Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2018 год
1-4 номера

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2018, №№ 1-4

Подписаться на 2019 год

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 1-4'2018

Концентрации CCL2, CCL3, CCL4, CCL5 и ССL11 хемокинов в сыворотке крови женщин с миомой матки

В.И. Коненков, Е.Г. Королева, Н.Б. Орлов, В.Ф. Прокофьев, А.В. Шевченко, А.М. Новиков, Т.И. Дергачева

Изучены концентрации хемокинов CCL2, CCL3, CCL4, CCL5 и СL11 в сыворотке крови женщин с миомой матки (ММ). Под наблюдением находились 36 пациенток европеоидного происхождения с верифицированным диагнозом ММ, которым проводили оперативное лечение в объеме лапароскопической миомэктомии. Проведен одновременный анализ концентраций хемокинов в сыворотке крови с использованием стандартизованных методов мультиплексного иммуноанализа Bio-Plex® на основе технологии xMAP. Показано, что концентрации таких хемокинов, как эотаксин, MCP-1 и MIP-1α у женщин с ММ оказались достоверно сниженными относительно аналогичных показателей здоровых женщин (p=0,000001, р=0,04 и р=0,00007, соответственно). Тогда как сывороточная концентрация RANTES (хемокин CCL5) у больных женщин оказалась достоверно повышенной (р=0,004). Было отмечено, что повышение концентрации RANTES сопровождается снижением содержания в сыворотке крови пациенток с ММ таких хемокинов, как эотаксин, MIP-1α и MIP-1β (отрицательные значения коэффициентов корреляции). При этом снижение концентраций хемокинов CCL2, CCL3, CCL4 и CCL11 прямо коррелировало между собой. Общим заключением анализа полученных данных может служить вывод о нарушениях функционирования хемокиновой сети при развитии ММ, что проявляется разнонаправленными и скоррелированными изменениями концентрации СС хемокинов в сыворотке крови. (Цитокины и воспаление. 2018. Т. 17. №№ 1–4. С. 67–71.)

Ключевые слова: миома матки, хемокины CCL2, CCL3, CCL4, CCL5, ССL11.

Миомы матки (ММ) являются доброкачественными моноклональными опухолями отдела гладкой мускулатуры (миометрия) матки. Предполагается, что развитие ММ в течение жизни угрожает 77 % всех женщин и будет сопровождаться болями в области таза, дисменореей, меноррагиями, анемией, недержанием мочи, преждевременными родами и спонтанными выкидышами, приводящими иногда к бесплодию [8, 10]. В развитии опухолевого роста при ММ основную роль играют процессы утраты контроля над клеточной миграцией, пролиферацией, дифференцировкой, дезорганизацией экстрацеллюлярного матрикса и тесно ассоциированные с ними воспалительные процессы. Заметное участие в этих взаимосвязанных процессах принимают и нарушения локального ангиогенеза. В их регуляции основную роль играют цитокины, ростовые факторы и хемокины. Среди них основное значение придается трансформирующему ростовому фактору (TGFβ), эпидермальному фактору роста (EGF), тромбоцитарному фактору роста (PDGF), фактору роста эндотелия сосудов (VEGF) и инсулиноподобному фактору роста (IGF). Уровни EGF, PDGF и VEGF-A были обнаружены на значительно более высоких уровнях в ткани ММ по сравнению с тканями миометрия, хотя рецептор EGF (EGFR) экспрессируется на одинаковых уровнях в обеих тканях [11].

Многие цитокины, включая фактор некроза опухоли альфа (TNFα), эритропоэтин, IL-1 и IL-6, участвуют в развитии лейомиомы матки. Выявлены изменения содержания мРНК эотаксина, воспалительных белков макрофагов (MIP-lα, MIP-Iβ) и рецепторов бета-хемокинов класса интегральных мембранных белков (CCR3) в тканях лейомиомы по сравнению с миометрием. При простой форме лейомиомы содержание мРНК MIP-1, CCR5 и эотаксина достоверно понижено по сравнению с миометрием. Уровень экспрессии мРНК эотаксина в тканях миометрия достоверно выше при малоузловой форме, чем при многоузловой, и при простой, чем при пролиферирующей [1]. Показано, что хемокины и их рецепторы (MIP-1α, MIP-1β, RANTES, эотаксин, эотаксин-2, IL-8, CCR1, CCR3, CCR5, CXCR1 и CXCR2) могут являться медиаторами опухолевого процесса при ММ [5, 9]. Уровни мРНК MCP-1 выше в миометрии по сравнению с лейомиомой, а эстрогены и прогестины уменьшают продукцию белка этого хемокина, что указывает на то, что MCP-1 может обладать противоопухолевой активностью при ММ [12]. Повышенное содержание тучных клеток при ММ положительно коррелирует с концентрацией RANTES и эотаксина [7].

Хемокины относятся к цитокинам со специфической функцией хемоаттракции (хемотаксические цитокины) и молекулярной массой от 7 до 12 кДа. Хемокины характеризуются несколькими особенностями, включая присутствие четырех консервативных остатков цистеина. Их рецепторы часто способствуют быстрым и обратимым изменениям клеточного метаболизма или миграции, в отличие от рецепторов других цитокинов, которые обычно вызывают более медленные и необратимые изменения пролиферации и апоптоза.

Члены семейства хемокинов включают CC-хемокины, которые имеют два соседних цистеина, хемокины CXC, с двумя цистеинами, разделенными одной аминокислотой, C-хемокины, характеризующиеся присутствием только одного из двух цистеинов, и хемокинов CX3C с тремя аминокислотами, разделяющими начальную пару цистеинов [14]. Наиболее значимыми представителями этой группы белков, привлекающих клетки воспалительного ряда в патологический очаг, являются продуцируемые макрофагами и другими активированными клетками белки: MCP-1 — CCL2 (macrophage chemotactic protein-1), MIP-1α — CCL3 и MIP-1β — CCL4 (macrophage inflammatory protein α и β), RANTES — CCL5 (Regulated upon Activation Normal T-cell Expressed and Secreted) и Eotaxin (CCL11) [3, 6]. Исследование их концентрации в сыворотке крови женщин с ММ явилось целью настоящего исследования. Нами проведен одновременный анализ концентраций хемокинов в сыворотке крови женщин с ММ с использованием стандартизованных современных методов мультиплексного иммуноанализа Bio-Plex®, использующих технологию xMAP, лицензированную Luminex, созданную с использованием проточной флуориметрии, микросфер из полистирола, двух флуоресцентных красителей при различных соотношениях, лазерной детекции, цифровой обработки сигнала для обеспечения исследования до 100 различных анализов в рамках одного образца.

Материалы и методы

Описание группы пациентов. Под наблюдением находились 36 пациенток европеоидного происхождения с верифицированным диагнозом миомы тела матки, которым было проведено оперативное лечение в объеме лапароскопической миомэктомии. Возраст пациенток составил от 23 до 54 лет. Средний возраст составил 41,13 ± 6,68 года. Среди них пациенток с избыточной массой тела и с ожирением (ИМТ > 24.99) – 35,89 %. Нарушение менструального цикла по типу полименорреи выявлено у 20 пациенток. Предшествующие роды отмечены у 28 пациенток. Искусственное прерывание беременности в анамнезе у 25 женщин. Спонтанные выкидыши выявлены у 8 пациенток. У 5 пациенток в анамнезе беременностей не наступало. Жалобы на тянущие боли внизу живота предъявили 28 пациенток, на кровотечение — 23 пациентки. Размеры миоматозных узлов, выявленных по данным УЗИ органов малого таза, составили от 5 до 180 мм. Средний размер — 106,5 ± 41,05 мм. По передней стенке матки располагались узлы у 19 пациенток, по задней — у 7 пациенток; атипическое расположение (забрюшинные, перешеечные узлы) — у 2, сочетанное расположение — у 10 пациенток. При выполнении предоперационной гистероскопии, при гистологическом исследовании у 7 пациенток диагностирован полип эндометрия, у 6 — простая гиперплазия эндометрия.

Методы определения хемокинов. Однократно замороженную сыворотку крови размораживали перед исследованием до комнатной температуры. Для удаления осадка проводили центрифугирование сыворотки при 10000 об/мин в течение 10 минут при 4 °C. Концентрацию 27 цитокинов определяли с использованием набора «Bio-Plex Pro™ Human Cytokine 27-plex Assay» («Bio Rad Laboratories, Inc.», (США) методом проточной флуориметрии на двухлучевом лазерном анализаторе «Bio-Plex 200» («Bio-Rad Laboratories, Inc.», США). В сыворотке одномоментно определяли концентрации IL-1β, IL-1Ra, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12 (p70), IL-13, IL-15, IL-17, Basic FGF, Eotaxin, G-CSF, GM-CSF, INFγ, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNFα и VEGF после построения калибровочной кривой по соответствующим стандартам. Для обработки данных применяли программное обеспечение «Bio-Plex manager Software version 4.1». Концентрацию цитокинов выражали в пг/мл.

Методы статистического анализа. Статистическую обработку проводили с помощью специализированных пакетов прикладных программ «StatSoft Statistica 10.0» и «IBM SPSS Statistics 23» (США). Проверку гипотезы о нормальном распределении количественных параметров проводили с использованием критерия Шапиро — Уилка и критерия Колмогорова —Смирнова с поправкой Лиллиефорса. Для анализа данных использовали параметрические (t-критерий Стьюдента для независимых выборок с учетом выполнения двух ограничивающих условий: нормальности распределения и равенства генеральных дисперсий для групп сравнения) и непараметрические (U-тест Манна — Уитни, ранговая корреляция Спирмена) методы статистики. Данные представлены в виде среднего значения ± ошибка средней (M ± m), медианы (Me) и интерквартильного размаха (интервал между 25-м (Q1) и 75-м (Q3) процентилями). Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез принимали равным 0,05.

Результаты и обсуждение

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!


Начата подписка на 2019 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2019 Цитокины и Воспаление