Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
Журнал 'Цитокины и воспаление', 2016, № 2
|
Оригинальные статьи
|
Номер 2'2016
|
Синтетические пептиды и рекомбинантные цитокины в схеме экстренной профилактики экспериментального мелиоидоза
И.А. Лебедева, А.В. Топорков, С.И. Жукова, К.А. Ротов, Е.А. Снатенков
Мелиоидоз — особо опасное инфекционное заболевание, вызываемое Burkholderia pseudomallei, против которого пока не разработана вакцина. С целью повышения эффективности экстренной профилактики экспериментального мелиоидоза были использованы препараты рекомбинантных цитокинов (IL-1, IL-2, IFNγ), синтетических пептидов (бестим, имунофан, глутоксим) при их совместном применении с антибиотиком доксициклином. Предварительные эксперименты показали, что 2–3-кратное введение мышам глутоксима, бестима, имунофана или IFNγ без антибиотика как до, так и после заражения повышало резистентность животных к мелиоидозу. Данные препараты были испытаны совместно с доксициклином в схеме экстренной профилактики мелиоидозной инфекции. Показано, что комбинированное введение доксициклина и имунофана позволяло повысить на 20 % выживаемость от заражения 5 ЛД50B. pseudomallei исущественно увеличить среднюю продолжительность жизни мышей (р<0,05). Иммуностимулирующая активность бестима, глутоксима и IFNγ в сочетании с антибиотиком была менее выраженной. (Цитокины и воспаление. 2016. Т. 15. № 2. С. 181–185.)
Ключевые слова: мелиоидоз, иммунитет, экстренная профилактика, синтетические пептидные иммуномодуляторы, рекомбинантные цитокины.
Мелиоидозная инфекция, относящаяся к категории особо опасных, эндемична для стран Юго-Восточной Азии, но с ростом туризма, углублением и развитием экономических и культурных связей с данным регионом мира существует опасность завоза этой инфекции и в Россию. Отсутствие на сегодняшний день мелиоидозной вакцины диктует необходимость усовершенствования схем лечения и экстренной профилактики мелиоидозной инфекции. При экстренной профилактике мелиоидоза рекомендуется использовать следующие антибактериальные средства: хлорамфеникол, доксициклин, ципрофлоксацин, ко-тримоксазол, сульфазин, триметоприм и их сочетания с рифампицином [11]. Однако действующие в настоящее время рекомендации по антибиотикотерапии мелиоидоза не гарантируют выздоровления и не исключают возможности перехода инфекции в хроническую форму, что побуждает исследователей к разработке средств и методов повышения резистентности к возбудителю болезни — Burkholderia pseudomallei. Одним из способов повышения эффективности экстренной профилактики и лечения инфекций является включение в лечебные схемы иммуномодулирующих препаратов (ИМ). Так, Бондаревой Т.А. и др. показано увеличение продолжительности жизни и повышение выживаемости животных, зараженных возбудителем чумы, при введении полиоксидония на фоне лечения антибиотиком [5]. В исследованиях, проводимых нами ранее, отмечена способность ряда препаратов (продигиозан, сальмозан, растительный препарат С-13 и др.) повышать неспецифическую резистентность к мелиоидозной инфекции [6].
Развитие современной медицины и фармакологии позволило получить большое число новых синтетических иммунотропных препаратов. Среди них синтетические пептиды — аналоги тимических гормонов бестим (γ-D-глутамил-триптофан) и имунофан (аргинил-альфа-аспартил-лизил-валил-тирозил-аргинин), а также препарат глутоксим, химически синтезированный гексапептид (бис-(гамма-L-глутамил)-L-цистеинил-бис-глицин динатриевая соль), являющийся структурным аналогом естественного метаболита — окисленного глутатиона (GSSG). Препараты бестим и имунофан нашли применение в лечении туберкулеза, хронического пиелонефрита, хронического хламидиоза, вирусных респираторных болезней, гепатитов C и B, цитомегаловирусной инфекции, герпетической инфекции, хламидиоза, криптоспоридиоза, пневмоцистоза, листериоза и других [4, 8]. Глутоксим используется в практической медицине для лечения различных онкологических и инфекционных болезней (гепатитов C и B, острых респираторных вирусных инфекций, туберкулеза) [10]. Сравнительно новыми иммуномодулирующими средствами, вошедшими в клиническую практику, являются и рекомбинантные цитокины, которые используются, в частности в инфекционной патологии, в качестве средств иммунотерапии при сепсисе различной этиологии, хирургических, острых кишечных инфекциях, хламидиозе, туберкулезе, рецидивирующем герпесе, гепатитах и других бактериальных и вирусных инфекциях [1, 2]. Нами была показана возможность усиления иммуногенных и протективных свойств мелиоидозных антигенных комплексов препаратами рекомбинантных цитокинов [7].
Общей отличительной чертой всех вышеперечисленных препаратов является их способность стимулировать преимущественно клеточные иммунные реакции, что особенно важно в защите от мелиоидозной инфекции. В схемах экстренной профилактики мелиоидоза до настоящего времени не было предложено использование иммуномодуляторов (ИМ) совместно с антибиотиками.
Целью данного исследования являлось изучение возможности повышения резистентности к мелиоидозу с помощью некоторых препаратов рекомбинантных цитокинов (беталейкин, ронколейкин, ингарон), синтетических пептидов (бестим, имунофан, глутоксим), а также испытание на мышиной модели мелиоидоза комбинированного применения ИМ и антибиотика в режиме экстренной профилактики инфекции.
Материалы и методы
Работа выполнена на беспородных белых мышах. Использованы препататы рекомбинантных цитокинов: IFNγ (ингарон) (НПП «Фармаклон», г. Оболенск), IL-2 (ронколейкин) и IL-1 (беталейкин) (ФГУП «Гос. НИИ ОЧБ» ФМБА России, Санкт-Петербург), препараты синтетических пептидов: бестим (ФГУП «Гос. НИИ ОЧБ» ФМБА России, Санкт-Петербург), имунофан (НПП «Бионокс», Москва), глутоксим (ЗАО «Фарма ВАМ», Санкт-Петербург).
С целью повышения неспецифической резистентности животных к мелиоидозу ИМ вводили как до, так и после заражения вирулентным штаммом возбудителя мелиоидоза. Испытывали эффективность двух способов введения ИМ: подкожного и внутрибрюшинного. При введении ИМ до заражения использовали следующие варианты: однократное введение за 1 сутки до заражения (схема -1), двукратное — за двое и одни сутки до заражения (схема -2-1), трехкратное в пределах одних суток — за 24, 6, 1 час до заражения (схема -24-6-1) и трехкратное — за трое, двое и одни сутки до заражения (схема -3-2-1). При введении ИМ до и после заражения были испытаны две схемы их применения: по первой схеме (-1,+1) препараты вводили мышам двукратно — за одни сутки до заражения и на следующие сутки после заражения; по второй схеме (1-,0,+1) ИМ вводили трехкратно — за одни сутки до заражения, в день заражения и на следующие сутки после заражения. Животные получали ИМ в следующих дозах: бестим — 0,04–0,6 мкг, имунофан — 0,02–0,1 мкг, IL-1 — 0,4–1,2 нг, IL-2 — 0,8–2,4 мкг, IFNγ — 4–60 МЕ, глутоксим — 15–45 мкг. Для моделирования экспериментальной инфекции использовали умеренно вирулентный штамм возбудителя мелиоидоза Burkholderia pseudomallei C-141 (ЛД50 – 103 м.кл ), односуточную агаровую культуру которого вводили мышам подкожно в дозах 3–12 ЛД50. За зараженными животными наблюдали 30 дней, после чего вычисляли показатели выживаемости: процент выживших и среднюю продолжительность жизни (СПЖ).
На белых мышах было испытано также сочетанное применение ИМ и антибиотика в схеме экстренной профилактики мелиоидозной инфекции. Препараты бестим, имунофан, глутоксим, IL-1, IL-2, IFNγ вводили животным внутрибрюшинно дважды: за одни сутки до и на следующие сутки после заражения. Антибиотик доксициклин инъецировали подкожно один раз в сутки в дозе 2 мг в течение трех суток после заражения. Заражение проводили культурой B. pseudomallei C-141 в дозе 5 ЛД50. Спустя 30 суток после заражения вычисляли показатели выживаемости животных.
Статистический анализ результатов экспериментов осуществляли по Фишеру — Стьюденту [3].
Результаты и обсуждение
Читайте статью целиком
в печатной версии журнала!
Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
|
Начата подписка на 2016 год!
Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.
|
![[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'](/images/Logo.gif){kind=logo}
