Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
Журнал 'Цитокины и воспаление', 2017, № 3
|
Краткие сообщения
|
Номер 3'2017
|
Оценка кислородзависимой цитотоксичности фагоцитирующих клеток у больных алкогольным фиброзом печени
Н.Д. Газатова, К.А. Юрова, Д.В. Гаврилов, Л.С. Литвинова
Проведено исследование кислородзависимой цитотоксичности нейтрофилов и моноцитов крови у 58 пациентов с алкогольным фиброзом печени (АФП) разной степени выраженности. Рост значений (по сравнению с контролем) спонтанного и стимулированного (пирогеналом) НСТ-теста фагоцитирующих клеток у больных АФП (независимо от стадии фиброза) может свидетельствовать об их повышенной функциональной реактогенности, в условиях которой они могут реализовывать свой биоцидный потенциал при контакте с различными чужеродными белками (Цитокины и воспаление. 2017. Т. 16. № 3. С. 33–35.)
Ключевые слова: алкогольный фиброз печени, нейтрофилы, моноциты.
Длительное употребление алкоголя является преобладающим этиологическим фактором в патогенезе хронических заболеваний печени, включая стеатоз, фиброз и цирроз [4]. Ацетальдегид, метаболит этанола, оказывает как прямое токсическое воздействие на клетки печени, так и опосредованное: связываясь и образуя ковалентные химические аддукты с белками, липидами и ДНК,ацетальдегид изменяет структуру высокомолекулярных соединений, наделяя их антигенными свойствами [2, 6, 7]. В ответ на изменение структурных компонентов экстрацеллюлярного матрикса происходит активация клеток врожденного иммунитета (моноцитов, нейтрофилов), которые высвобождают ряд активных форм кислорода (АФК) и провоспалительных факторов (цитокинов, хемокинов), способствующих миграции в очаг повреждения иммунных клеток, что приводит к усилению инфильтративного компонента воспаления и усугубляет повреждение паренхимы печени [1].
Целью настоящего исследования явилась оценка кислородзависимой цитотоксичности клеток фагоцитарной системы (нейтрофилов, моноцитов) периферической крови у пациентов с алкогольным фиброзом печени.
Материалы и методы
Исследование проводили согласно протоколу Конвенции Совета Европы о правах человека и биомедицине 1999 г. и Хельсинской Декларации ВМА 2000 г. Разрешение на проведение исследования получено в локальном этическом комитете БФУ им. И. Канта (Калининград).
Материалом для исследования служила периферическая кровь, взятая из локтевой вены утром натощак с помощью стандартных вакуумных систем «BD VACUTAINERTM» («Greiner-bio-one», Австрия) с гепарином (20 ЕД/мл) у 58 больных алкогольным фиброзом печени (АФП, МКБ 10 — K70.2) (28 женщин и 30 мужчин в возрасте 46,4±5,6 года) и 20 условно здоровых доноров (10 женщин и 10 мужчин в возрасте 38,3±6,4 года). По данным шкалы METAVIR пациенты были разделены на 4 группы в зависимости от стадии фибротического процесса. Фагоцитарную активность нейтрофилов и моноцитов периферической крови оценивали методом J.S. Steward и др. в модификации Б.С. Нагоева. В пластиковые пробирки помещали 200 мкл периферической крови (для нейтрофилов) или 200 мкл лейкоконцентрата (для моноцитов), смешивали с 0,9 % раствором NaCl и центрифугировали в течение 5 мин при 1500 об./мин. Надосадок удаляли, добавляли 200 мкл раствора НСТ, инкубировали 30 мин при температуре +37 ºС. Готовили толстые мазки крови, фиксировали 3 мин метанолом, промывали в проточной воде и высушивали. Далее проводили окрашивание бриллиантовым зеленым (1 мин), промывали проточной водой, высушивали и докрашивали 0,5 % раствором сафранина в течение 10 мин. Индуцированный НСТ-тест проводили аналогичным образом, стимулируя поглотительную способность нейтрофилов и моноцитов пирогеналом (25 МПД). Для количественного выражения результатов подсчитывали 200 нейтрофилов и моноцитов в мазке и вычисляли процентное содержание исследуемых клеток с отложениями диформазана в виде гранул или сплошных комков. Анализ полученных данных осуществляли с помощью пакета статистических программ IBM SPSS Statistics 20 (Statistical Package for the Social Sciences).
Результаты и обсуждение
Читайте статью целиком
в печатной версии журнала!
Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья
|
Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!
Начата подписка на 2018 год!
Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.
|
![[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'](/images/Logo.gif){kind=logo}
