Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: cytokines.ru


  


2016 год
1 номер 2 номер
3 номер 4 номер

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2007, № 4

Подписаться на 2018 год

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 4'2007

АНАЛИЗ АССОЦИАЦИИ ПОЛИМОРФНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ С БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙВ РЕСПУБЛИКЕ БАШКОРТОСТАН

А.С. Карунас, А.Р. Измайлова, Ш.З. Загидуллин, Э.К. Хуснутдинова

Бронхиальная астма (БА) - распространенное хроническое заболевание дыхательных путей, развитие которого определяется взаимодействием генетических и средовых факторов. Цитокины играют важную роль в развитии и поддержании аллергического воспаления дыхательных путей при БА. В работе представлены результаты анализа ассоциации полиморфных вариантов генов цитокинов и их рецепторов (IL-4, α-цепи рецептора IL-4 и IL-10) с БА в республике Башкортостан (РБ). Материалом для исследования послужили образцы ДНК 156 больных БА и 169 здоровых доноров, проживающих в РБ. Геномную ДНК выделяли из периферической крови фенольно-хлороформной экстракцией. Амплификацию локусов проводили с помощью ПЦР; генотипирование изучаемых полиморфизмов проводили методом полиморфизма длин рестрикционных фрагментов. Обнаружена ассоциация аллеля IL4*Т промоторного полиморфизма гена IL-4 (-590C>Т) с БА у татар, а также ассоциация генотипа IL4*Т/*Т с выраженным нарушением вентиляционной функции легких. Выявлена ассоциация IL4RA*Ile50/*Ile50 генотипа Ile50Val полиморфизма гена α-цепи рецептора IL-4 с БА у русских и ассоциация данного генотипа с тяжестью течения заболевания. Показано отсутствие ассоциации полиморфных вариантов Gln576Arg гена IL4RА и -627С>А гена IL-10 с бронхиальной астмой в РБ. (Цитокины и воспаление. 2007. Т. 6, № 4. С. 22-28.)

Ключевые слова: бронхиальная астма, цитокины, гены, полиморфные варианты.

Бронхиальная астма (БА) - одно из наиболее распространенных многофакторных хронических воспалительных заболеваний дыхательных путей, представляющих серьезную проблему как для детей, так и для взрослых [1] . Высокая распространенность и неуклонный рост в последние годы данной патологии определяют важное социально-экономическое и медицинское значение этой проблемы, необходимость исследования механизмов развития заболевания с целью разработки эффективных методов диагностики, профилактики и патогенетической терапии с учетом этнической принадлежности и генетических особенностей каждого больного. В настоящее время известно более 100 генов, функция белковых продуктов которых тесно связана с развитием БА [12]. Проведено более двадцати полногеномных скринингов, в результате которых подтверждено сцепление БА с локусами, в которых локализованы гены-кандидаты данного заболевания (5q31.1-33, 6p12-21.2, 11q12-13, 12q14-24.1, 16p12.1-11.2, Xq28/Yq12), выявлен целый ряд других ДНК-локусов, сцепленных с БА [12]. Среди значительного количества генов-кандидатов БА особое место занимают гены цитокинов, участвующих в развитии и поддержании аллергических реакций и воспаления дыхательных путей. Как и при многих других воспалительных заболеваниях, при БА наблюдается дисбаланс противо- и провоспалительных цитокинов в пользу последних, что может приводить к нарушению адекватного течения воспалительного ответа. Целью исследования явилось изучение ассоциации полиморфных вариантов генов интерлейкина 4 (-590С>Т), α-цепи рецептора интерлейкина 4 (Ile50Val, Gln576Arg) и интерлейкина 10 (-627С>А) с БА в Республике Башкортостан (РБ).

Материалы и методы

Материалом для исследования служили образцы ДНК больных с БА, проживающих в РБ. Обследованный контингент представлен 156 больными БА различной этнической принадлежности (60 русских, 33 татарина, 16 башкир и 47 пациентов метисного происхождения). Средний возраст больных составил 46,5 года. Диагноз заболевания устанавливался согласно положению: "Бронхиальная астма. Руководство для врачей России (формулярная система)" на основании данных клинического и лабораторного обследования, данных спирографии, рентгенографии, кожных аллергологических проб. В качестве контроля в исследовании участвовала группа здоровых доноров, представленная жителями РБ русской (58 человек), татарской (61 человек) и башкирской (50 человек) этнической принадлежности.

ДНК выделяли из периферической крови методом фенольно-хлороформной экстракции [8]. Амплификацию изученных локусов проводили с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) синтеза ДНК на амплификаторе "Терцик" производства компании "ДНК-технология" (г. Москва). Для амплификации использовали реакционную смесь объемом 25 мкл, которая содержала 2,5 мкл 10xTaq-буфера (67 мМ трис-HCl (pH 8,8), 16,6 мМ (NH4)2SO4 1,5 мМ MgCl2, 0,01% Тween-20), 0,1 мкг геномной ДНК, смесь dNTP (dATP, dGTP, dCTP, dTTP, по 200 мкМ каждого), 1 ЕД ДНК-полимеразы Termus aquaticus ("Cилекс", г. Москва) и 5-10 пМ локусспецифичных олигонуклеотидных праймеров. Перечень исследуемых локусов, последовательности праймеров, размеры амплифицируемых фрагментов представлены в табл. 1. Для определения нуклеотидных замен методом полиморфизма длин рестрикционных фрагментов проводили гидролиз амплифицированных фрагментов соответствующей рестриктазой (см. табл. 1). Результаты ПДРФ-анализа оценивали путем проведения вертикального электрофореза в 7%-ном полиакриламидном геле с последующим окрашиванием бромистым этидием и визуализацией в проходящем ультрафиолетовом свете. Cтатистическую обработку результатов исследования проводили с использованием программ Statistica 6.0 [14] Microsoft Exсel.

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!


Начата подписка на 2018 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2017 Цитокины и Воспаление