197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 234 16 69, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 234 94 89
E-mail: [email protected]
Web: cytokines.ru

  

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'cytokines.ru', 2008, № 3

ЦИТОКИНОВЫЙ ПРОФИЛЬ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ЗНАЧЕНИЕ ДНКВ ЯДРАХ ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИУ НОВОРОЖДЕННЫХ С ГИПОКСИЧЕСКИМ ПЕРИНАТАЛЬНЫМ ПОРАЖЕНИЕМ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ

Н.Е. Громада

Проведено исследование содержания цитокинов (интерлейкинов 1?, 4, 6, фактора некроза опухолей ?) в крови у 75 доношенных новорожденных с перинатальным гипоксическим поражением центральной нервной системы в возрасте 1-е-3-и, 5-7-е, 28-е сутки жизни. Определяли среднее количественное значение ДНК в ядрах лимфоцитов методом кариометрии. Выявлен дисбаланс между про- и противовоспалительными цитокинами и их взаимосвязь с количеством ДНК в ядрах лимфоцитов в зависимости от степени тяжести перинатальной гипоксии. (cytokines.ru. 2008. Т. 7, № 3. С. 14-18.)

В настоящее время проблема прогнозирования исходов и катамнестического наблюдения за новорожденными с постгипоксическим поражением центральной нервной системы остается актуальной. Методы лабораторного исследования центральной нервной системы (ЦНС), используемые наряду с визуализирующими методами исследования, не могут представить объективной информации о степени поражения клеток мозга и не позволяют судить о прогнозе. В этой связи имеет значение использование нейроиммунологических методов оценки состояния ЦНС у новорожденных детей, перенесших перинатальную гипоксию [2].

Все цитокины или их рецепторы обнаружены во многих клетках ЦНС, в том числе и в нейронах. Повышение концентрации интерлейкинов TNF? и IL-1? не только свидетельствует об острой системной воспалительной реакции в ответ на различные инфекционные воспалительные факторы, но отражает избыточную продукцию данных интерлейкинов глиальными клетками и макрофагами при ишемии. Как известно, при перинатальной гипоксии нарушается функция гематоэнцефалического барьера (ГЭБ) и цитокины поступают в кровоток [3, 6, 7].

Исследования подтверждают гипотезу о том, что провоспалительные цитокины IL-1? и TNF?, быстро появляющиеся в поврежденном мозге, ответственны за прогрессирующее повреждение нейронов, и что эти медиаторы являются важными пусковыми факторами в нейропротективной интервенции после острого периода повреждения мозга. Многие цитокины играют двоякую роль, ускоряя или предотвращая гибель апоптотических нервных клеток [4, 6, 7].

Кроме того, периферические цитокины высвобождаются иммунными клетками (лимфоцитами, моноцитами, макрофагами) при воспалении, стимулируя самые различные физиологические, нейроэндокринные и иные реакции ЦНС. В свою очередь, ЦНС регулирует иммунную систему на локальном и общем уровнях различными путями [4, 6, 8, 9].

Интерлейкин 6 (IL-6) также относится к цитокинам острой фазы воспаления, но его длительное повышение свидетельствует о поддержании патологического процесса [4, 8].

Отсутствует достаточная информация о повреждающем действии перинатальной гипоксии на ДНК ядер клеток, в том числе лимфоцитов. Повреждение ДНК клеток в результате окислительного стресса можно рассматривать как один из пусковых механизмов апоптоза [5]. Можно полагать, что механизмы повреждения ДНК иммунокомпетентных клеток на фоне гипоксии являются молекулярно-биохимическими механизмами формирования иммунологической недостаточности и развития вторичных иммунодефицитных состояний.

Целью настоящего исследования явилось изучение содержания цитокинов в крови и их взаимосвязи с количественным значением ДНК в ядрах лимфоцитов периферической крови новорожденных с гипоксическим перинатальным поражением ЦНС различной степени тяжести.

Материалы и методы

Обследованы 120 доношенных новорожденных (62 мальчика, 58 девочек) с перинатальным гипоксическим поражением ЦНС различной степени тяжести. Средняя масса тела новорожденных - 3560+-220,4 г, длина тела - 51,8+-1,8 см. В обследование не были включены дети с врожденными пороками развития, недоношенные, с синдромом задержки внутриутробного развития, внутриутробной инфекцией и гнойно-воспалительными заболеваниями, травматическим поражением ЦНС. Дети были разделены на три группы по клинико-нейрофизиологическим признакам: 1-я группа (n=25) - гипоксическая энцефалопатия легкой степени; 2-я группа (n=25) - средней тяжести; 3-я группа (n=25) - гипоксическая энцефалопатия тяжелой степени. В группу сравнения (группу 4) включены 45 здоровых новорожденных без неврологических и соматических отклонений. Группы наблюдения были сопоставимы по антропометрическим параметрам, полу, факторам риска развития перинатальной патологии, клиническим синдромам, патогенетической терапии. Все дети были обследованы по общим клиническим и нейрофизиологическим методикам согласно рекомендательным стандартам. Клиническое обследование проводили на базе родильного отделения городской больницы № 14 Екатеринбурга и отделения патологии новорожденных детской городской больницы № 5. Новорожденные с легкой степенью гипоксической энцефалопатии были выписаны домой и практически не нуждались в проведении лечебных мероприятий.

Содержание цитокинов в сыворотке крови изучали с помощью иммуноферментного анализа в 1-е-3-и, 5-7-е, 28-е сутки жизни. Уровень TNF?, интерлейкинов 1?, -4, -6 определяли наборами фирмы ООО "Протеиновый контур" (Санкт-Петербург). Параллельно у всех детей в указанные периоды наблюдения (физиологические точки транзиторного состояния лимфоцитов неонатального гемопоэза) определяли среднее количественное значение ДНК в ядрах лимфоцитов методом кариометрии по оптической плотности ядер при окраске по Фельгену. Использованы компьютерные микротелефотометрические автоматизированные системы с математическим моделированием гистопатологического процесса. Метод кариометрии разработан на основании методологии и медицинской морфометрии, методики плоидометрии лимфоцитов, предложенной и усовершенствованной Г.Г. Автандиловым [1]. Этот метод ранее не использовался с целью диагностики гипоксии у новорожденных.

Статистическую обработку данных осуществляли в операционной среде Windows 2000 с использованием программы Statistica. Для сравнения показателей использовались непараметрические методы (тесты Манна - Уитни, Вилкоксона).

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "cytokines.ru" он-лайн!


Обновление на книжной полке: компакт-диск cytokines.ru, 2006 год.


Обновление на книжной полке: компакт-диск cytokines.ru, 2007 год.