Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 234 16 69, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 234 94 89
E-mail:
Web: cytokines.ru


хорошие недорого эконом кухни  


2008 год
1 номер 2 номер
3 номер 4 номер

О Журнале

Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:


https://pornoseksxxx.com/

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2002, № 4

Подписаться на 2009 год

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 4'2002

МОРФОМЕТРИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КЛЕТОК ИММУНОРЕГУЛЯТОРНОГО И ЭФФЕКТОРНОГО ЗВЕНЬЕВ ИММУНИТЕТА В АОРТЕ И ПАРААОРТАЛЬНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛАХ ПРИ АТЕРОГЕНЕЗЕ У ЧЕЛОВЕКА

П.В. Пигаревский

Целью работы явилось изучение иммунорегуляторного и эффекторного звеньев иммунитета в динамике атеросклероза у человека. Иммуноморфологическое и морфометрическое исследования с использованием моноклональных антител к различным субпопуляциям Т- и В-лимфоцитов показали, что в возрастной группе 31-60 лет по мере прогрессирования атеросклероза в интиме и адвентиции аорты, а также в Т-зоне регионарных к этим участкам сосуда парааортальных лимфатических узлов резко увеличивается численность CD4+ лимфоцитов и HLA-DR+ мононуклеарных клеток при неизменном содержании CD8+ лимфоцитов. Указанные изменения сопровождаются увеличением численности IgG-синтезирующих В-лимфоцитов в тех же участках сосудистой стенки и в В-зоне парааортальных лимфатических узлов. В селезенке, периферическом лимфоидном органе, отдаленном от аорты, отмеченные выше иммуноморфологические перестройки отсутствуют. Полученные данные указывают на возможные механизмы и новые специфические черты развития иммунного воспаления в динамике атеросклероза у человека.

В начале 90-х гг. была обоснована концепция, позволяющая рассматривать становление и развитие атеросклеротических поражений артерий с позиций развития иммунного воспаления в сосудистой стенке [2, 8]. Центральным положением о возможной роли аутоиммунитета в атерогенезе является определение природы антигенов и характера клеточных взаимодействий.

В настоящее время установлено, что модифицированные путем перекисного окисления (оксигенации) липопротеиды низкой плотности (мЛПНП) присутствуют в большом количестве в интиме артерий уже на ранних стадиях атерогенеза и активируют экспрессию лейкоцитарных адгезивных молекул [11, 12, 13]. Это является стимулом для миграции в места отложения мЛПНП моноцитов, а также Т- и В-клеток и продукции антител in situ [1, 5, 7, 17]. Показано, что в атеро- склеротических бляшках присутствует большое число CD4+ Т-клеток и макрофагов, что послужило основанием для утверждения о важной роли клеточного иммунитета в атерогенезе [6, 10, 16]. Более того, получены факты, которые позволяют считать, что Т-клетки могут выступать инициаторами иммунного воспаления при атерогенезе в ответ на мЛПНП, а их медиаторы - как растворимые, так и контактзависимые - играть решающую роль в формировании атеросклеротических поражений артерий [4, 18]. Вместе с тем, оставалось неясным, что вызывает активацию CD4+ Т-клеток (и где она происходит) и формирование эффекторных иммуноглобулинсинтезирующих В-лимфоцитов, которые обнаруживаются в зоне атеросклеротических поражений. Неясным оставался также вопрос, в какой степени периферические органы иммунной системы вовлечены в этот процесс - является ли аутоиммунный ответ на мЛПНП местной реакцией сосудистой стенки или он носит генерализованный характер.

Целью настоящей работы явилось изучение иммунорегуляторного и эффекторного звеньев иммунитета в динамике атеросклероза у человека. Были проведены сравнительное иммуноморфологическое и морфометрическое исследования аорты и регионарных к ней групп лимфатических узлов на разных стадиях атерогенеза.

Материалы и методы

Объектом исследования был материал 44 аутопсий, полученных от мужчин (средний возраст 57 + 5 лет), умерших от острой сердечно-сосудистой недостаточности атеросклеротической этиологии. Возрастную группу 31-60 лет (48 + 4) составили 30 аутопсий, группу 61-75 лет (69 + 5) - 14 аутопсий. На основании результатов патологоанатомического вскрытия из исследования был исключен материал, взятый от людей, у которых были заболевания, способные оказать воздействие на иммунологическую реактивность. В качестве контрольного исследован материал судебно-медицинских вскрытий по поводу смерти от острой травмы (20 случаев). Учитывая, что и в этих случаях наблюдали те или иные формы проявления атеросклероза, материал использовали при условии отсутствия выраженных атеросклеротических поражений артерий (при площади поражения аорты не более 10 %). При этом возрастную группу 31-60 лет (44 + 8) составили 11 аутопсий, группу 61-75 лет (64 + 10) - 9 аутопсий.

В каждом случае участки сосуда из грудного отдела аорты и регионарные к ним парааортальные лимфатические узлы изучали в качестве единого комплекса. Исследованию были подвергнуты: неизмененные участки аорты без атеросклеротических поражений, участки с начальными поражениями в виде липидных пятен и участки сосуда с выраженными поражениями в виде липидно-фиброзных и фиброзных бляшек. В качестве отдаленного от аорты периферического лимфоидного органа исследована селезенка. Лимфатические узлы разрезали продольно и всегда строго через ворота узла. Для исследования селезенки материал брали из средней ее части на уровне ворот.

Для морфологического исследования материал фиксировали в жидкости Карнуа. Парафиновые срезы толщиной 3-4 мкм окрашивали метиловым зеленым и пиронином по Браше. Иммуноморфологическое исследование проводили на криостатных срезах толщиной 4-6 мкм, которые фиксировали в 4 %-ном параформальдегиде в течение 15 мин и промывали в фосфатном буфере (рН 7,4). Иммунорегуляторные субпопуляции Т-лимфоцитов определяли непрямым методом Кунса с помощью моноклональных антител (Dako). Использовали антитела к поверхностным антигенам: CD4, CD8, HLA-DR. В качестве вторых антител наносили меченные изотиоционатом флюоресцеина (ФИТЦ) кроличьи антитела к g-глобулину мыши (Институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи), а также моноклональные антитела к иммуноглобулинам мыши, меченные пероксидазой хрена (Dako). IgG в В-лимфоцитах выявляли с помощью прямого метода Кунса с использованием козлиных моноспецифических антител (Sigma, USA), меченных пероксидазой хрена и ФИТЦ. Для контроля специфичности свечения в качестве промежуточной наносили неиммунную сыворотку, а в качестве меченой - антисыворотку несоответствующей специфичности.

Препараты просматривали в световом микроскопе Axiomat (Opton, Germany) и в люминесцентном микроскопе МЛ-4 с входными светофильтрами ФС1-2 и СЗС7-4, запирающим фильтром ЖЗС19-ЖС18.

Проводили морфометрический подсчет CD4+, CD8+ и HLA-DR+ Т-клеток в паракортикальной зоне лимфатических узлов и в Т-зоне белой пульпы селезенки, а IgG-синтезирующих В-лимфоцитов - в мозговых тяжах лимфатических узлов и В-зоне белой пульпы селезенки, не содержащей лимфоидных фолликулов с герминативными центрами. Кроме этого, все перечисленные выше клеточные формы подсчитывали в интиме и адвентиции аорты. Численность изучаемых клеток определяли в 10 полях зрения светового микроскопа без морфометрической сетки (об. _ 100, ок. _ 10 ) и их количество выражали в абсолютных числах. Значимость различий между изучаемыми выборками определяли с помощью t-критерия Стъюдента.

Если Вы хотите прочесть статью целиком, заказывайте компакт-диск,
на котором Вы найдете ВСЕ статьи ВСЕХ номеров журнала за 2002 и 2003 годы!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!


Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2006 год.


Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2007 год.


© 2002-2009 Цитокины и Воспаление