокачественную опухоль, являются иммунокомпетентные клетки, продуцирующие медиаторы воспаления, в том числе и цитокины, роль которых чрезвычайно важна в патогенезе злокачественных новообразований [3, 8]. Целью настоящего исследования явилось изучение цитокинпродуцирующего потенциала иммунокомпетентных клеток крови при ИПР и ФАМ у женщин.

Материалы и методы

Материалом исследования служила периферическая кровь 45 пациентов, из которых у 29 еще до операции был диагностирован инвазивный протоковый рак (ИПР), по гистологическому типу представляющий карциному. У 7 женщин не был выставлен окончательный диагноз, поэтому они были отнесены к пациентам с суспициозными опухолями. У 15 пациентов была выявлена ФАМ. После операции, на основании патогистологических исследований, часть женщин с предварительно поставленным диагнозом suspicio на наличие злокачественных новообразований были отнесены к группе больных с ИПР (5 человек), а остальные – к пациентам с ФАМ. Окончательно, с учетом результатов патоморфологических исследований, группу больных с ИПР составили 34 женщины в возрасте от 42 до 77 лет, а группу пациентов с ФАМ — 17 человек в возрасте от 21 до 59 лет. Пациенты, в крови которых проводили определение цитокинпродуцирующей функции иммунокомпетентных клеток, не имели обострения инфекционно-воспалительных и неинфекционных заболеваний.

Для оценки цитокинпродуцирующей функции клеток крови при воздействии на них комплекса поликлональных активаторов, состоящего из фитогемагглютинина в концентрации 4 мкг/мл, конканавалина А в концентрации 4 мкг/мл и липополисахарида в концентрации 2 мкг/мл, использовали стандартизованный набор реагентов «Цитокин-стимул-бест» производства ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирская область). В полученных супернатантах клеток крови методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием наборов реагентов производства ЗАО «Вектор-Бест» определяли уровни цитокинов, которые участвуют как в воспалении, так и в канцерогенезе: IL-2, IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, IL-18, IL-1β, IL-1Ra, TNFα, IFNγ, G-CSF (гранулоцитарный колониестимулирующий фактор), GM-CSF (гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор), VEGF (фактор роста эндотелия сосудов), MCP-1 (моноцитарный хемотаксический протеин-1). Определяли индекс влияния поликлональных активаторов (ИВПА) на продукцию цитокинов клетками крови, который высчитывали по формуле: ИВПА=А/Б, где А — уровень стимулированной поликлональными активаторами продукции цитокина, Б — уровень спонтанной продукции цитокина.

Патогистологическое исследование биоптатов удаленных опухолей проводили на препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином по стандартной методике. Патогистологическую картину ИПР молочной железы характеризовали по следующим признакам, которым была дана балльная оценка:

  • наличие или отсутствие сосудов с опухолевыми эмболами: отсутствие — 1 балл, единичные сосуды — 2 балла, много сосудов — 3 балла. При верификации опухолевых клеток учитывали следующие морфологические критерии: размер клетки, форма ядра, структура хроматина, цитоплазмы, ядерно-цитоплазматическое соотношение, наличие митозов, в том числе патологических, наличие клеточного полиморфизма и т. п.;

  • митозы в поле зрения: отсутствуют — 1 балл, 1–3 — 2 балла, 3–5 митозов — 3 балла, 6 и более митозов — 4 балла, оцениваемые в 10 полях зрения;

  • патологические митозы в поле зрения: отсутствуют — 1 балл, 1–3 митоза — 2 балла, 4 и более патологических митозов — 3 балла, оцениваемые в 10 полях зрения;

  • % клеточных элементов различной степени дифференцировки: высокодифференцированные (ВД), умереннодифференцированные (УД) и низкодифференцированные (НД) в опухолевой ткани. Для этого с помощью морфометрической сетки с 121 рабочими точками-узлами, вставленной в окуляр микроскопа, при увеличении 20×1,5×10 = ×300 методом случайного наложения сетки на опухолевую ткань определяли количество точек, попавших на ВД, УД и НД опухолевые клетки. В каждом случае подсчитывали 10 полей зрения и для каждой категории клеток подсчитывали среднее арифметическое значение, выраженное в процентах [1]. При оценке принадлежности опухолевых клеток к ВД, УД или НД элементам учитывали степень выраженности клеточного полиморфизма, ядерно-цитоплазматическое соотношение, наличие митозов, в том числе патологических, способность к структурообразованию (формированию желез), сохранение функций клеток. ВД клетки характеризовались приближенной к нормальным клеткам формой, преобладанием цитоплазмы над ядром, способностью строить железы и продуцировать слизь, НД клетки характеризовались неправильной формой, выраженным полиморфизмом, преобладанием ядра над цитоплазмой, отсутствием способности к формированию структур, диффузным ростом, наличием большого количества митозов, в том числе и патологических. УД клетки занимали промежуточное положение между ВД и НД клетками по выраженности вышеуказанных признаков;

  • степень васкуляризации: слабая (сосуды занимают 1/3 поля зрения) — 1 балл, умеренная (сосуды занимают 1/2 поля зрения) — 2, выраженная (сосуды занимают не менее 2/3 поля зрения) — 3 балла, оцениваемая в 10 полях зрения [6];

  • злокачественность: 1-я степень — 1 балл, 2-я степень — 2, 3-я степень — 3 балла;

  • количество регионарных лимфоузлов, пораженных метастазами: нет — 1 балл, один — 2, два — 3, три — 4 балла и т. д.

Балльная оценка патогистологической картины позволила выявить корреляционные связи между цитокинпродуцирующей функцией клеток организма и патогистологическими параметрами опухолей.

Кроме того, у больных с ИПР иммуногистохимическими методами определяли величины следующих маркеров опухолей: эстрогенового рецептора (ER), прогестеронового рецептора (PR), рецептора эпидермального фактора роста (Her2-neu) и маркера пролиферации Ki67.

Статистическую обработку данных выполняли с использованием критерия Крускала — Уоллиса с последующим анализом по критерию Данна. Показатели выражены в виде медиан Me, нижнего и верхнего квартилей (Q1; Q3). Расчитывали коэффициент ранговой корреляции Спирмена (r).

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление