Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2018 год
1-4 номера

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2017, № 4

Подписаться на 2019 год

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Краткие сообщения

Номер 4'2017

Использование синтетических пептидов в диагностике антител к белку core+1/F вируса гепатита С

Е.В. Личная, С.В. Климашевская, А.П. Обрядина, В.Н. Вербов, М.А. Белопольская, Е.В. Эсауленко, О.В. Калинина

Цель работы состояла в изучении возможности использования синтетических пептидов, содержащих антигенные детерминанты вируса гепатита С (ВГС) генотипов 1а и 2, для выявления антител к белку core+1/F ВГС в образцах сыворотки крови. Исследованы образцы сыворотки крови (n=161), полученные от доноров станций переливания крови. Наличие антител к белку core+1/F ВГС в образцах сыворотки крови определяли иммуноферментным методом (ИФА) с использованием синтетических пептидов F10, F11, F12 в качестве антигена. В ходе работы показана возможность использования синтетических пептидов для выявления антител к белку core+1/F ВГС в образцах сыворотки крови. (Цитокины и воспаление. 2017. Т. 16. № 4. С. 63–65.)

Ключевые слова: вирусный гепатит С, хронический гепатит С, белок core+1/F, синтетический пептид.

Вирусный гепатит С — актуальная проблема современного здравоохранения [1].Несмотря на то, что спонтанное избавление от вируса гепатита С (ВГС) происходит у 15–45 % инфицированных, в 55–85 % случаев развивается хронический гепатит С (ХГС).С момента открытия ВГС ведется поиск факторов, приводящих к хронизации инфекционного процесса.Изучается роль белков ВГС в развитии длительного воспаления, приводящего к формированию у больных хроническим гепатитом С (ХГС) фиброза печени с возможным исходом в цирроз и гепатоцеллюлярную карциному [5]. В результате ряда исследований доказана экспрессия антител к белку core+1/F в сыворотке крови больных ХГС, ХГС с циррозом и гепатокарциномой [6, 7]. Установлено, что последовательность аминокислот и длина белка core+1/F, который синтезируется с альтернативной рамки считывания, расположенной в области core гена ВГС, зависят от генотипа вируса. В настоящее время роль и функция данного белка исследованы недостаточно [2, 3]. Цель работы состояла в изучении возможности использования синтетических пептидов, содержащих антигенные детерминанты генотипов 1а и 2, для выявления антител к белку core+1/F ВГС в образцах сыворотки крови иммуноферментным методом.

Материалы и методы

Пептиды F10, F11 и F12, соответствующие антигенным детерминантам в положении 110–131, 125–152, 115–133 белка core+1/F изолятов вируса ВГС генотипов 1b, 2 и 1а, соответственно, были получены методом твердофазного синтеза (ООО «НПФ Верта»). Иммуногенные свойства синтетического пептида F10 были доказаны в эксперименте на лабораторных животных (мышах), что позволяет его использовать в качестве контроля сорбции и этапов иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием синтетических пептидов F11 и F12 [4].

В работе изучены образцы сыворотки крови (n=161), которые были получены от доноров станций переливания крови и проанализированы на наличие серологических маркеров (антител) к ВГС, вирусу гепатита В (ВГВ), вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ) согласно регламентированному скринингу. Распределение образцов крови по панелям в зависимости от обнаруженных маркеров представлено в табл. 1. В рамках данной работы выявление РНК ВГС в образцах сыворотки крови не проводили.

Наличие антител к белку core+1/F ВГС в образцах сыворотки крови определяли методом непрямого ИФА с использованием синтетических пептидов F10, F11, F12 согласно методике, отработанной ранее [6]. Каждый из синтетических пептидов сорбировали в различные планшеты, в концентрации 5 мкг/мл. Оптическую плотность (ОП) измеряли при длине волны 450 нм. ОП критическую (ОПкрит.) рассчитывали по формуле: ОПкрит. = ОПсрК(-) + 0,2, где ОПсрК(-) есть среднее значение ОП для отрицательных контрольных образцов. Образцы с коэффициентом позитивности (КП) больше 2,0 считали положительными. В качестве отрицательных контрольных образцов использовали образцы сыворотки крови здоровых доноров (n=16) отрицательные по антителам к ВГС, ВГВ, ВИЧ.

Для оценки статистической значимости отличий между группами для качественных признаков применяли критерий χ2. Результаты считали достоверными при р < 0,05.

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!


Начата подписка на 2019 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2019 Цитокины и Воспаление