Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
Журнал 'Цитокины и воспаление', 2015, № 3
|
Оригинальные статьи
|
Номер 3'2015
|
Роль цитокинов в развитии феномена ингибирования стимулированной сульфатом бария люминол-зависимой хемилюминесценции крови под влиянием нестероидных противовоспалительных препаратов у пациентов с непереносимостью данных препаратов
С.В. Чаусова, К.Г. Гуревич, Г.П. Бондарева, С.В. Калиш, И.Ю. Малышев
Определяли вклад цитокинового механизма в развитие феномена ингибирования стимулированной сульфатом бария люминол-зависимой хемилюминесценции (СЛХЛ) крови под влиянием нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) у пациентов с их непереносимостью. С этой целью методом иммуноферментного анализа измеряли уровень цитокинов IL-1β, IL-8, TNFα, IFNγ и IL-4 в плазме крови после прединкубации проб крови с НПВП у пациентов с их непереносимостью и доноров. Выявлено, что провоспалительные цитокины IL-1β, IL-8, TNFα, IFNγ не вносят вклад в подавление СЛХЛ крови под влиянием НПВП. Противовоспалительный цитокин IL-4 вносит незначительный вклад в развитие указанного феномена у пациентов с кожными проявлениями непереносимости НПВП. (Цитокины и воспаление. 2015. Т. 14. № 3. С. 19–23.)
Ключевые слова: непереносимость нестероидных противовоспалительных препаратов, цитокины.
В 1985 году Пыцким В.И и др. был открыт феномен специфического угнетения аллергеном стимулированной сульфатом бария люминол-зависимой хемилюминесценции лейкоцитов (СЛХЛ) периферической крови сенсибилизированных людей [8]. На основе этого феномена был разработан тест для выявления специфической сенсибилизации к пыльцевым, бытовым, лекарственным (пенициллин) и другим аллергенам. Использованные аллергены были либо полноценными антигенами, либо гаптенами (пенициллин), образующими в организме комплексный антиген. Позже нами было установлено изменение СЛХЛ крови при псевдоаллергии. Так, добавление нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) к пробам крови пациентов с их непереносимостью также вызывало угнетение СЛХЛ крови, которое оказалось дозозависимым [11]. По результатам исследований был разработан безопасный и экономичный тест in vitro для диагностики непереносимости НПВП [11]. Позже нами было доказано, что отсутствуют какие-либо особенности в работе ферментов окислительного метаболизма выделенных полиморфноядерных лейкоцитов (ПМЛ), проявляющиеся под влиянием НПВП, у больных с непереносимостью данных препаратов [10]. Из этого может следовать, что различия в показателях СЛХЛ цельной крови данных больных по сравнению с донорами при прединкубации крови с НПВП связаны с влиянием на ферменты окислительного метаболизма ПМЛ находящихся в плазме крови биологически активных веществ (медиаторов, цитокинов). Для выяснения вклада цитокинового механизма в развитие феномена ингибирования СЛХЛ крови под влиянием НПВП было проведено настоящее исследование.
Материалы и методы
Обследованы 30 больных с непереносимостью аспирина и/или анальгина и/или диклофенака натрия в возрасте от 29 до 60 лет. Из них 18 пациентов — с астматической триадой в стадии ремиссии хронического бронхита и астмы (1-я группа), 12 пациентов с хронической крапивницей/отеком Квинке, обостряющейся после приема НПВП (2-я группа). В крови всех обследованных пациентов специфических IgE к исследуемым НПВП не было выявлено.
Критерии включения пациентов в исследование: приступы экспираторного диспноэ, ринит, крапивница, отек Квинке при приеме НПВП (аспирина, анальгина или диклофенака натрия) в любой лекарственной форме (инъекции, таблетки, драже). Критерии исключения: прием системных глюкокортикостероидов, НПВП за1 неделю до исследования, наличие острой или обострение хронической инфекции.
Контрольную группу составили 8 здоровых доноров без воспалительных и атопических заболеваний, сопоставимых по полу и возрасту.
Все включенные в работу лица дали письменное добровольное информированное согласие на участие в исследовании. Клиническое исследование одобрено Межвузовским Комитетом по этике, протокол № 05-12 от 17.05.2012 г.
Для исследования использовали гепаринизированную венозную кровь объемом 5 мл (концентрация гепарина — 50 ЕД/мл).
В образцы крови, содержащие 3×106 лейкоцитов, вносили 5 мкл растворов салицилата, метамизола, диклофенака натрия в конечных концентрациях 9 мМ, 18 мкМ, 18 мкМ, соответственно. Салицилат натрия (порошок, Екатеринбургская фарм. фабрика, Россия) и метамизол натрия (порошок, «Медокеми Лтд», Кипр) растворяли в физиологическом растворе, диклофенак натрия (порошок, «Фармстандарт», Россия) — в воде для инъекций. В контрольные пробы вместо используемых препаратов добавляли физиологический раствор или воду для инъекций в том же объеме. Полученные пробы тщательно ресуспензировали и инкубировали в течение 1 часа при 37 °С. Жизнеспособность клеток, определяемая окрашиванием трипановым синим, за время инкубации не изменялась. Далее пробы крови центрифугировали в течение 5 минут при 3000 об/мин. Полученную сыворотку использовали в качестве источника исследуемых цитокинов. Из эксперимента исключалась хилезная и гемолизированная сыворотка.
Определение уровня цитокинов проводили твердофазным иммуноферментным методом (ИФМ) («сэндвич»-вариант ИФМ) с использованием наборов для определения цитокинов TNFα, IFNγ, IL-1β, IL-8, IL-4 (ЗАО «Вектор-Бест», г. Новосибирск).
Статистическую обработку полученных результатов проводили с применением программ «Statistica 7.0» и «Exсel 2007». Все результаты в данной работе представляли в виде M±m (М — среднее арифметическое для анализируемой группы показателей, m — ошибка среднего). Соответствие закона распределения нормальному устанавливали с помощью λ-критерия Колмогорова — Смирнова. Статистическую достоверность различий измеряемых величин определяли с использованием критерия Манна — Уитни. Различия считали достоверно значимыми при уровне p<0,05.
Результаты и обсуждение
Читайте статью целиком
в печатной версии журнала!
Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
|
Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!
Начата подписка на 2018 год!
Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.
|
![[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'](/images/Logo.gif){kind=logo}
