Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2015, № 4

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 4'2015

Роль генов цитокинов в развитии красного плоского лишая слизистой оболочки рта

Г.М. Акмалова, С.В. Чуйкин, Г.И. Ронь, И.Р. Гилязова, Н.Д. Чернышева, Э.С. Галимова, Э.К. Хуснутдинова

С целью выявления ассоциации полиморфных вариантов генов цитокинов (rs2430561 гена IFNG, rs7747909 гена IL17A, rs187238 гена IL18) с развитием красного плоского лишая слизистой оболочки рта (КПЛ СОР) и возникновением рецидивов заболевания проведена ПЦР в режиме реального времени в группах больных (n=93) и здоровых индивидов (n=163), русских по этнической принадлежности, проживающих в Волго-Уральском регионе России. Обнаружено, что аллель полиморфного локуса rs2430561 гена IFNG ассоциированс развитием заболевания (OR=1,18). Выявлено, что генотип rs2430561*A/A является генетическим маркером повышенного риска развития тяжелой экссудативно-гиперемической формы КПЛ СОР (OR=4,49). Показано, что с увеличением дозы аллеля rs2430561*T риск развития рецидивов КПЛ СОР понижается (OR=0,56). Обнаружено, что полиморфный локус rs187238 гена IL18 ассоциирован с риском развития КПЛ СОР и его рецидивов в рецессивной модели. Результаты, полученные в исследовании, подтверждают вклад генов цитокинов в развитие КПЛ СОР. (Цитокины и воспаление. 2015. Т. 14. № 4. С. 17–23.)

Ключевые слова: красный плоский лишай слизистой оболочки рта (КПЛ СОР), ассоциация, полиморфизм, аллель, генотип, гены цитокинов, маркеры предрасположенности, рецидив.

Красный плоский лишай (КПЛ) является распространенным хроническим воспалительным заболеванием, поражающим покровные ткани и клинически проявляющимся на коже и слизистых оболочках. Заболевание было впервые описано британским врачом Эрасмусом Вильсоном в 1869 г. Болезнь чаще встречается у женщин, средний возраст начала заболевания составляет 40 лет. В настоящее время отмечается тенденция к омоложению заболевания, в последние годы КПЛ стали диагностировать и у детей [14].

КПЛ слизистой оболочки рта (КПЛ СОР) является одной из наиболее важных проблем клинической дерматологии и стоматологии, что связано с наличием тяжело протекающих форм заболевания, хроническим течением, трудностями диагностики атипичных клинических форм, низкой эффективностью применяемой терапии [3]. В общей структуре дерматологической заболеваемости КПЛ составляет от 1,5 до 2,4 %, среди болезней слизистой оболочки полости рта — около 35% [1, 2].

В этиологии КПЛ до сих пор остается много неясных вопросов. Развитие КПЛ, как и других многофакторных заболеваний, определяется сложным сочетанием генетических факторов и неблагоприятных факторов окружающей среды. Молекулярно-генетические исследования красного плоского лишая немногочисленны, но уже доказано, что в этиопатогенезе заболевания участвуют множество функционально взаимосвязанных генов [8, 5, 21].

В настоящее время считается, что основная роль в развитии КПЛ СОР принадлежит иммунным факторам, обусловленным нарушением клеточного и гуморального звеньев иммунитета, а также изменением функционального состояния регуляторных механизмов иммунной системы, контролирующих реакцию организма на антиген на молекулярном, клеточном, тканевом и органном уровнях [19].

Известно, что в патогенезе КПЛ важную роль играет Т-клеточно-опосредованный иммунитет, вызывая повреждение базальных кератиноцитов в слизистой оболочке полости рта. Важное значение для развития и функционирования врожденного и адаптивного иммунного ответа имеют цитокины — сигнальные белки, продуцируемые различными типами клеток. Цитокины представляют собой группу полипептидных медиаторов, участвующих в формировании и регуляции защитных реакций организма. Сложные сети цитокинов динамически взаимодействуют между собой, гомеостатически регулируя иммунную реакцию и другие биологические пути, поэтому предполагают, что различия в уровне цитокинов коррелируют с восприимчивостью и развитием КПЛ [13].

Мы не встретили ни одной работы российских исследователей, посвященной изучению молекулярно-генетических основ КПЛ СОР как в целом, так и роли генов цитокинов в его развитии, в частности. Учитывая то, что генетические факторы, вызывающие дисбаланс продуцирования провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, а также дисбаланс в системе Th1/Th2 иммунного ответа являются важными в формировании предрасположенности к КПЛ, целью настоящего исследования было изучение ассоциаций ряда полиморфных вариантов генов цитокинов (rs2430561 (IFNG), rs7747909 (IL17A), rs187238(IL18)) с риском развития КПЛ СОР и возникновением рецидивов заболевания у русских из Волго-Уральского региона России.

Материалы и методы

Исследование было проведено на базе лаборатории молекулярной генетики человека ИБГ УНЦ РАН (Уфа). В работе использовали образцы ДНК 93 неродственных индивидов, больных КПЛ, в возрасте от 32 до 78 лет (средний возраст — 54±1,4 года), проживающих в Волго-Уральском регионе России. Все обследованные — женщины русской этнической принадлежности, пациентки стоматологической клиники Уральского государственного медицинского университета и стоматологической поликлиники Башкирского государственного медицинского университета. Диагноз установлен на основании данных клинического, общелабораторного и дополнительных методов исследования. Контрольная группа состояла из 163 практически здоровых лиц, сопоставимых по полу, возрасту и этнической принадлежности с больными и не имевших отягощенной наследственности по изучаемому заболеванию. В зависимости от формы заболевания пациенты были разделены на 3 группы: пациенты с типичной формой (24 человека), эрозивно-язвенной (43 человека), экссудативно-гиперемической (25 человек). Учитывая то, что заболевание характеризуется наличием тяжело протекающих клинических форм, длительностью течения и рецидивами, исследуемую группу больных разделили на 2 подгруппы: с наличием рецидивов и их отсутствием.

Для исследования применяли стандартные методы молекулярно-генетического анализа. ДНК выделяли из лимфоцитов периферической крови методом депротеинизации смесью фенола и хлороформа. Генотипирование изученных полиморфных локусов проводили с помощью ПЦР в режиме реального времени с использованием конкурирующих TaqMan-зондов на приборе CFX 96™ Real-TimeCycler («Bio-Rad», США). ПЦР синтеза ДНК проводили в 10 мкл общего объема смеси, содержавшей 2 мкл универсального буфера (670мМTris-HCl (pH 8,8); 0,1 % Tween-20, 2мМdNTPs, 10мМпраймеров, 5мМ зондов), 0,2 мклTaq-полимеразы и 30 нг геномной ДНК в следующих условиях: начальная денатурация 2 мин при 95 °С; затем 40 циклов, включавших денатурацию при 94°С — 10 с, отжиг праймеров и последующую элонгацию при 60°С — 1 мин (каждый шаг сопровождался регистрацией флуоресцентного сигнала в диапазонах, соответствующих интервалам флуоресценции флуорофоров). О наличии того или иного аллеля полиморфного локуса судили по росту флуоресценции соответствующих красителей FAM и VIC.

Статистическую обработку результатов проводили в программе «BIOSTAT» (Primer of Biostatistics version 4.03) [4]. Вычисляли средние величины количественных показателей и их стандартные ошибки (M ± m). Соответствие распределения частот генотипов равновесию Харди — Вайнберга (χ2) определяли в программе «Hardy-Weinberg equilibrium calculator» [16]. Анализ ассоциации проводили с использованием расчета показателя отношения шансов (OR). При всех использованных методах анализа статистически значимыми считали различия при р<0,05. Для выявления ассоциации полиморфных локусов в различных моделях (аддитивной, доминантной, рецессивной, модели сверхдоминирования) использовали метод логистической регрессии. Гипотезу о значимости независимых факторов проверяли на основе коэффициента t-статистики и уровня значимости (рvalue) для коэффициента t. Экспоненту отдельного коэффициента регрессии (β) интерпретировали как OR для логистической модели с расчетом 95%-го доверительного интервала (95%CI). Лучшую модель выбирали с использованием информационного критерия Акайке (AIC). Для каждого локуса, показавшего статистически значимые различия с контролем (рadj<0,05), выбирали модели с наименьшим значением AIC.

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья


Начата подписка на 2016 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление