Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
Журнал 'Цитокины и воспаление', 2005, № 4
|
Оригинальные статьи
|
Номер 4'2005
|
ЦИТОКИНОПОСРЕДОВАННЫЕ АСПЕКТЫ ИММУНОПАТОГЕНЕЗА АПЛАСТИЧЕСКОЙ АНЕМИИ
О.Е. Розанова, Л.Н. Бубнова
С целью выяснения цитокинопосредованных аспектов иммунопатогенеза апластической анемии (АА) методом иммуноферментного анализа исследованы синтез и соотношение некоторых гемопоэтических факторов - цитокинов, продуцируемых, в основном, клетками иммунной системы и оказывающих позитивное (IL-1b, IL-2, IL-6, эритропоэтин - EPO) или негативное (TNFa, IFNg) влияние на гемопоэз, а также являющихся антагонистами негативных регуляторов гемопоэза (IL-4). Объектом исследования служили мононуклеарные клетки периферической крови и костного мозга 68 больных АА и мононуклеары периферической крови 35 кадровых доноров. Установлено, что вклад иммунной системы в развитие депрессии кроветворения при АА обусловлен не снижением синтеза позитивных гемопоэтических факторов, но сверхпродукцией негативных регуляторов гемопоэза, а именно, TNFa. Дисбаланс соотношения цитокинов при данном заболевании усугубляется недостаточной продукцией антагониста негативных регуляторов - IL-4. (Цитокины и воспаление. 2005. Т. 4, № 4. С. 34-38.)
Известно, что гемопоэтические ростовые факторы - гемопоэтины, к которым относятся различные колониестимулирующие факторы (CSF), эритропоэтин (EPO) и целый ряд цитокинов, - являются неотъемлемой частью кроветворения и оказывают влияние на все его этапы. В зависимости от характера этого влияния их условно разделяют на позитивные и негативные регуляторы гемопоэза. К позитивным регуляторам относятся те факторы, которые поддерживают пролиферацию полипотентной стволовой клетки (PPSC), миелоидных, эритроидных и лимфоидных предшественников, стимулируя соответствующие ростки кроветворения. Это, прежде всего, различные CSF, EPO, цитокины: IL-1, IL-3, IL-6, IL-11 и т.д. [2]. Другие цитокины, такие как TNF, IFN, трансформирующий фактор роста (TGF), напротив, могут снижать клоногенность всех типов предшественников гемопоэтических клеток, способны подавлять эритро-, моно- и гранулопоэз и относятся к негативным регуляторам гемопоэза [4, 16].
Апластическая анемия (АА) - одно из самых тяжелых заболеваний системы крови, патогенез которого до настоящего времени не ясен. Среди трех основных концепций, объясняющих депрессию кроветворения при АА: 1) поражением стволовой клетки, 2) дефектностью гемопоэтического микроокружения и 3) иммуноопосредованными механизмами, - последняя привлекает все большее внимание исследователей [10, 15]. Действительно, иммуносупрессивная терапия при АА вызывает клинико-гематологическое улучшение или ремиссию и, кроме того, именно клетки иммунной системы являются основными продуцентами большинства вышеперечисленных гемопоэтических факторов.
С целью выяснения цитокинопосредованных аспектов иммунопатогенеза заболевания, задачами настоящей работы были: 1) изучение синтеза гемопоэтических факторов, продуцируемых, в основном, клетками иммунной системы и оказывающих позитивное или негативное влияние на эритро-, тромбо- и гранулопоэз - наиболее уязвимые при АА звенья гемопоэза; 2) изучение продукции антагонистов негативных регуляторов гемопоэза и факторов, поддерживающих пролиферацию Т-лимфоцитов, поскольку при угнетении эритро-, тромбо- и гранулопоэза лимфоидный росток кроветворения у больных АА остается относительно сохранным. Для решения поставленных задач у больных определяли уровень EPO в сыворотке крови, а также продукцию мононуклеарами периферической крови и костного мозга таких цитокинов, как IL-1b, IL-6, TNFa, IFNg, а также IL-4 и IL-2.
Большинство цитокинов плейотропны, действуют в синергизме друг с другом или являются антагонистами и, в зависимости от условий, оказывают как ингибирующее, так и стимулирующее действие на все типы клеток, в том числе на гемопоэтические предшественники [6, 11]. Регуляторные эффекты цитокиновой сети построены на равновесии оппозитных пулов молекул, нарушение которого может приводить к патологии [5]. Поэтому у больных АА мы оценивали также соотношение тех факторов, которые условно принято относить к позитивным или негативным регуляторам гемопоэза.
Материалы и методы
Объектом исследования служили мононуклеарные клетки периферической крови и костного мозга 68 больных тяжелой АА в возрасте от 19 до 65 лет, находившихся на лечении в гематологической клинике РосНИИ ГТ с 1995 по 2004 г. Для определения тяжести заболевания использовали комплекс гематологических критериев, разработанных международной группой изучения апластической анемии [7]. Контролем служили мононуклеары 35 практически здоровых людей (кадровых доноров крови) в возрасте от 22 до 65 лет.
Уровень EPO и цитокинов исследовали иммуноферментным методом с помощью диагностикумов фирм "R&D" (США) и "Протеиновый контур" (Санкт-Петербург).
Для оценки продукции цитокинов in vitro мононуклеары, выделенные из крови или из пунктата костного мозга центрифугированием на градиенте плотности Lymphoprep (Sigma, r = 1,077 г/см3), культивировали 24 ч при 37о С и 5 % СО2 в 96-луночных планшетах в количестве 2x105 на лунку в среде RPMI-1640 с добавлением 10 % эмбриональной телячьей сыворотки и 80 мкг/мл гентамицина. Синтез TNFa, IFNg, IL-1b и IL-6 индуцировали ЛПС-содержащим препаратом пирогеналом (0,1 мкг/лунку), синтез IL-2 и IL4 - фитогемагглютинином (10 мкг/лунку). Не стимулированные культуры служили для оценки спонтанной продукции цитокинов. Все пробы ставили в триплетах. Супернатанты культур исследовали на наличие цитокинов.
Статистическую обработку данных проводили с помощью программы Statistica 4.5. Данные выражали в виде средних арифметических и их стандартных ошибок (M + m). Достоверность различий между сравниваемыми величинами определяли по t-критерию Стьюдента.
Если Вы хотите прочесть статью целиком, заказывайте компакт-диск,
на котором Вы найдете ВСЕ статьи ВСЕХ номеров журнала за 2005 и 2006 годы!
Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
|
Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!
Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2006 год.
Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2007 год.
|
![[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'](/images/Logo.gif){kind=logo}
