Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
Журнал 'Цитокины и воспаление', 2008, № 1
|
Врачу общей практики
|
Номер 1'2008
|
ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНЫЕ ГЕПАТОТРОПНЫЕ ЭФФЕКТЫ ХРОНИЧЕСКОГО СТРЕССА И ПОВЫШЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К ЦИТОКИН-ЗАВИСИМОЙ СУПРЕССИИ НЕКОТОРЫХ ИЗОФОРМ ЦИТОХРОМА Р450
В.Э. Цейликман, О.Б. Цейликман, С.В. Сибиряк, Д.А. Сысаков, А.С. Симбирцев
На фоне иммобилизационного стресса, характеризующегося провоспалительными гепатотропными эффектами, развивается повышенная чувствительность к действию рекомбинантного IL-1 (беталейкина). Это проявляется в усилении индуцированного беталейкином лейкоцитоза и усугублении опосредованной рекомбинантным цитокином супрессии цитохром Р450-зависимых монооксигеназ печени. (Цитокины и воспаление. 2008. Т. 7, № 1. С. 55-58.)
В последнее время появились данные о способности повторных стрессорных воздействий вызывать в печени изменения иммуновоспалительного характера, проявляющиеся в лейкоцитарной инфильтрации паренхимы при одновременном возрастании уровня некробиотического поражения органа [7]. Подобные изменения интерпретируются как проявления неспецифического реактивного гепатита. Однако механизмы провоспалительных гепатотропных эффектов хронического стресса остаются неизвестными. Тем не менее, не вызывает сомнений причастность провоспалительных цитокинов к развитию стресс-индуцированного гепатита.
В настоящее время убедительно доказано наличие гиперцитокинемии при самых разнообразных стрессорных ситуациях [3, 5, 7, 10]. Стал общепринятым взгляд на циркулирующие цитокины как на эндокриноподобные факторы [1, 3, 9, 10]. Обычно в исследованиях в области экспериментальной эндокринологии определение содержания любого гормона дополняется определением чувствительности к нему органов и тканей [4]. В настоящее время фармакологическое моделирование эндокринных эффектов стресса разработано применительно к глюкокортикоидам и катехоламинам [3, 4]. К сожалению, подобные подходы еще не касаются цитокинов. Для их разработки существуют объективные затруднения, связанные с полифункциональностью цитокинов и с наличием "цитокиновой сети" в пределах которой сложно выявлять причинно-следственные отношения [5, 7, 10]. Эти обстоятельства приводят к несовпадению цитокиновых эффектов в условиях in vivo и in vitro. Тем не менее, IL-1-зависимая супрессия монооксигеназной активности изоформ цитохрома Р450 - CYP1A1 и CYP2B1/2 проявляется как in vivo, так и in vitro. Поэтому для оценки чувствительности печени к действию провоспалительных цитокинов в качестве тест-объекта представляется перспективным использовать реакции CYP1A1- и CYP2B1/2-зависимого монооксигенирования. В представленном исследовании изучали модулирующее влияние повторных стрессорных воздействий с провоспалительным гепатотропным эффектом на IL-1-зависимую супрессию цитохром Р-450-зависимых монооксигеназ.
Материалы и методы
Эксперименты выполнены на 75 белых крысах линии Вистар. В ходе эксперимента животные были разделены на 4 группы. Первая группа была контрольной. Вторая (группа "беталейкин") получала внутрибрюшинно беталейкин - препарат рекомбинантного IL-1?. Третья была подвергнута трехкратному 1-часовому иммобилизационному стрессу с интервалом между воздействиями 24 ч (группа "стресс"). Этот режим характеризуется провоспалительным гепатотропным действием. Четвертая группа (группа "стресс?+?беталейкин") получала через 24 ч после завершения повторных иммобилизаций беталейкин в той же дозе, что и животные 2-й группы. Через 24 ч после завершения воздействия животных умерщвляли. Содержание циркулирующих цитокинов определяли иммуноферментным методом с использованием реагентов "Biosource" (Belgium). Для определения активности IL-1 в исследуемых сыворотках использовали тимоциты мышей линии С3Н/HeJ. Проводили анализ лейкоцитарной формулы крови и миелограммы. Активности монооксигеназ оценивали флуориметрическим методом, используя субмитохондриальную фракцию гомогенатов печени (S12?фракция) [10]. Определяли 7-этоксирезоруфин-О-деэтилазную активность (ЭРОД-активность; CYP1A1-зависимое монооксигенирование) и 7-бензилоксирезоруфин-дебензилазную активность (БРОД-активность; CYP2В1/2-зависимое монооксигенирование, и CYP3A-зависимое монооксигенирование).
Содержание продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали спектрофотометрически в липидном экстракте исследуемых тканей по методике [2, 4]. Гистологические препараты печени готовили по стандартным методикам (кусочки фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина с последующей проводкой через спирты, заключали в парафин, изготавливали серийные срезы толщиной 5-7 мкм, которые после депарафинирования окрашивали гематоксилином и эозином). Морфометрическое определение абсолютного количества клеток (гепатоцитов, моноцитов/макрофагов, лимфоцитов) проводили в расчете на 1 мм2 среза. Объемное содержание других исследуемых объектов выполнено с применением планиметрического метода точечного счета.
Данные обрабатывали общепринятыми методами вариационной статистики и выражали в виде средней арифметической (М) и ошибки средней (m). Оценку достоверности различий осуществляли с помощью непараметрических критериев (U-критерия Вилкоксона - Манна - Уитни; WW-критерия Вальда - Вольфовица, одностороннего критерия ? Колмогорова - Смирнова).
Читайте статью целиком
в печатной версии журнала!
Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
|
Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!
Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2006 год.
Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2006 год.
|
![[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'](/images/Logo.gif){kind=logo}
