Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: cytokines.ru


  


2017 год
3 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

https://pornoseksxxx.com/

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2006, № 2

Подписаться на 2018 год

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 2'2006

ЦИТОТОКСИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ НАТУРАЛЬНЫХ КИЛЛЕРНЫХ КЛЕТОК СЕЛЕЗЕНКИ КРЫС ПРИ СТРЕССЕ И ЕЕ КОРРЕКЦИЯ КОРОТКИМИ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИМИ ПЕПТИДАМИ

А.В. Гумен, С.Н. Шанин, И.А. Козинец, В.В. Малинин, Е.Г. Рыбакина

Исследовали функциональную активность NK-клеток селезенки нормальных, нестрессированных и подвергнутых электроболевому раздражению задних конечностей крыс "Wistar", а также возможность коррекции изменений функции NK-клеток короткими синтетическими пептидами. Стимуляция или подавление цитотоксической активности NK-клеток селезенки зависели от режимов стрессирования животных. Пептиды вилон, эпиталон и кортаген обладали модулирующим действием на цитотоксическую активность NK-клеток селезенки крыс, нарушенную в результате электроболевых воздействий. Вилон и эпиталон снижали цитотоксичность NK-клеток, повышенную после двукратного электроболевого воздействия, и усиливали ее в случае подавления, вызванного жестким однократным электрораздражением; при этом эпиталон в большинстве использованных концентраций оказывал нормализующее действие на измененную функциональную активность спленоцитов, восстанавливая ее до базального уровня. Кортаген не влиял на цитотоксичность спленоцитов нестрессированных животных, но вел себя как наиболее мощный стимулятор подавленной при стрессе цитотоксической активности NK-клеток. Результаты служат фундаментальной предпосылкой для разработки способа использования пептидных иммуномодуляторов с целью коррекции стресс-индуцированных дисфункций иммунной системы. (Цитокины и воспаление. 2006. Т. 5, № 2. С. 37-41.)

Ключевые слова: стресс, короткие пептиды, натуральные киллерные клетки.

В механизмах развития дисфункций иммунной системы при стрессе определяющую роль играют эндогенные биорегуляторы, в том числе регуляторные пептиды. В настоящее время в качестве одного из перспективных подходов к коррекции нарушенных функций иммунной системы рассматривается исследование и последующее использование препаратов, модулирующих активность защитных функций организма, в частности, функциональную активность иммунокомпетентных клеток, в том числе моноцитов, лимфоцитов, натуральных киллерных клеток. Эта стратегия в большой мере основывается на использовании иммуномодулирующих препаратов пептидной природы, разрабатываемых на основе цитокинов, адгезионных молекул, регуляторных пептидов.

Высокой биологической активностью обладают не только природные, но и синтетические пептиды - структурные аналоги эндогенных пептидов или их фрагментов. Дипептид вилон, синтезированный на основании данных аминокислотного анализа комплексных препаратов тимуса, обладает выраженными свойствами иммуномодулятора [1, 2, 5]. Созданный на основе анализа пептида эпифиза эпиталамина, тетрапептид эпиталон, нормализует некоторые нарушенные нейроэндокринные и иммунные показатели у животных [8, 9]. Несомненными перспективами использования для коррекции нарушенных функций мозга и, по-видимому, функциональной активности клеток иммунной системы обладает тетрапептид кортаген - синтетический аналог пептидных биорегуляторов из коры головного мозга [4].

Принципиально значимым результатом исследования биологической активности этих пептидов явилось установление модулирующего действия вилона и эпиталона на комитогенную активность цитокина интерлейкина 1b (IL-1b) - одного из ключевых регуляторов защитных функций организма, играющего важную роль в развитии стрессорной реакции [3], а также на внутриклеточную трансдукцию его сигнала [5].

Настоящее исследование проведено на примере анализа изменений функциональной активности NK-клеток селезенки крыс при стрессорных воздействиях различной длительности и интенсивности, а также возможности их коррекции с помощью коротких синтетических пептидов - вилона, эпиталона и кортагена.

Материалы и методы

Эксперименты выполнены на 22 крысах-самцах "Wistar" массой 160-200 г. До введения в эксперимент животных в течение 5 дней приучали к экспериментальной обстановке. В качестве модели экспериментального стресса использовано электроболевое раздражение задних конечностей крыс в 2 режимах.

Экспериментальные группы животных:

  • Интактные животные;
  • Контрольные животные, подвергнутые ложному электроболевому раздражению (помещенные в контейнеры с подведением электродов при выключенном приборе) в том же временном режиме, что и соответствующая группа опытных животных;
  • Животные, подвергнутые электроболевому раздражению задних конечностей в области голеностопного сустава постоянным током в 1,5 мА, продолжительность импульса - 1 сек, 4 импульса в мин, в случайном порядке, дважды, по 30 мин (в 10 и 16 часов);
  • Животные, подвергнутые электроболевому раздражению задних конечностей в том же режиме электрораздражения однократно, в течение 60 мин (в 10 часов).

Селезенки извлекали через 20 часов после завершения аппликации двухэтапного стресса и через 2 часа после прекращения одноразового электроболевого раздражения; из них выделяли спленоциты. Отмытые спленоциты разводили в среде RPMI-1640 с добавлением 10 % инактивированной фетальной сыворотки ("Биолот", Санкт-Петербург). В качестве мишеней для NK-клеток селезенки крыс использовали клетки миелолейкоза человека К-562 (Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург), которые поддерживали in vitro в среде RPMI-1640 с добавлением 10 % фетальной сыворотки, 2 мМ глютамина, 1,2 мМ HEPES (pH 7,3), 1,2 % глюкозы и 0,08 мг/мл гентамицина (Sigma). Клетки-мишени метили 3Н-уридином (В/О "Изотоп", Россия). Смесь инкубировали в СО2-инкубаторе при 37 °С, 100 % влажности и 5 % СО2 в течение 4 часов. Затем клетки ресуспендировали в среде RPMI-1640 с 10 % фетальной сывороткой из расчета 2 _ 105 клеток/мл с добавлением 20 мкг/мл РНКазы (Sigma). Для оценки цитотоксической активности NK-клеток селезенки в каждую лунку круглодонных планшетов (Sarstedt, USA) вносили суспензии клеток-эффекторов и клеток-мишеней в соотношении эффектор:мишень = 50:1.

Препараты исследуемых пептидов вносили в суспензии клеток в концентрациях 1,0 _ 103, 0,5 _ 103, 0,25 _ 103, 0,125 _ 103 и 0,0625 _ 103 нг/мл. Планшеты инкубировали в течение 20 часов в СО2-инкубаторе при 37 °С с 5 % СО2 и 100 % влажности. Реакцию между NK-клетками селезенки и клетками-мишенями учитывали количественно при использовании жидкостного сцинтилляционного b-счетчика (Beckman, USA) по уровню меченого уридина в нелизированных клетках-мишенях в течение 1 мин (имп./мин). Цитотоксическую активность NK-клеток селезенки в % рассчитывали по формуле:

В работе применялись короткие синтетические пептиды: Lys-Glu (вилон), Ala-Glu-Asp-Gly (эпиталон) и Ala-Glu-Asp-Pro (кортаген), созданные в Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН.

Результаты исследования обработаны статистически с применением критерия t-Стьюдента. Данные представлены в виде средних значений + ошибка среднего.

Если Вы хотите прочесть статью целиком, заказывайте компакт-диск,
на котором Вы найдете ВСЕ статьи ВСЕХ номеров журнала за 2005 и 2006 годы!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!


Начата подписка на 2018 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2018 Цитокины и Воспаление