Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
Журнал 'Цитокины и воспаление', 2002, № 1
|
Оригинальные статьи
|
Номер 1'2002
|
СПОСОБНОСТЬ ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ БОЛЬНЫХ РЕВМАТОИДНЫМ АРТРИТОМ И СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКОЙ К СИНТЕЗУ ЦИТОКИНОВ С ПРО- И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ ФУНКЦИЯМИ - IL-1B, TNFA, IL-6, IFNG И IL-10
Т.В. Глазанова, Л.Н. Бубнова, В.И. Мазуров
С целью установления роли провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в поддержании аутоиммунного процесса системного характера у 48 больных ревматоидным артритом (РА) и 32 больных системной красной волчанкой (СКВ) I-III степеней активности в стадии развернутых клинических проявлений были изучены особенности синтеза IL-1b, IL-6, TNFa, IFNg и IL-10 лимфоидными клетками периферической крови. Установлено значительное повышение способности иммунокомпетентных клеток больных РА и СКВ к спонтанной продукции IL-6 и TNFa, наряду с возрастанием уровня IL-10 в сыворотке крови. При этом спонтанная продукция IL-1b была повышена незначительно, а IFNg - не отличалась от нормы. Продукция IL-6 у больных СКВ возрастала параллельно с увеличением степени активности иммуновоспалительного процесса, в том числе, с возрастанием содержания С-реактивного белка, и была значительно выше у пациентов с II и III степенями активности по сравнению с пациентами с СКВ I степени активности. Таким образом, РА и СКВ на этапе развернутых клинических проявлений характеризуются дисбалансом цитокинов с провоспалительными и противовоспалительными функциями, способствующим поддержанию каскада иммуновоспалительных реакций, а также - доминированием Т-хелперов 2-го типа, продукты которых - IL-6 и IL-10 - способствуют стимуляции аутоантителообразования. Перечисленные особенности продукции цитокинов играют патогенетическую роль в поддержании аутоиммунного процесса на этапе клинической манифестации системных аутоимунных заболеваний.
Ключевые слова: цитокины, ревматоидный артрит, системная красная волчанка.
Как правило, локальная и системная продукция цитокинов приводит к большинству патологических последствий при аутоиммунных заболеваниях (АИЗ). Хотя почти все цитокины участвуют в воспалительном процессе при системных аутоиммунных заболеваниях, некоторые из них, такие, как: IL-1b, TNFa, IL-6, и IFNg - играют наиболее важную роль в патогенезе ревматоидного артрита (РА) и системной красной волчанки (СКВ). В литературе существуют различные мнения о преобладании того или иного типа цитокинов - продуктов Т-хелперов 1 или 2-го типов (Th1 и Th2) при системных АИЗ. Отчасти это многообразие мнений и данных обусловлено тем, что разные исследователи изучали пациентов на различных этапах развития заболевания. Кроме того, большая часть исследований посвящена изучению выработки цитокинов непосредственно в месте поражения: клетками, выстилающими полость сустава, эндотелиальными клетками. Следует также отметить, что изучение уровня провоспалительных цитокинов в сыворотке крови позволяет судить лишь о совокупной активности лимфоидных клеток-продуцентов и моноцитов/макрофагов, а также клеток эндотелия и ряда других, чьи функции активизируются при аутоиммунном процессе.
Целью нашей работы было изучение особенностей синтеза провоспалительных и противовоспалительных цитокинов (IL-1b, IL-6, TNFa, IFNg, и IL-10) у больных РА и СКВ в стадии развернутых клинических проявлений для установления роли этих цитокинов в поддержании аутоиммунного процесса системного характера.
Материалы и методы
Были обследованы пациенты с серопозитивным РА и СКВ, находившиеся на лечении в Городском ревматологическом центре Санкт-Петербурга. Группа больных РА I-III степеней активности состояла из 48 человек с длительностью заболевания 9,2 + 1,1 года, среди которых женщин было 70,8 %, мужчин - 29,2 %; возраст больных колебался от 39 до 78 лет (в среднем - 56,4 + 1,3 года). Большая часть (82,9 %) больных РА получала базисную цитостатическую терапию метотрексатом в дозе 5-10 мг/нед. и один из нестероидных противовоспалительных препаратов. Группа больных СКВ I-III степеней активности в фазе обострения состояла из 32 человек с длительностью заболевания 8,0 + 1,3 года; 90,6 % обследованной группы составили женщины, возраст больных колебался от 21 года до 67 лет (с среднем - 41,8 + 2,1 года). Терапию преднизолоном в дозах от 5 до 60 мг/сут. проводили в подавляющем большинстве (93,5 %) случаев. В контрольную группу для иммунологических исследований вошли 35 практически здоровых людей в возрасте от 22 до 65 лет.
Мононуклеарные клетки периферической крови выделяли в стерильных условиях на градиенте плотности Lymphoprep (Sigma), r = 1,077, трижды отмывали и культивировали в течение 24 ч при 37 °С и 5 % СО2 в 96-луночных планшетах, в количестве 2?105 на лунку. Для культивирования использовали среду RPMI-1640 ("Биолот", Санкт-Петербург) с добавлением 10 % эмбриональной телячьей сыворотки ("Биолот", Санкт-Петербург) и 80 мкг/мл гентамицина. Мононуклеары культивировали как в присутствии индуктора (стимулированная продукция), так и без него (спонтанная продукция). В качестве индуктора синтеза TNFa и IL-1b использовали раствор пирогенала (липополисахарид Pseudomonas aeruginosa; ЛПС) в дозе 0,1 мкг/лунку. В качестве индуктора синтеза IL-6 использовали фитогемагглютинин (ФГА) в дозе 10 мкг/лунку. Все пробы ставили в триплетах. Собранные после завершения культивирования супернатанты собирали и исследовали на наличие цитокинов методом иммуноферментного анализа. Для определения TNFa, IL-1b и IL-6 использовали тест-системы фирмы "Протеиновый контур" (ГНЦ НИИ ОЧБ, Санкт-Петербург), для определения IFNg - тест-системы "Цитокин" (ГНЦ НИИ ОЧБ, Санкт-Петербург), для определения IL-10 - тест-системы "R&D Systems" (США).
Результаты и обсуждение
Данные, представленные в табл. 1, свидетельствуют, что способность иммунокомпетентных клеток спонтанно вырабатывать IL-6 в группах пациентов с РА и СКВ была значительно повышена, тогда как ФГА-индуцированная активность продукции IL-6 оказалась в пределах нормальных величин. При этом индекс стимуляции, показывающий, во сколько раз усиливается цитокин-продуцирующая активность клеток в ответ на стимулятор, был значительно снижен и составил соответственно 2,7 + 0,3 и 5,9 + 1,2 при норме 50,1 + 20,7. Это свидетельствует, во-первых, о наличии предсуществующей активации иммунокомпетентных клеток, приводящей к усилению их способности спонтанно вырабатывать IL-6, и, во-вторых, о снижении их реактивности, что выражается в нарушении способности реагировать усилением выработки цитокина в ответ на неспецифический стимул.
Читайте статью целиком
в печатной версии журнала!
Если Вы хотите прочесть статью целиком, заказывайте компакт-диск,
на котором Вы найдете ВСЕ статьи ВСЕХ номеров журнала за 2002 и 2003 годы!
Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
|
Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!
Начата подписка на 2016 год!
Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.
|
![[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'](/images/Logo.gif){kind=logo}
