Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2018 год
1-4 номера

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2017, № 1

Подписаться на 2019 год

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 1'2017

Цитокиновый профиль регуляторных Т-клеток у больных хронической крапивницей

Н.И. Баранова, С.В. Коженкова, М.В. Осипова

Цель исследования состояла в сравнительном изучении функционирования цитокинов регуляторных Т-клеток у больных с хронической аутоиммунной крапивницей (ХАК) и с хронической идиопатической крапивницей (ХИК). Определяли функцию естественных регуляторных Т-клеток (Treg) по экспрессии мРНК FOXP3, адаптивных популяций: Tr1 — по продукции IL-10, Th3 — по TGFβ, Th17- по IL-17A, и дифференцировочные антигены CD3, CD4, CD16, CD19. Не выявлено достоверных различий естественных регуляторных Т-клеток по экспрессии мРНК FOXP3 у больных с ХАК и с ХИК и здоровых лиц. По адаптивным регуляторным популяциям Tr1, Th3, Th17 пациенты с ХАК и с ХИК имели как общие черты функционирования регуляторных популяций Т-клеток, так и свойственные лишь данной форме хронической крапивницы (ХК). Полученные данные могут быть использованы в качестве диагностических критериев двух форм ХК. (Цитокины и воспаление. 2017. Т. 16. № 1–2. С. 37–41.)

Ключевые слова: хроническая аутоиммунная крапивница, хроническая идиопатическая крапивница, регуляторные Т-клетки, цитокины.

Хроническая крапивница (ХК) в настоящее время занимает одну из лидирующих позиций в структуре аллергических заболеваний. Среди всех форм ХК наиболее сложными для диагностики и лечения остаются хроническая аутоиммунная крапивница (ХАК), ее распространенность составляет от 30 до 50 %, и хроническая идиопатическая крапивница (ХИК), лечение которой остается важной клинической, социальной и экономической проблемой [3, 11]. В последние годы были получены новые данные по изучению патогенетических механизмов при ХАК и ХИК [1]. Однако вопрос участия популяций регуляторных Т-клеток в каждой из этих форм ХК совершенно не изучен, что создает большие трудности для диагностики и лечения данной патологии.

Известно, что поддержание иммунологической толерантности в организме осуществляет естественные регуляторные Т-клетки (Treg). Среди популяций Тreg выделяют несколько, которые отличаются по происхождению, функциональному состоянию и механизмам супрессии. Так, выделяют естественные, формирующиеся в процессе развития в тимусе Тreg с фенотипом (CD4+CD25+FOXP3+) и адаптивные, индуцируемые антигеном на периферии, к которым относятся Tr1, Th3 и Th17 популяции Т-клеток. Считается, что все Treg клетки, обладая супрессорной активностью, ингибируют функцию клеток-эффекторов, участвующих в развитии аутоиммунитета, тем самым провоцируя развитие аутоиммунных заболеваний [2]. Наиболее чувствительным маркером Treg является внутриклеточный транскрипционный фактор FOXP3, который признан ключевой молекулой, контролирующей развитие и функционирование самих Treg. В литературных источниках имеются противоречивые данные о повышенной или пониженной активности данных популяций Т-клеток у больных с аллергическими и аутоиммунными заболеваниями [7, 15]. Маркерами Tr1 является IL-10, Th3 — TGFβ, Th17 — IL-17А [4, 8].

Цель исследования состояла в сравнительном изучении функционирования цитокинов регуляторных Т-клеток у больных с ХАК и с ХИК.

Материалы и методы

В ГКБ № 4 г. Пензы было проведено иммунологическое обследование 95 пациентов с ХК в возрасте от 25 до 58 лет (средний возраст составил 41±12 лет), из которых пациенты с ХАК составили 50 человек и пациенты с ХИК — 45. В качестве контрольной группы были обследованы 30 практически здоровых лиц, сопоставимых по полу и возрасту с основными группами.

Диагноз ХАК и ХИК устанавливали на этапе предварительного обследования на основании клинических проявлений болезни, анамнестических данных, а также результатов постановки проб с аутосывороткой. Внутрикожные пробы с аутосывороткой выполняли по методу М. Hide [10]. Пациентам с диаметром пробы 7 мм и более был поставлен диагноз ХАК. Пациентов, у которых была отрицательная проба с аутосывороткой, относили в группу с ХИК.

Иммунологическое обследование больных включало исследование дифференцировочных антигенов CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3-CD16+, CD3-CD19+ на лимфоцитах методом проточной цитометрии с использованием моноклональных антител ООО «Сорбент» (Россия). Количественную оценку IL-4, IL-10, IL-17A проводили в спонтанной и ФГА-индуцированной продукции клетками крови методом ИФА и наборами АО «Вектор Бест» (Россия).

Оценка экспрессии мРНК FOXP3.Материалом для исследования служила периферическая кровь, которую забирали в пробирки с ЭДТА в конечной концентрации 2 мг/мл. Из полученных лимфоцитов наборами РНК-Экстран («ООО Синтол») выделяли РНК. Экспрессию мРНК FOXP3 определяли методом полимеразной цепной реакции в реальном времени с предварительной обратной транскипцией (ОТ-ПЦР) [5]. Амплификацию проводили на приборе «ДТ-Лайт» в режиме реального времени. Уровень экспрессии мРНК FOXP3 определяли относительно экспрессии мРНК гена «домашнего хозяйства» HPRT1. В качестве контрольного образца гена «домашнего хозяйства» HPRT1 использовали β2-микроглобулин. Параллельно ставили 2 варианта опыта: с определением FOXP3 и определением β2-микроглобулина. Определение уровня экспрессии мРНК FOXP3 относительно мРНК HPRT1 проводили по формуле: [FOXP3]/[HPRT1]=E HPRT1 Cp1 /E FOXP3 Cp 2, где Е — эффективность амплификации, Ср1 — значение порогового цикла в образце для HPRT1, Ср2 — значение порогового цикла в образце для FOXP3.

Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета прикладных программ «Statistica 6.0». Данные представлены в виде медианы (Ме) с интерквартильным размахом 25–75-й процентиль. Для сравнения парных количественных значений использовали непараметрический критерий Манна — Уитни. Гипотезы рассматривали как статистически достоверные при p<0,05 [6].

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!


Начата подписка на 2019 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2019 Цитокины и Воспаление