197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: cytokines.ru

  

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2009, № 1

ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ ЭНДОГЕННЫХ БИОРЕГУЛЯТОРОВ?- ЦИТОКИНОВ И НЕЙРОПЕПТИДА ОРЕКСИНА?- В УСЛОВИЯХ СТРЕССОРНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ И ВВЕДЕНИЯ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕГО ПРЕПАРАТА ДЕРИНАТ

Г.М. Алешина, Н.С. Новикова, Т.В. Абрамова, С.В. Перекрест, В.Н. Кокряков, С.Н. Шанин, Е.А. Корнева

Изучали интенсивность экспрессии генов провоспалительного (IL-1?) и противоспалительного (IL-10) цитокинов и гена препроорексина у крыс при экспериментальном стрессе. Использовали два варианта острого воздействия: холодовой стресс (охлаждение крыс в индивидуальных металлических контейнерах в течение 10 мин при -20 ?С), комбинированный стресс (охлаждение животных, фиксированных на спине в течение 30 мин при -20 ?С). Экспрессию генов оценивали методами ОТ-ПЦР в реальном времени: генов IL-1? и IL-10?- в спленоцитах, гена препроорексина?- в клетках гипоталамуса головного мозга животных. Полученные данные позволяют говорить о разнонаправленном действии острого комбинированного стресса на экспрессию генов цитокинов в спленоцитах: ингибировании для IL-1? и стимулировании для IL-10. Исследована также возможность коррекции стресс-индуцированных изменений экспрессии генов этих биорегуляторов с помощью иммуномодулятора Деринат. Показано корригирующее действие Дерината в отношении экспрессии гена IL-1? в спленоцитах и гена нейропептида орексина в клетках гипоталамуса в условиях стрессорного воздействия; стимулирующее в отношении экспрессии гена IL-10. (Цитокины и воспаление. 2009. Т. 8, № 1. С. 18-22.)

Ключевые слова: стресс, экспрессия генов, интерлейкины, орексины, Деринат.

Стрессорные воздействия влияют на функционирование иммунной системы организма, изменяя уровни продукции биорегуляторов в ту или другую сторону в зависимости от природы таких воздейст-вий и их продолжительности. Центральную роль в этих процессах играют, прежде всего, цитокины и нейропептиды, участвующие в регуляции защитных функций. Среди них особое место занимают орексины. Известно, что орексины участвуют в регуляции многих вегетативных функций: реакций на стресс, пищевого поведения, терморегуляции, цикла сон-бодрствование и др. [13]. Интерес к исследованию степени вовлеченности определенных нейронов гипоталамуса, содержащих орексины, в регуляцию защитных функций объясняется тем, что скопления таких нейронов локализованы преимущественно в перифорникальных ядрах LHA гипоталамуса?- структуры, участвующей в регуляции иммунологических процессов. Методом маркирования клеток вирусом псевдобешенства, обладающим свойством транссинаптического ретроградного транспорта, показано [5], что именно аксоны нейронов латеральной гипоталамической области участвуют в симпатической иннервации селезенки мультисинаптически. С помощью иммуногистохимических методов выявлено участие орексин-содержащих нейронов в реакциях организма на введение антигена (ЛПС) [15].

В настоящее время активно проводятся исследования влияния стрессорных воздействий различной природы на экспрессию генов иммунорегуляторов. Показано, что продукция провоспалительных цитокинов и уровень их мРНК может как повышаться [4], так и понижаться [6] в условиях различных моделей экспериментального стресса. Существуют единичные публикации, указывающие на то, что стресс по-разному влияет на экспрессию гена препроорексина в клетках гипоталамуса крыс при различных стрессорных воздействиях. Так, показано, что холодовой стресс увеличивает экспрессию мРНК препроорексина у животных любого возраста, а иммобилизационный?- только у молодых [9]. Следует заметить, что в большинстве исследований стресс рассматривают как фактор, модулирующий продукцию иммунорегуляторов, вызванную введением микроорганизмов, липополисахаридов [6], повреждением тканей [12], и практически отсутствуют данные о влиянии только психоэмоционального или болевого стрессорного воздействия на экспрессию генов цитокинов и орексинов.

Целью настоящей работы явилось изучение интенсивности экспрессии генов провоспалительного (IL-1?) и противоспалительного (IL-10) цитокинов и гена препроорексина у крыс при экспериментальном стрессе, причем использовали два варианта острого воздействия, один из которых, как было показано ранее, оказывает иммуностимулирующее, а другой - иммуносупрессивное действие [16]. Исследована также возможность коррекции стресс-индуцированных изменений экспрессии генов этих биорегуляторов с помощью иммуномодулятора Деринат. Этот препарат, представляющий собой натриевую соль нативной ДНК, получаемый из молок лососевых или осетровых рыб, является уникальным иммуномодулятором, восстанавливающим нарушенные функции иммунной системы, стимулирующим процессы регенерации, а также обладающим радиопротективной и противовирусной активностью [1]. Молекулярные механизмы столь широкого терапевтического действия препарата в настоящее время являются предметом интенсивного исследования.

Материалы и методы

Экспериментальные животные. Работа проведена на 36 самцах крыс линии Wistar весом 200-250 г (возраст 3-4 месяца). Крысы содержались в пластиковых клетках по 6-10 животных при постоянной температуре (21?+?2 °С), 12-часовом световом дне и имели неограниченный доступ к воде и пище.

Модели экспериментального стресса:

- холодовой стресс (иммуностимулирующий)?- охлаждение крыс в индивидуальных металлических контейнерах в течение 10 мин при -20 ?С;

- комбинированный стресс (иммуносупрессивный)?- охлаждение животных, фиксированных на спине, в течение 30?мин при -20 ?С.

Деринат (ЗАО ФП "Техномедсервис", Москва) вводили внутрибрюшинно в объеме 1 мл 0,15 М раствора NaCl. Забор материала (селезенка, мозг) осуществляли через 1 ч после окончания стрессорного воздействия.

Экспериментальные группы животных (по 4 крысы в группе):

• Контрольные животные, которым вводили 0,15 М раствор NaCl.
• Животные, которым вводили Деринат в дозе 10 мг/кг массы тела.
• Животные, которым вводили Деринат в дозе 50 мг/кг массы тела.
• Животные, подвергнутые холодовому стрессорному воздействию через 20 мин после введения 0,15 М раствора NaCl.
• Животные, подвергнутые холодовому стрессорному воздействию через 20 мин после введения Дерината в дозе10?мг/кг массы тела.
• Животные, подвергнутые холодовому стрессорному воздействию через 20 мин после введения Дерината в дозе50?мг/кг массы тела.
• Животные, подвергнутые комбинированному стрессорному воздействию через 20 мин после введения 0,15 М раствора NaCl.
• Животные, подвергнутые комбинированному стрессорному воздействию через 20 мин после введения Дерината в дозе 10?мг/кг массы тела.
• Животные, подвергнутые комбинированному стрессорному воздействию через 20 мин после введения Дерината в дозе 50?мг/кг массы тела.

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!


Начата подписка на 2018 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.