Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер
3 номер 4 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2016, № 3

Подписаться на 2018 год

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 3'2016

Эффекты краткого и пролонгированного курса локальной цитокинотерапии интерлейкином 2 в спонтанной мышиной модели рака молочной железы

С.Г. Семушина, Д.А. Аронов, Е.В. Моисеева

Ранее мы разработали новые подходы для оценки эффективности интерлейкина 2 (IL-2) в спонтанной мышиной модели BLRB/BYRB рака молочной железы (РМЖ), используя принцип «каждая мышь — пациент», и показали, что эффективность локального применения IL-2 зависит как от параметров опухолевого роста и от характеристик опухоленосителя, так и от времени применения IL-2. Цель данной работы: сравнить эффективность краткого и пролонгированного курсов локальной IL-2 терапии в модели BLRB/BYRB, стандартизированной по возрасту и начальному размеру опухоли. Самки в возрасте 15 месяцев с опухолями диаметром 4–6 мм были разделены на группы: однократное, трехкратное пролонгированное применение IL-2 и контроль. Индивидуально оценивали динамику роста опухоли и продолжительность жизни реципиентов от момента применения цитокинотерапии. Результаты. Замедление роста опухоли в среднем по группе по сравнению с контролем наблюдали в обеих экспериментальных группах. Краткий курс IL-2 привел к достоверному увеличению продолжительности жизни в среднем по группе, а пролонгированный курс вызвал отторжение опухоли у двух самок при сокращении средней продолжительности жизни остальных самок этой группы. Заключение. Для того, чтобы выбрать более успешный режим цитокинотерапии IL-2 при спонтанном РМЖ, необходимо ответить на вопрос, что важнее: улучшить выживание в среднем по группе (краткий курс) или полностью излечить отдельных пациентов, рискуя ухудшить выживание остальных (пролонгированный курс). (Цитокины и воспаление. 2016. Т. 15. № 3–4. С. 275–279.)

Ключевые слова: рак молочной железы, интерлейкин 2, иммунотерапия, спонтанная мышиная модель.

Интерлейкин 2 (IL-2) — широко известный цитокин, эффективность применения которого в онкологической практике с целью отторжения опухоли изучается уже более трех десятилетий [5]. Двойственная роль IL-2 как основного регулятора иммунных реакций, способствующего развитию либо толерантности, либо противоопухолевого иммунитета, добавляет сложности к применению обширных базовых знаний об этом цитокине с целью получения реальной клинической пользы для онкологических пациентов. Успешность/неуспешность цитокинотерапии IL-2 для конкретного пациента является результатом тонкого баланса во взаимодействии различных клеточных популяций иммунной системы в результате применения экзогенного IL-2 [8, 10].

Системная высокодозовая иммунотерапия IL-2, разработанная группой С.А. Розенберга, рекомендована РФ и США при меланоме и раке почки [3]. Локальная низкодозовая иммунотерапия IL-2 была разработана группой В. Ден Оттера на животных моделях с целью уменьшить системную токсичность терапии при сохранении ее эффективности. Этим авторам удалось доказать, что эффективность локальной иммунотерапии IL-2 (особенно интратуморальной) выше, чем системной, при лечении целого ряда онкологических заболеваний как в ветеринарной, так и в медицинской практике [4]. Ввиду противоречивых терапевтических эффектов при раке молочной железы (РМЖ) как в эксперименте, так и в клинике, IL-2 для лечения РМЖ применяют реже, поэтому разработка стратегии усиления эффективности IL-2 при РМЖ являются актуальной задачей [2, 6, 10]. Раннее мы показали, что мышиная модель естественно возникающего (спонтанного) РМЖ воспроизводит патоморфологические и иммунологические характеристики заболевания человека [7]. Модель спонтанного РМЖ обладает целым рядом очевидных преимуществ по сравнению с общепринятыми перевиваемыми моделями, поскольку последние не воспроизводят в полной мере все особенности патогенеза злокачественного новообразования как многофакторного онкологического заболевания человека [7, 11]. Однако, для спонтанной модели характерны ограничение по размеру выборки и выраженная гетерогенность популяции самок-опухоленосителей по целому ряду показателей, таких как возраст, гормональный статус, вес, изначальный размер опухоли на момент постановки диагноза, патоморфологический тип опухоли и пр. Ранее мы разработали новые критерии для оценки эффективности цитокинотерапии IL-2 в спонтанной модели РМЖ и показали, что эффективность IL-2, помимо режима применения, зависит как от физиологических характеристик мышей-опухоленосителей (гормональный статус, возраст), так и от параметров опухолевого роста (наличие субклинического периода, изначальный размер и скорость опухолевого роста) [1, 7, 9]. Поскольку наличие субклинического периода (более двух недель до достижения клинически значимого размера опухоли в 4–5 мм) и позднее применение (при размере опухоли более 10 мм) ограничивают терапевтическую эффективность IL-2 при его применении на этапе клинической манифестации опухоли, а применение препарата до клинической манифестации укорачивает продолжительность субклинического периода, целью данной работы было сравнить эффективность двух разных режимов применения IL-2 (краткий и пролонгированный курсы), используя «стандартизированных» самок-опухоленосителей (насколько это возможно для спонтанной модели), а именно: девственных, сходного генотипа и возраста без выраженного субклинического периода и диаметром опухоли молочной железы не более 6 мм на момент начала терапии [1, 9].

Материалы и методы

Популяция мышей генетически близких авторских линий BLRB и BYRB с хромосомной транслокацией робертсоновского типа (8,17)1IEM содержалась в конвенциональных условиях вивария ФГБУН «Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова» Российской академии наук. Самки BLRB и BYRB характеризовались высокой частотой спонтанного РМЖ, возникающего у них по мере старения аналогично тому, как это происходит у женщин с семейной предрасположенностью к РМЖ [7]. Все самки старше 6 месяцев рассматривались как пациенты; их еженедельно обследовали для выявления подкожных опухолей молочной железы (ОМЖ). Для данного исследования были отобраны только девственные самки-опухоленосители (n=21) в возрасте 15,4±0,4 месяца с диаметром опухоли 4–6 мм в течение первых двух недель после выявления ОМЖ.

Лиофилизированный IL-2 («Chiron», Нидерланды) был любезно предоставлен профессором В. Ден Оттером (Медицинский центр Свободного Университета, г. Амстердам, Нидерланды). Непосредственно перед введением IL-2 растворяли в 0,1 % растворе сингенной сыворотки крови мыши, приготовленном на 0,9 % растворе натрия хлорида.

Свежеприготовленный раствор IL-2 вводили мышам экспериментальной группы 1 (n=6) и группы 2 (n=8) локально (перитуморально) в объеме 0,5 мл/мышь в дозе 105 МЕ на 1-й (группа 1) и на 1-й и 2-й (группа 2) неделях после обнаружения опухоли. Через 1–2 недели (в соответствии со скоростью роста индивидуальной опухоли, при диаметре не более 10 мм) мыши группы 2 (пролонгированный курс) получали дополнительную инъекцию IL-2 интратуморально. В качестве контроля использовали интактных животных-опухоленосителей (контроль, n=7).

Ежедневно оценивали состояние мышей, еженедельно измеряли массу тела и диаметр опухолей индивидуально. Средний диаметр опухоли каждой мыши (СДО) определяли в соответствии с описанной ранее методикой по формуле (a+b+h)/3; где a — это максимальная длина, b — максимальная ширина, h — средняя высота опухоли. При наличии нескольких локализаций сначала измеряли объемы составляющих, затем значения объемов суммировали и вычисляли диаметр результирующей сферы, который и принимали за диаметр на момент измерения [7, 9].

Самок на конечной стадии заболевания (СДО более 20 мм, потерей массы тела более 15 % и/или отказ от пищи) подвергали эвтаназии методом цервикальной дислокации. Некропсию и патоморфологический анализ проводили, как описано ранее: опухоль и окружающие ткани фиксировали в 4 %-ном формалине на фосфатно-буферном растворе, готовили парафиновые срезы и окрашивали гематоксилином–эозином по стандартной методике [7, 9].

Для оценки эффективности терапии IL-2 сравнили динамику роста опухолей и продолжительность жизни пролеченных IL-2 и контрольных самок после начала эксперимента. Полученные индивидуальные данные хранили и анализировали с использованием программного пакета MS Office (США) и Statistica 6,0 («StatSoft», США). Статистическую значимость различий определяли с помощью непараметрического критерия Манна — Уитни.

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!


Начата подписка на 2018 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление