Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
Журнал 'Цитокины и воспаление', 2002, № 3
|
Оригинальные статьи
|
Номер 3'2002
|
ЦИТОКИНЫ В ТЕРАПИИ РАКА
И.В. Киселева, С.Ф. Протасова, С.М. Щеканова, В.В. Жунко, А.Ю. Егоров
Новый высокоэффективный противоопухолевый препарат местно-резорбтивного действия был получен на основе комбинации некоторых рекомбинантных цитокинов человека. В наблюдениях in vivo была показана противоопухолевая эффективность рекомбинантного интерлейкина 2 (IL-2) человека, использованного не только в инъекционной форме, но и в виде мази. В опытах на мышах, которым была привита карцинома Эрлиха или лимфома L-1210, было установлено, что цитокиновые мази, содержащие IL-2 или IL-2 в комбинации c интерфероном a2 и/или фактором некроза опухолей альфа в низких концентрациях, оказывали выраженный противоопухолевый эффект. Полученные результаты расширяют наши знания о свойствах цитокинов, используемых в терапии рака, и позволяют предположить, что простые в приготовлении и дешевые цитокиновые мази являются перспективными противоопухолевыми препаратами.
В настоящее время в нашей стране и за рубежом широко проводится исследование и лечение больных с различными нозологическими формами заболеваний, включая онкологические, препаратами рекомбинантных цитокинов. Известно, что цитокины, такие как: интерлейкин 2 (IL-2), интерферон a2 (IFNa2) и фактор некроза опухоли a (TNFa) - обладают способностью останавливать опухолевый рост за счет подавления деления опухолевых клеток, ускоренного созревания дендритных клеток (клеток Лангерганса), инициирующих специфический ответ Т-лимфоцитов, и стимуляции активности цитотоксических лимфоцитов и макрофагов [3, 9, 11]. Действие этих медиаторов иммунного ответа, применяемых в виде чистых препаратов, полученных генно-инженерным путем, проявляется при их введении в кровоток животных и людей путем инъекций. В частности, показано, что препарат рекомбинантного IL-2, используемый для лечения опухолей путем его внутривенного введения, проявляет свою эффективность за счет системной активации клеток-киллеров, поражающих опухолевые клетки [3, 12]. Основным недостатком инъекционной формы IL-2 является необходимость использования высоких доз препарата (более 103 МЕ/кг массы тела), при которых у больных проявляется комплекс тяжелых токсических эффектов вплоть до комы и летальных исходов [10, 13, 14]. Другим недостатком препарата является его нестабильность при введении в кровяное русло, где период его инактивации измеряется минутами [3].
Есть сообщения о том, что применение концентрированных цитокиновых коктейлей приводит к осложнениям, связанным с некрозом тканей при подкожном и внутрикожном введениях, а в отдельных случаях способствует гибели больного.
В литературе описана противоопухолевая композиция, включающая IL-2, IFNa2 и двунитевую РНК (днРНК) [10]. Добавление в композицию днРНК в качестве компонента, уменьшающего токсичность цитокинов, позволило снизить необходимые дозы цитокинов, одновременно расширив область их терапевтического применения. Но при такой днРНК-цитокиновой терапии для получения положительного эффекта вливания препарата проводили не чаще двух раз в неделю с использованием дозы интерлейкина порядка 103-104 МЕ/кг массы тела, т.е. дозы, которая, согласно данным [3, 11], уже способна оказывать токсическое действие.
То, что кожа и кожные реакции связаны с внутренними процессами организма, известно давно, но работы последних лет показали, что кожа имеет полный набор клеточных элементов и их продуктов, с помощью которых она функционирует как иммунный орган [2]. Кожа является первичной мишенью во время различных иммунных реакций и участвует как в генерации локальных иммунных ответов, так и распространяющихся на всю иммуную систему [2].
В связи с этим задачей нашей работы явилась разработка нового метода лечения различных онкологических заболеваний путем локальных накожных аппликаций средства, содержащего в качестве активного начала рекомбинантный IL-2 в сочетании с рекомбинантными IFNa2 и TNFa и приготовленного в виде мази.
Материалы и методы
Цитокины. В работе использовали рекомбинантный IL-2 человека (BIOTECH, Санкт-Петербург), рекомбинантные TNFa и IFNa2 (производства НИКТИ БАВ ГНЦ ВБ "Вектор", г. Новосибирск).
Животные. Опыты ставили на белых беспородных мышах и мышах линии DBA-2, половозрелых самцах с массой тела 14-16 г разведения питомника "Рапполово" (Всеволожский район, Ленинградская область) и содержали на стандартном рационе.
Моделирование опухолевого роста in vivo. В работе применяли две перевиваемые опухолевые линии - карциному Эрлиха (НИИ онкологии им. проф. Н.Н. Петрова, Санкт-Петербург) и лимфому L-1210 (Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург), которые поддерживали путем перевивания через организм мышей. Для поддержания карциномы Эрлиха использовали белых беспородных мышей, для лимфомы L-1210 - мышей линии DBA-2.
В опытах по моделированию опухолевого роста суспензии опухолевых клеток вводили мышам внутримышечно в правое бедро, что стимулировало локальный рост опухолей и давало возможность оценивать величину опухоли, измеряя ее диаметр (в см). Суспензии опухолевых клеток готовили на среде RPMI-1640 ("Биолот", Санкт-Петербург) и вводили в следующих количествах: клетки карциномы Эрлиха - от 5 ? 104 до 5 ? 105 клеток/мышь. Пальпируемые опухоли появлялись на 6-8 сут. и к 10-14 сут. достигали 3,5-4,0 см в диаметре, что к 25-30 дню опыта приводило к гибели подопытных животных. Кроме измерения величины опухолей, рассчитывали процент животных с опухолями. В каждой группе было использовано не менее 10 животных.
Приготовление цитокиновых мазей. В качестве фармацевтически приемлемого носителя применяли стандартную смесь, которую готовили по общепринятой для приготовления мазей технологии на ланолиново-вазелиновой основе. Смешивая один или сочетания двух или трех цитокинов с носителем, получали мази с различным спектром активностей каждого из участвующих компонентов. В работе использовали следующие концентрации цитокинов (МЕ/г): IFNa2 - от 2 ? 103 до 2 ? 104; IL-2 - от 5,5 ? 103 до 2 ? 104; TNFa - 7,5 ? 103 [1].
Цитокинотерапия. 100 мг мази наносили одно-трехкратно на зону опухолевого роста, начиная с 4-го дня после имплантации опухоли, втирая в кожу больных животных. Привитых опухолью мышей контрольной (нелеченой) группы обрабатывали одной мазевой основой (носителем) без цитокиновых компонентов, втирая ее в соответствующие сроки в зону опухолевого роста. Наблюдение проводили в течение 10-33 дней от момента имплантации опухоли. Животных, выживших к концу срока наблюдения, выводили из эксперимента в соответствии с "Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных" посредством эфирного наркоза.
Читайте статью целиком
в печатной версии журнала!
Если Вы хотите прочесть статью целиком, заказывайте компакт-диск,
на котором Вы найдете ВСЕ статьи ВСЕХ номеров журнала за 2002 и 2003 годы!
Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
|
Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!
Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2006 год.
Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2007 год.
|
![[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'](/images/Logo.gif){kind=logo}
